牛源金黄色葡萄球菌耐药性与相关耐药基因和菌株毒力基因的相关性研究

分别采用纸片扩散法和PCR检测了牛源金黄色葡萄球菌对红霉素和四环素的耐药性与相关耐药基因和毒力基因,进而分析了耐药性与相关耐药基因和毒力基因之间的相关性。结果表明,37株金黄色葡萄球菌菌株中,红霉素耐药菌株占27%,而含有红霉素耐药基因ermB或ermC的菌株占19%,其中30%的红霉素耐药表型菌株含有ermB或ermC,所有菌株均未检测到ermA;四环素耐药菌株占22%,而含有四环素耐药基因tet K的菌株占27%,其中75%的四环素表型耐药菌株含有tetK,所有菌株均未检测到tetM。金黄色葡萄球菌毒力基因lukED、hlb、hla、hld、edin、tst和lukPV的检出率分别为89%、73%、70%、70%、14%、5%和3%,未检测到eta、etb和lukM基因。统计学分析结果表明,金黄色葡萄球菌的红霉素耐药表型与相关耐药基因之间未发现相关性,而与毒力基因tst和lukED的相关性较强;金黄色葡萄球菌四环素耐药表型与耐药基因tetK存在相关性,而未发现四环素耐药表型与菌株毒力基因之间存在相关性。结果提示,金黄色葡萄球菌对红霉素和四环素的耐药率较高;耐药基因并不能作为菌株表型耐药的诊断指标,但其潜在的危险应当引起关注;此外,金黄色葡萄球菌菌株中高频率的毒力基因lukED、hla、hlb和hld编码的毒力因子白细胞毒素和溶血素是引发奶牛乳腺炎的主要因素。

饲料中喹乙醇ELISA检测试剂盒的研制及性能分析

本研究旨在研制快速检测饲料中喹乙醇的ELISA试剂盒(OLA-Kit)。作者用喹乙醇单克隆抗体(OLAmAb)建立间接竞争ELISA方法,组装OLA-Kit,并对试剂盒的性能进行评估。结果表明:OLA-Kit的标准曲线呈典型的反S型,相关系数R2=0.976 7,线性范围为1～243μg·L-1,半数抑制浓度(IC50)为(14.29±3.75)μg·L-1,检测限为0.79μg·L-1,定量限为4.0μg·L-1,临界值(猪饲料)为83.37μg·g-1,基质对该试剂盒的检测结果影响不大;猪、鸡、鱼饲料的不同浓度添加回收率均大于74.40%,平均批内和批间变异系数均小于15%;试剂盒与喹胺醇的交叉反应率(CR%)为17.93%,与MQCA、QCA及其他喹喔啉类药物几乎无反应性,可在2～8℃保存6个月以上;OLA-Kit与HPLC法测定猪饲料中喹乙醇添加回收率没有显著差异(P≥0.05)。本研究成功研制出敏感、特异、准确的喹乙醇ELISA检测试剂盒,可用于饲料中该药物的快速检测和批量筛查。