2012年家畜血吸虫病流行病学观测点观测情况通报

2012年,在8个家畜血吸虫病观测点共检测了8170头牛、479只羊以及569头(匹)其他家畜,血吸虫病感染率分别为0.92%、1.88%和0%。在75头病牛中,年龄小于3岁的占72%(54头),低感染度(+、++)的占81.3%(61头)。江西省吴城和湖南省南大膳的牛血吸虫感染率在3%以上。阳性野粪(全部为牛粪)和阳性钉螺均只在湖南省和江西省的观测点中发现。观测结果显示湖南省洞庭湖和江西省鄱阳湖地区牛血吸虫病的防控仍是目前农业血防的难点和重点。

实现2015年家畜血吸虫病疫情控制目标的风险分析

作者于2012年采用问卷调查和现场调查相结合的方式,在湖南、湖北、江西、安徽、四川和云南6省28个县调研家畜血吸虫病疫情分析实现国务院提出的2015年控制目标的风险态势和主要风险因素。结果显示,如果未采取特别措施,家畜血吸虫病疫情要在全国范围内全面实现2015年控制目标的风险态势极为严峻。对20种主要风险因素重要性、风险因素可控度(即通过努力,到2015年能否根本改变)和13项措施的重要性得分进行统计分析后,提出了5点控制风险的对策建议。

家畜血吸虫病查治方案实施情况、投入与需求情况调查分析

采用问卷调查方式,于2012年在湖南省、湖北省、江西省、安徽省、四川省和云南省的28个县开展目前家畜血吸虫病查治方案及实施状况、需求与投入状况调查。通过对诊断和治疗状况、治疗实施主体、时间节点、需求和投入等分析,得出如下三点结论:家畜血吸虫病查治投入严重不足,羊血吸虫病查治没有引起足够重视和家畜血吸虫病查治方案有待优化。

日本血吸虫小RNA let-7对虫体生殖发育影响的研究

为检测日本血吸虫小RNA let-7(Sja-let-7)对虫体生殖发育的影响,本研究在日本血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠后的11 d^42 d,将Sja-let-7的同系物(Sja-let-7 mimics)注射入宿主体内对血吸虫Sja-let-7的表达进行干扰,结果显示Sja-let-7 mimics干扰组小鼠肝脏虫卵孵化率显著升高;小鼠肝脏肉芽肿病变减轻十分明显,病灶周围炎性细胞浸润半径变小,空泡变性较对照组轻微,周围正常组织完整性也优于对照组。扫描电镜和透射电镜未观察到虫体的明显变化。利用荧光定量PCR检测Sja-let-7的候选靶基因干扰虫体的表达情况,结果表明Sja-let-7 mimics对大部分候选基因存在不同程度的抑制作用。本研究为后续深入研究小RNA Sja-let-7的功能奠定了基础。

日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt10a基因的克隆及其在童虫和成虫中mRNA表达量的变化

利用RACE技术从19日龄的日本血吸虫童虫中扩增了1个Wnt家族基因,并对其进行了生物信息学分析。同源性分析表明,该基因为日本血吸虫新基因,完整开放阅读框(ORF)长1896 bp,编码631个氨基酸,理论分子质量为73.3 ku。该基因编码的氨基酸序列具有Wnt家族蛋白的典型特征,与人、鼠Wnt10a的氨基酸序列同源性均为26%,推测为血吸虫的Wnt10a基因,命名为Sjwnt10a(Gen BanK登录号DQ643829)。利用实时荧光定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体中的表达情况,结果显示该基因在19日龄的日本血吸虫童虫中表达量最高,在14日龄童虫和44日龄雄虫中也有表达,但分别仅为19日龄童虫表达量的8.8%和5.0%,而在31日龄成虫和44日龄雌虫中没有检测到该基因。结果提示,童虫差异表达的Sjwnt10a基因可能对童虫的生长、发育至关重要。

日本血吸虫Sjzfp1基因的克隆表达及其表达产物的免疫效果

以PCR技术从日本血吸虫成虫mRNA反转录制备的cDNA中克隆日本血吸虫锌指蛋白编码基因Sjzfp1以及181～786bp的DNA片段,分别以pGEX-4T和pET-28a(+)为表达载体制备重组抗原rSjzfp1/GST和rSjzfp1-1/His。将重组抗原与206佐剂混合后免疫小鼠,观察免疫预防效果。利用实时荧光定量PCR法检测Sjzfp1在不同发育期虫体中的表达情况。结果显示,获得了日本血吸虫Sjzfp1基因全长序列,其ORF为1017bp,编码338个氨基酸,推导的理论分子质量为38.5ku。生物信息学分析显示Sjzfp1为日本血吸虫环形锌指蛋白或PHD型锌指蛋白。以rSjzfp1/GST和rSjzfp1-1/His免疫小鼠,诱导的减虫率分别为50.43%和17.85%,肝虫卵减少率分别为72.64%和15.96%。实时荧光定量PCR分析表明Sjzfp1基因在各发育期虫体中均有表达,其中在尾蚴和毛蚴中表达量较高,在终末宿主体内各发育期虫体中,以42d成虫表达量最高。结果表明,Sjzfp1基因在抗血吸虫疫苗研究中具有进一步研究的潜力。