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通过构建三段T-DNA载体高频率获得无标记转基因大豆植株的研究
被引量:
12
1
作者
叶兴国
秦华
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期138-144,共7页
高频率获得无选择标记转基因植株有利于转基因植物的环境释放和安全性生产,农杆菌介导的共转化法是获得无标记转基因植株的方法之一。含二段T-DNA载体的共转化法已被人们成功应用,而二段以上T-DNA载体的共转化法还未见报道。基于这一...
高频率获得无选择标记转基因植株有利于转基因植物的环境释放和安全性生产,农杆菌介导的共转化法是获得无标记转基因植株的方法之一。含二段T-DNA载体的共转化法已被人们成功应用,而二段以上T-DNA载体的共转化法还未见报道。基于这一目的,通过几个中问质粒构建了含有三段T-DNA的双元表达载体pNB35SVIP1,其中包含1个拷贝bar基因选择标记基因表达盒和2个拷贝VIP1目的基因表达盒。利用EHA101农杆菌菌系介导法转化大豆子叶节,经过在含3~5mg/L glufosinate培养基上多次筛选,获得了一定数量抗性再生植株,然后对抗性再生植株进行叶片涂抹除草剂、Southern blot和Northern blot检测,共鉴定出51棵T0代转基因植株,转化频率0.83%~3.16%,二个基因的共转化频率为86.4%。在对T1代群体进行叶片涂抹除草剂检测的基础上,不抗除草剂植株进行PCR、Southern blot和Northern blot检测,共鉴定出41棵无选择标记转基因植株,无标记植株获得率为7.6%。检测结果还表明,T1代群体中22.7%的株系发生了基因丢失现象,27.3%的株系发生了bar基因沉默现象,目的基因在37.1%的无标记植株中发生了沉默现象。三段T-DNA的双元表达载体是获得无标记转基因植株的理想途径。
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关键词
大豆
农杆菌
三段T-DNA载体
转化
无标记转基因植株
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职称材料
水稻直穗散穗性状的初步研究
被引量:
6
2
作者
郭伟伟
李广贤
+4 位作者
王光全
袁守江
张文会
赵金凤
李学勇
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期11-16,共6页
在均为散穗穗型的亲本香粳9407和IRBB60配制的RIL群体中,发现5个家系中直立穗型和散穗穗型表现出3∶1的分离。对控制直立穗型性状的基因进行了分子标记定位,定位在第9染色体上基因座位LOC_Os09g26999处,在纯合直穗株系中该基因缺失了637...
在均为散穗穗型的亲本香粳9407和IRBB60配制的RIL群体中,发现5个家系中直立穗型和散穗穗型表现出3∶1的分离。对控制直立穗型性状的基因进行了分子标记定位,定位在第9染色体上基因座位LOC_Os09g26999处,在纯合直穗株系中该基因缺失了637bp,导致蛋白质的翻译提前终止,并有56个氨基酸改变。最后,对直立穗型等位基因的来源进行了探讨。
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关键词
水稻
直穗散穗
隐蔽有利基因
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职称材料
小麦花药培养后代和杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异分析
被引量:
3
3
作者
韩晓峰
叶兴国
+6 位作者
刘晓蕾
魏亦勤
杜丽璞
王轲
佘茂云
樊明
晏月明
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期671-677,共7页
通过对Alondra、Orofen等5个小麦品种进行花药培养,同时以新春9号、京771、CB037等9个高分子量麦谷蛋白亚基组成不同的小麦品种相互间配制24个正、反交组合,分析小麦加倍单倍体无性系和品种间杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异,探讨...
通过对Alondra、Orofen等5个小麦品种进行花药培养,同时以新春9号、京771、CB037等9个高分子量麦谷蛋白亚基组成不同的小麦品种相互间配制24个正、反交组合,分析小麦加倍单倍体无性系和品种间杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异,探讨利用花药培养和杂交手段改良HMW-GS组成的可能性。SDS-PAGE电泳分析发现,小麦加倍单倍体无性系中HMW-GS发生了频繁变异,Alondra加倍单倍体中变异率最高(61.8%),Verry加倍单倍体次之(16.7%),均出现了原始材料中所不具备的亚基类型;HMW-GS在部分F1杂种中呈现不完全共显性、亚基表达沉默和正、反交亚基表达不一致现象,宁春4号/CB037、京771/宁春4号2个组合中出现了双亲所不含有的亚基;通过连续自交和对新出现亚基的跟踪选择,获得了表达新亚基的高代株系。研究结果对于改良小麦加工品质,加深了解小麦HMW-GS编码基因的遗传特性、结构特性等具有一定理论意义和实践价值。
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关键词
小麦
高分子量麦谷蛋白亚基
花药培养
无性系变异
SDS-PAGE
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职称材料
题名
通过构建三段T-DNA载体高频率获得无标记转基因大豆植株的研究
被引量:
12
1
作者
叶兴国
秦华
机构
中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与基因改良重大科学工程
/
农业
部
作物
遗传育种重点实验室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期138-144,共7页
文摘
高频率获得无选择标记转基因植株有利于转基因植物的环境释放和安全性生产,农杆菌介导的共转化法是获得无标记转基因植株的方法之一。含二段T-DNA载体的共转化法已被人们成功应用,而二段以上T-DNA载体的共转化法还未见报道。基于这一目的,通过几个中问质粒构建了含有三段T-DNA的双元表达载体pNB35SVIP1,其中包含1个拷贝bar基因选择标记基因表达盒和2个拷贝VIP1目的基因表达盒。利用EHA101农杆菌菌系介导法转化大豆子叶节,经过在含3~5mg/L glufosinate培养基上多次筛选,获得了一定数量抗性再生植株,然后对抗性再生植株进行叶片涂抹除草剂、Southern blot和Northern blot检测,共鉴定出51棵T0代转基因植株,转化频率0.83%~3.16%,二个基因的共转化频率为86.4%。在对T1代群体进行叶片涂抹除草剂检测的基础上,不抗除草剂植株进行PCR、Southern blot和Northern blot检测,共鉴定出41棵无选择标记转基因植株,无标记植株获得率为7.6%。检测结果还表明,T1代群体中22.7%的株系发生了基因丢失现象,27.3%的株系发生了bar基因沉默现象,目的基因在37.1%的无标记植株中发生了沉默现象。三段T-DNA的双元表达载体是获得无标记转基因植株的理想途径。
关键词
大豆
农杆菌
三段T-DNA载体
转化
无标记转基因植株
Keywords
Glycine max, Agrobacterium tumefaciens, transformation, marker-free plants, three T-DNAs vector
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
水稻直穗散穗性状的初步研究
被引量:
6
2
作者
郭伟伟
李广贤
王光全
袁守江
张文会
赵金凤
李学勇
机构
聊城大学生命
科学院
中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与基因改良重大科学工程
山东省水稻
研究所
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期11-16,共6页
基金
国家"转基因生物新品种培育科技重大专项"重大课题(2011ZX08009-003)
文摘
在均为散穗穗型的亲本香粳9407和IRBB60配制的RIL群体中,发现5个家系中直立穗型和散穗穗型表现出3∶1的分离。对控制直立穗型性状的基因进行了分子标记定位,定位在第9染色体上基因座位LOC_Os09g26999处,在纯合直穗株系中该基因缺失了637bp,导致蛋白质的翻译提前终止,并有56个氨基酸改变。最后,对直立穗型等位基因的来源进行了探讨。
关键词
水稻
直穗散穗
隐蔽有利基因
Keywords
rice
erect and drooping panicle
hidden favorable allele
分类号
S511 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
小麦花药培养后代和杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异分析
被引量:
3
3
作者
韩晓峰
叶兴国
刘晓蕾
魏亦勤
杜丽璞
王轲
佘茂云
樊明
晏月明
机构
中国农业科学院作物科学研究所/国家基因资源与基因改良重大科学工程
/
农业
部
作物
遗传育种重点实验室
首都师范大学生命
科学
学院
北方民族大学生命
科学
与生物
工程
学院
宁夏农林
科学院
农
作物
研究所
出处
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期671-677,共7页
基金
国家自然科学基金(30830072)
宁夏农业厅重点合作项目资助
文摘
通过对Alondra、Orofen等5个小麦品种进行花药培养,同时以新春9号、京771、CB037等9个高分子量麦谷蛋白亚基组成不同的小麦品种相互间配制24个正、反交组合,分析小麦加倍单倍体无性系和品种间杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异,探讨利用花药培养和杂交手段改良HMW-GS组成的可能性。SDS-PAGE电泳分析发现,小麦加倍单倍体无性系中HMW-GS发生了频繁变异,Alondra加倍单倍体中变异率最高(61.8%),Verry加倍单倍体次之(16.7%),均出现了原始材料中所不具备的亚基类型;HMW-GS在部分F1杂种中呈现不完全共显性、亚基表达沉默和正、反交亚基表达不一致现象,宁春4号/CB037、京771/宁春4号2个组合中出现了双亲所不含有的亚基;通过连续自交和对新出现亚基的跟踪选择,获得了表达新亚基的高代株系。研究结果对于改良小麦加工品质,加深了解小麦HMW-GS编码基因的遗传特性、结构特性等具有一定理论意义和实践价值。
关键词
小麦
高分子量麦谷蛋白亚基
花药培养
无性系变异
SDS-PAGE
Keywords
Triticum aestivum
High molecular weight glutenin subunits
Anther culture
Somatic variation
SDS-PAGE
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
通过构建三段T-DNA载体高频率获得无标记转基因大豆植株的研究
叶兴国
秦华
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
12
下载PDF
职称材料
2
水稻直穗散穗性状的初步研究
郭伟伟
李广贤
王光全
袁守江
张文会
赵金凤
李学勇
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
6
下载PDF
职称材料
3
小麦花药培养后代和杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异分析
韩晓峰
叶兴国
刘晓蕾
魏亦勤
杜丽璞
王轲
佘茂云
樊明
晏月明
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
3
下载PDF
职称材料
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