实验室条件下长角血蜱甘肃株孤雌生殖种群的生物学特性

在实验室条件下，对我国北方长角血蜱甘肃株孤雌生殖种群的生活史进行了首次观察。研究发现，行孤雌生殖的长角血蜱为三宿主蜱；在兔体完成1个世代共需106～154d，饥饿期的幼蜱、若蜱与两性生殖的饥饿幼蜱、若蜱体重的差异不显著（P〉0．05），而饱血体重与两性生殖的长角血蜱种群饱血体重差异极显著（P〈0．01）；雌蜱饱血体重可达吸血前的108．46±19．72倍，与两性生殖的种群饱血体重差异亦极显著（P〈0．01）。雌蜱产卵量与饱食体重之间呈极显著正相关r=0．8970（P〈0．01）；生殖效率指数REI=6．76，生殖适合度指数RFI=6．29；蜱发育时间在不同季节无明显变化。

兰州市宠物猫隐孢子虫流行情况调查及分子生物学鉴定

为探究兰州市宠物猫隐孢子虫的感染情况,采集兰州市五大主城区宠物猫粪便样品共计655份,提取DNA,采用套式PCR扩增结合测序的方法进行基因分型并构建遗传关系树。兰州市宠物猫隐孢子虫的感染率为3.97%(26/655),测序鉴定发现均为猫隐孢子虫(Cryptosporidium felis)。统计学分析结果显示,兰州市宠物猫隐孢子虫的感染率与品种、季节及样品来源显著相关(P<0.05)。结果表明,兰州市宠物猫携带隐孢子虫且存在传播给人的风险,研究结果为预防兰州地区人、猫感染隐孢子虫提供一定的依据。

口蹄疫病毒前导蛋白的分子生物学研究进展

口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)编码的前导蛋白,不仅是一个重要的蛋白酶,而且对于病毒来说是一个重要的毒力因子,其能够作用于宿主细胞的特异性蛋白,抵抗宿主细胞所产生的抗病毒效应。本文章简述了口蹄疫病毒前导蛋白酶的基本特性,例如前导蛋白的基因结构与病毒复制的关系,前导蛋白酶活性的具体特点,以及前导蛋白影响病毒毒力的分子机制。

弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能及免疫原性研究的新进展

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)可引起严重的人兽共患弓形虫病,给全世界经济造成巨大的损失,给公共卫生安全带来巨大的隐患。致密颗粒(dense granule)分泌的致密颗粒蛋白(dense granule proteins,GRAs)参与调节纳虫泡(parasitophorous vacuole,PV)及纳虫泡膜(parasitophorous vacuole membrane,PVM)的形成并能维持其结构稳定性,部分GRAs可参与宿主细胞的转录。近几年来,不断发现了多种新的GRA蛋白家族新成员,并随着对该家族成员研究的逐步深入,发现GRAs是研制抗弓形虫疫苗的候选分子之一。本文综述了弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能和免疫原性研究的新进展,旨在为研究弓形虫致病机理和研发新的抗弓形虫疫苗提供思路。

NF-κB免疫生物学作用的研究进展

25年前首次发现NF-κB,其是免疫系统中诱导基因表达的重要调节因子,在免疫系统的发育和功能中发挥着重要的生物学作用。固有免疫和适应性免疫,免疫系统中各组织和细胞的发生和发育等过程都受转录因子NF-κB家族的调控。尽管有关NF-κB研究已经很成熟,但仍有许多新的重大发现。综述此领域的新的研究进展,从而为NF-κB在免疫生物学中的应用提供更广阔的视角。

抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性分析

用灭活O型口蹄疫病毒为抗原免疫BALB/c小鼠4次后,取致敏的脾B淋巴细胞和SP2/0小鼠骨髓瘤细胞进行融合,在HAT选择培养基中培养2周,经间接ELISA法筛选,最终获得了3株抗O型FMDV的阳性杂交瘤细胞株,命名为2F1、2G7和6H4。血清学试验证明该McAbs能与FMDV抗原结合,具有高度特异性。

猪戊型肝炎病毒分子生物学与流行病学研究进展

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是20世纪80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就HEV的形态、基因分型、分子生物学特性、戊型肝炎(Hepatitis E,HE)的流行病学特点作一简要概述。

分子生物学技术在弓形虫病诊断中应用的研究进展

综述了限制性片段长度多态性技术(RFLP)在刚地弓形虫虫株分类方面的应用情况,从PCR、DNA探针技术和基因重组技术方面介绍了用于检测弓形虫DNA的分子生物学技术的研究进展,叙述了编码弓形虫主要蛋白基因的克隆及其表达产物在ELISA诊断中的应用。

狂犬病病毒分子生物学研究进展

狂犬病是一种感染中枢神经系统的烈性人兽共患传染病,所有温血动物均可感染,一旦发病目前无有效方法治疗,病死率几乎100%。狂犬病病毒基因组编码的5种结构蛋白在病毒转录和复制中发挥重要作用,其抗原性及基因序列可作为病毒分型的重要依据,文章对其特点作一综述。

猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学及免疫学的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒是严重危害世界养猪业的病原,其分子生物学及感染机制的研究,对猪繁殖与呼吸综合征的预防和控制非常重要。笔者对猪繁殖与呼吸综合征病毒的病原学特性、分子生物学特征、获得性免疫和免疫调节与逃避机制等方面进行了综述,以期为该病的深入研究提供参考。

猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是严重危害养猪业的病原,对PRRSV的分子生物学研究进展进行了综述,主要包括PRRSV的基因组结构、病毒的非结构蛋白和结构蛋白及其功能、致病机理及复制与转录等。

猪流感及生物学特性研究进展

猪流感(I)是由A型流感病毒引起的人畜共患病,被国际兽疫局和各国政府列为A类传染病,严重威胁到畜禽生产和人类自身生存安全,同时由于亚型多、抗原变异性强、宿主范围广等原因。其生态学和公共卫生学意义有极其重要的作用,就猪流感的生物学特性和其可能致病机理进行概述,从而阐述目前猪流感的研究现状。

麻疹病毒核衣壳蛋白分子生物学及其应用的研究进展

麻疹病毒属（Morbillivirus）的病毒是一类重要的人和动物致病性病原。其中包括牛瘟病毒（Rinderpest virus，RPV）、小反刍兽疫病毒（Pestedes Petits Ruminants virus，PPRV）、犬瘟热病毒（Canine Distemper virus，CDV）和麻疹病毒（Measles virus，MV）^[1]。这些病毒在中性pH条件下，可以通过膜融合而感染宿主细胞。病毒粒子多为圆形或椭圆形，

表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究

对狂犬病毒G+N双基因复制缺陷型腺病毒穿梭载体进行转染,以获得融合表过狂犬病毒糖蛋白和核蛋白重组腺病毒,并对其进行生物学特性和免疫学研究.结果表明:将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,可获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N,经PacI酶切后转染HEK-293细胞,可获得带有目的基因的重组腺病毒.重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次后,在细胞内的病变时间缩短为20 h以内.经测定,重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID50为10-8.0.mL-1,用RT-PCR法可检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段;重组腺病毒经口服免疫小白鼠,对狂犬病毒CVS毒株的免疫保护率可达80%.

弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能研究进展

刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种重要的人兽共患寄生原虫,具有中间宿主广泛、生活史复杂、传播方式多样、呈全球性分布等特点,可感染几乎所有的恒温动物,导致人兽共患的弓形虫病。弓形虫慢性感染约1/3的世界人口,对免疫缺陷患者、孕妇、孕畜的健康更是造成严重威胁。致密颗粒蛋白是由致密颗粒(弓形虫的一种亚细胞分泌器官)分泌的蛋白质,它们可通过操控宿主(细胞)基因表达、信号通路进而调控宿主细胞的免疫反应和细胞周期,并在蛋白质的转运和定位、营养物质的摄取、纳米管网络(IVN)的形成与稳定性的维持、逸出、慢性感染等生理过程中发挥重要作用。本文综述弓形虫致密颗粒蛋白基本生物学功能的最新研究进展,旨在为深入研究弓形虫的致病机制、鉴定新的抗弓形虫潜在药物靶点和疫苗候选分子提供借鉴。

传染性海绵状脑病分子生物学及免疫学诊断技术研究进展

传染性海绵状脑病(TSE)也称为朊毒体病,是一种致死性神经退化性疾病,其主要的病理特点是:神经元变性、消解,形成脑实质多孔性泡化,细胞的朊蛋白(PrPC)转变成朊毒体(PrPSC)是TSE的一个基本特征。本文就TSE的分子生物学特点及免疫学诊断方面作一概述。

生物矿化的口蹄疫病毒样颗粒疫苗的免疫原性评价

生物矿化技术可以增强口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的耐热性,但并无试验数据支撑矿化FMD VLPs用于临床的可行性。本研究旨在评价矿化FMD VLPs疫苗在牛和猪上的免疫原性。用VLPs和矿化VLPs免疫猪,采用液相阻断ELISA(LPBE)检测猪血清中的特异性抗体滴度,并经酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测免疫猪外周血淋巴细胞(PBLs)经体外刺激后分泌的特异性IFN-γ。用矿化A型VLPs、矿化O型VLPs、矿化的A型和O型二价VLPs分别免疫牛,采用LPBE、中和试验、夹心ELISA检测血清中的特异性抗体、中和抗体以及IL-4和IFN-γ的含量。结果显示,VLPs与矿化VLPs免疫猪的血清抗体水平无显著差异,相对于VLPs,矿化VLPs免疫猪的PBLs分泌的IFN-γ水平高于VLPs免疫猪(P<0.05);3种疫苗免疫牛血清中IL-4和IFN-γ水平均高于PBS组,矿化二价疫苗与相应的矿化单价疫苗免疫牛的血清特异性抗体和中和抗体效价均无显著差异。综上所述,矿化VLPs对牛和猪均具有良好的免疫原性,不同血清型的矿化VLPs可以联合使用并且矿化壳层可增强VLPs诱导细胞免疫应答的能力。

效应蛋白Rhs对鼠伤寒沙门菌生物学特性影响的研究

为探究鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)Ⅵ型分泌系统(T6SS)分泌的效应蛋白Rhs对该菌生物学特性的影响,本研究利用Red同源重组技术构建了鼠伤寒沙门菌rhs1和rhs2基因缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2,同时构建了基因回补菌株C-Δrhs1和C-Δrhs2,并经PCR和测序鉴定正确后,测定了鼠伤寒沙门菌亲本株和缺失株的遗传稳定性、生长曲线,结果显示,缺失株经过多次传代后仍然具有稳定的遗传性;Rhs效应因子缺失对细菌的生长未造成明显影响。进一步利用各菌株感染Hela细胞,对菌株黏附力和侵袭力进行测定,结果显示,与亲本株相比,缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2对Hela细胞的黏附力无明显影响,但侵袭力分别提高了4.9倍和3.4倍。利用各菌株感染RAW264.7巨噬细胞,检测各株菌在RAW264.7细胞内的存活力,结果显示缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2在RAW264.7细胞内存活力分别提高了7.8倍和5.9倍。将各菌经株腹腔注射感染小鼠,检测其对小鼠的半数致死量(LD_(50)),结果显示,亲本株的LD_(50)为2.53×10^(6) cfu/mL,缺失株CVCC541Δrhs1、CVCC541Δrhs2的LD_(50)分别为1.31×10^(7) cfu/mL和5.40×10^(6) cfu/mL,LD_(50)分别下降了5.2倍和2.1倍。本研究首次证实效应蛋白Rhs会影响鼠伤寒沙门菌的侵袭力和细胞内的生存能力,同时也会降低细菌的毒力,在鼠伤寒沙门菌感染过程中发挥了作用,该结果为阐释鼠伤寒沙门菌的致病机制提供了参考。

携带GFP基因的重组狂犬病病毒的拯救及其生物学特性研究

本研究旨在构建一株携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组病毒,以便更快速、准确地检测疫苗效价。利用基因重组技术构建含有GFP基因的重组质粒,并利用反向遗传学操作进行重组病毒的拯救,在Vero细胞进行病毒感染并收集蛋白样品进行Western blotting试验,检测外源蛋白GFP的表达情况,测定一步法生长曲线,比较与原始毒株的生物学特性差异。结果显示,本试验成功拯救出携带GFP基因的重组狂犬病病毒毒株SAD-GFP;Western blotting试验结果显示,重组病毒可表达GFP,且随着病毒感染时间的延长,蛋白表达增多;病毒结构蛋白G蛋白表达并未受外源蛋白表达的影响,重组毒株与原始毒株的生长并无明显差异;传代后GFP仍可在病毒中稳定表达。在连续传代过程中,本试验成功拯救出SAD-GFP重组毒株,GFP基因并未丢失,且蛋白表达量并未降低,证明该位点表达的外源蛋白在病毒传代过程中可持续稳定表达,且对病毒生长特性并未产生影响。