重组质粒pVAX1-HER2-Flt3L构建及抗肿瘤效果

[目的]将具有免疫增效功能的Flt3L分子与HER2抗原融合表达,评价Flt3L是否能够提高抑瘤效果。[方法]将人的HER2编码区基因和小鼠Flt3L编码区基因用Furin/2A进行连接,全基因合成后,克隆至pVAX1载体,从而构建重组质粒pVAX1-HER2-Flt3L,同时构建对照质粒pVAX1-HER2和pVAX1-Flt3L。将上述质粒分别注射正常小鼠和稳定表达HER2抗原的荷瘤小鼠,评价其免疫原性和抑瘤效果。[结果]将各组重组质粒接种于Bal B/c小鼠后,抗体检测结果显示:重组融合质粒pVAX1-HER2-Flt3L组诱导产生的平均抗体滴度为2060,而单纯抗原质粒pVAX1-HER2组诱导产生的平均抗体滴度为1720;ELISPOT检测结果显示:重组融合质粒pVAX1-HER2-Flt3L组诱导产生的平均斑点数为133,而单纯抗原质粒pVAX1-HER2组诱导产生的平均抗体滴度为110;与此一致的是,在荷瘤小鼠中,该融合质粒也显示出更加显著的抑制肿瘤生长的效果,达到47%,而单纯抗原质粒仅为32%。[结论]Flt3L具有一定的免疫增效能力,能够显著提高表达HER2抗原重组质粒的抑瘤效果,深入研究其免疫保护机制具有潜在的临床意义。