表达新城疫病毒血凝素神经氨酸酶（HN）基因重组鸭肠炎病毒的构建

目的 构建表达新城疫病毒血凝素神经氨酸酶（HN）基因的重组鸭肠炎病毒（DEV）.方法 利用同源重组技术,在DEV Clone-03基因组中胸苷激酶（TK）基因内部插入新城疫病毒HN基因.以本实验室已构建的rDEV TK-EGFP株为亲本病毒,将病毒基因组与转移载体共转染及蚀斑纯化,获得表达新城疫病毒HN基因的重组鸭肠炎病毒.结果 重组病毒经基因水平和蛋白水平的鉴定,证明新城疫病毒HN基因正确插入DEV基因组内部且有效表达;复制动力学和遗传稳定性检测,证明重组病毒rDEV TK-HN滴度略有下降,但复制趋势与亲本病毒一致;在鸡胚成纤维细胞（CEF）和SPF鸡胚连续传代20代,表明HN基因随病毒传代而稳定遗传、表达.结论 利用同源重组技术,对鸭肠炎病毒基因组进行修饰,构建了TK基因缺失表达新城疫病毒HN基因的重组鸭肠炎病毒,该病毒能够携带HN基因稳定遗传和表达.