无乳链球菌荚膜多糖的粗提及多糖含量测定条件优化

为提取无乳链球菌荚膜多糖,并对苯酚-硫酸法测定多糖含量条件进行优化。离心收集发酵上清液,超滤浓缩,经800mL/L乙醇沉淀提取无乳链球菌荚膜多糖;采用单因素试验对苯酚硫酸法测定条件进行优化,并对测定方法的可靠性进行验证。结果表明,从1L发酵液中提取到含量为38.51%的荚膜多糖0.36g;测定的最佳条件为:2mL样品液中,加入1 mL 50 mL/L的苯酚,5 mL浓硫酸,混匀后80℃作用20min,在1.5h内测定485nm处的光密度。在该条件下,平均加样回收率为99.96%,相对标准偏差为0.40%。说明从无乳链球菌发酵上清液中成功提取到荚膜多糖,建立了苯酚硫酸法测定荚膜多糖的最优条件。