抗鸡球虫病的三嗪类新化合物纳川珠利的药效试验

采用抗鸡柔嫩艾美尔球虫实验室笼养试验模型,对新合成的三嗪化合物纳川珠利进行了2批次的抗球虫活性试验。结果显示,纳川珠利添加剂量5、10和30 mg/kg时,抗球虫指数均大于180。添加剂量1和3 mg/kg时,见有少量血便和盲肠病变,抗球虫活性介于中效和高效之间。表明纳川珠利是一种高效安全的新型三嗪类抗球虫化合物,推荐使用剂量以3~5 mg/kg为宜,有望开发成为一种新的抗球虫药物。

纳米磷酸钙作为猪瘟多肽疫苗佐剂的研究

为了探索纳米磷酸钙(NCaP)作为猪瘟多肽疫苗佐剂的可行性,本研究利用猪瘟多肽疫苗作为抗原,制备纳米磷酸钙吸附猪瘟多肽疫苗。将制备好的疫苗免疫兔后,分别检测兔抗体水平和攻毒后体温变化情况。检测结果显示,纳米磷酸钙对猪瘟多肽吸附率达70%;免疫后纳米磷酸钙佐剂组抗体水平低于弗氏佐剂,但与游离猪瘟多肽疫苗组相比,有较大提高;除弗氏佐剂组外,所有实验兔均有体温升高现象,纳米磷酸钙佐剂组体温升高的时间与空白组相比推迟16 h。结果表明,NCaP作为佐剂相对游离猪瘟多肽可提高其免疫效果,但其诱导的抗体水平低于弗氏佐剂组。

磷酸钙作为O型口蹄疫多肽疫苗佐剂的研究

为了探索磷酸钙（calciumphosphate，CaP）作为多肽疫苗佐剂的可行性，本研究以O型口蹄疫多肽疫苗为抗原，采用共沉淀法制备CaP-多肽复合物，测定包封率。将制备好的疫苗，分别在0、14、28d腹腔注射免疫Wistar大鼠，尾静脉采血检测口蹄疫抗体水平。结果显示，CaP可包裹一定量的O型口蹄疫多肽，包封率达到50％，免疫大鼠后油佐剂组抗体效价在14d达到2^6，42d增至2^10并可维持35-42d；CaP组在21d后陆续产生抗体，抗体水平较油佐剂低，为2^7～2^8。结果表明，CaP作为佐剂相对游离多肽可以提高O型口蹄疫多肽疫苗免疫效果，但抗体水平相对油佐剂低。

纳川珠利在鸡体内的药动学特征及其与血浆蛋白结合率的研究

为了解纳川珠利在靶动物鸡体内的药动学参数,选用5周龄健康浦东黄羽肉鸡,按照体重单次灌服1、5和10mg/kg受试化合物,采用UPLC-UV方法检测待测样品中目标化合物的浓度,采用体外平衡渗析法检测血浆蛋白结合率。结果显示,纳川珠利在鸡体内的动力学过程符合一级消除动力学,吸收速率常数(Ka)平均0.74h-1,消除速率常数(Ke)平均0.076 3h-1,半衰期(t1/2)平均9.43h,表观分布容积(V/F)平均0.207 7L/kg,低、中、高给药剂量下血药质量浓度-时间曲线下面积AUC0→t分别为48.301 3、236.314 2和472.464 4μg/(mL·h),达峰时间(tmax)分别为4.003 4、2.501 4和3.500 0,达峰浓度(Cmax)分别为4.134 2、18.624 7和33.879 1μg/mL。鸡血浆蛋白的体外结合率大于96.3%,具有非浓度依赖的特点。上述结果表明,纳川珠利属于高血浆蛋白结合率化合物,在鸡体内属一级动力学消除,半衰期较长,代谢较慢,在与其他药物共用时有产生竞争性结合的风险。

荧光光谱法在半抗原-载体蛋白偶联物鉴定中的应用

对苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物进行荧光光谱鉴定。结果显示,对苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物的荧光光谱与其半抗原和载体蛋白相比均发生变化,苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物合成成功。研究表明,荧光光谱法是一种鉴定半抗原-载体蛋白偶联物的可行的方法。

新三嗪化合物纳川珠利的小鼠亚急性毒性试验

为评价新三嗪类抗球虫药物纳川珠利的安全性,选用100只昆明小鼠,连续30d分别灌服4.8、19.2、76.8mg/kg的药物,以纯水和空白溶剂为对照,通过临床观察、血液学分析、血液生化检测、脏器系数和病理学检查,系统地评估了该化合物对小鼠的亚急性毒性作用。结果显示,试验期间无小鼠死亡,在开始用药1周内,高剂量组小鼠有轻微临床毒性症状,2周后症状消失。试验过程中各组小鼠增重差异无统计学意义(P>0.05),长期高剂量给药后小鼠心和肝的脏器系数明显改变(P<0.05),血液红细胞、碱性磷酸酶、肌酐明显增高和葡萄糖、胆固醇、尿酸显著降低(P<0.05),高剂量组肝、肾小部分发生轻微水样变性、点状坏死等病理改变,停药15d后,碱性磷酸酶和尿酸水平与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。提示纳川珠利长期大剂量使用可能存在肝、肾等轻微损伤的风险,但损伤是可逆的,停药后短期可逐渐恢复,临床使用相对安全。

利用UPLC-TOF及MS/MS鉴定头孢喹肟中的同分异构体

建立了分离鉴定头孢喹肟中同分异构体杂质的UPLC与TOF及MS/MS联用方法。以乙腈-1m L/L甲酸水为流动相进行梯度洗脱,经RP18色谱柱分离,通过电喷雾串联质谱正离子模式在线检测,使得头孢喹肟及其同分异构体杂质获得有效分离,主成分和其同分异构体杂质的保留时间分别为4.9 min和4.5 min,同时它们的二级质谱产物离子信息及其裂解方式呈现明显的差异。本试验初步建立了分离及鉴定头孢喹肟同分异构体杂质的色谱质谱检测方法,为硫酸头孢喹肟原料药和制剂的有关物质研究及检测奠定了基础。

纳川珠利对鸡的亚慢性毒性试验

为进一步评估纳川珠利在靶动物临床应用中的安全性,在80只浦东黄羽肉鸡标准饲料中全程添加0、3、15、30mg/kg纳川珠利,观察它对鸡的临床表现和血液学指标的影响。结果显示,纳川珠利对鸡无不良临床反应;对鸡的血液生化指标无显著影响;试验期间各组之间体重增重变化的差异无统计学意义(P>0.05);剖检时肉眼未见明显异常,但肝指数、脾指数和肺指数显著减小(P<0.05);用药后第28天,药物处理组红细胞浓度和红细胞压积显著增加(P<0.05),推测药物对育成期雏鸡的红细胞成熟分化可能有一定的促进作用。结果表明,纳川珠利对靶动物鸡的整体毒性较低,临床应用是安全的。