从湖羊肺脏中分离绵羊肺炎支原体的鉴定

从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f,用其培养物人工感染80日龄健康绵羊,28d后剖杀,剖检可见肺表面肉粉色实变,显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列,设计一对扩增700bp片段的通用引物,直接提取肺脏组织DNA进行PCR扩增并克隆、测序。将该序列与GenBank中33种支原体序列比较,结果证明该序列与绵羊肺炎支原体(M.ovipneumonia)标准株Y-98同源性为99.9%,而与山羊支原体山羊亚种(M.capricolumsubsp.capricolum,Mcc)、丝状支原体山羊亚种(M.mycoidessubsp.Capri,Mmc)、丝状支原体丝状亚种LC型(M.mycoidessubsp.mycoidesLC,M.mmLC)等同源率为81%。以感染羊血清和Y-98与从发病羊肺脏中分离出的三株支原体菌体蛋白进行Westernblot,证明均与感染羊血清有特异性反应,且与Y-98相比无明显差异,故确定分离株为绵羊肺炎支原体(M.ovipneumonia)。