鹿茸成骨过程及其相关调控机制研究进展

鹿茸是一种特殊的周期性再生的哺乳动物骨质器官。鹿茸的发生起始源于生茸区骨膜,通过膜内成骨、过渡成骨和特殊的软骨内成骨实现鹿茸的整个成骨过程。鹿茸的周期性再生及成骨过程是多种因素及信号通路综合调控下的生物学过程。概述了鹿茸成骨过程的组织基础以及这一过程中相关激素、细胞因子和信号通路等的调控机制,以期为鹿茸成骨机制研究及提高鹿茸产量提供借鉴。

影响动物骨架线性增长的微观因素分析

提高动物产肉量和皮张尺度有效方法之一是增大动物的骨架,但动物骨架的生长是一个复杂的生物过程,由多种因素共同调节完成,其中很多调控机制还不清楚。生长板是骨架线性生长的最重要器官,所有影响骨架线性生长的激素、因子都主要是通过影响生长板的生长来实现的。笔者综述了骨架增长的途径和影响骨架生长的生长激素、胰岛素样生长因子、雌激素、雄激素和肌肉生长抑制素等重要的激素和生长因子,并对长骨生长停止和生长板闭合存在时间差这一重要现象进行了分析,推测了导致这一现象的原因和被有效利用的可能性。

鹿茸水溶性成分的量效关系探讨

鹿茸是一种具有广泛药理作用的传统中药材。该文对鹿茸不同区段的水溶性成分含量及其主要药效进行综述,发现水溶性成分含量在鹿茸不同区段呈现从上至下递减的规律,这与鹿茸从上至下的多种药效的递减趋势相一致。

水貂GHR基因SNPs检测及其与生长性状的关联分析

为了检测水貂GHR基因多态性及其与生长性状的相关性分析,寻找可用于选育水貂生长性状的分子遗传标记,以同龄同场的短毛黑水貂、红眼白水貂和咖啡水貂为研究对象,采用PCR产物直接测序检测GHR基因的单核苷酸多态性,利用SPSS 19.0软件将该基因多态性与水貂生长性状进行关联分析。结果表明,存在3个SNPs位点,分别为外显子3处的g.82C>T突变和外显子10处g.350C>T和g.501C>T突变;g.82C>T位点与短毛黑水貂的体长显著相关;g.82C>T位点与3种群体的体质量极显著相关;g.350C>T位点与3种群体的体长极显著相关;g.350C>T位点与短毛黑水貂的体长极显著相关;g.501C>T位点与红眼白水貂的体长显著相关。因此,GHR基因可作为候选基因辅助用于水貂群体生长性状的遗传改良。

梅花鹿Thymosin beta 10基因的原核表达、活性鉴定和多克隆抗体制备

为研究梅花鹿Thymosin beta 10基因(Tβ10)在鹿茸快速生长过程中的作用,利用Gateway技术构建梅花鹿Tβ10基因的原核表达载体—pDEST17-Tβ10并诱导表达,对融合蛋白进行功能检测及多克隆抗体制备。结果表明:1)获得了190bp Tβ10基因开放阅读框序列,并获得重组表达载体pDEST17-Tβ10。2)pDEST17-Tβ10在宿主BL21-SI中诱导表达条件为0.3mol/L NaCL诱导2h,获得产物的最终浓度为0.50mg/mL。3)制备的Tβ10蛋白多克隆抗体血清效价在105之上,该抗体可以特异性结合天然和原核表达的Tβ10蛋白。4)离体检测发现,Tβ10融合蛋白一方面可以促进人脐静脉内皮细胞增殖,另一方面可以抑制鹿茸前成软骨区细胞的增殖。综上所述,本研究获得了具有生物活性的Tβ10融合蛋白,并制备了高度特异性的梅花鹿Tβ10蛋白多克隆抗体,为深入研究Tβ10基因的生物学功能奠定了基础。

鹿茸干细胞内[Na^+]测定及其影响因素鉴定

为探索鹿茸的形态发生与鹿茸干细胞(包括发生干细胞和再生干细胞)内[Na^+]的关系有关,以鹿茸干细胞为模型,研究不同干性的哺乳动物干细胞内[Na^+]的差异,并鉴定引起这种差异的电压门控性钠离子通道(NaV)因素。采集并培养具有不同干性的梅花鹿鹿茸干细胞,包括生茸区骨膜细胞(AP细胞,鹿茸发生干细胞)和角柄骨膜细胞(PP细胞,鹿茸再生干细胞,其干性低于AP细胞),以鹿普通脸部骨膜细胞(FP细胞)作为对照,并采用CoroNa染色方法,通过荧光强度来分析不同类型细胞内[Na^+]的差异,结合PCR方法鉴定转录水平上NaV基因的差异,并分别用睾酮和MS-222对细胞进行处理,观测其对细胞内[Na^+]的影响。结果表明:鹿茸干细胞内[Na^+]高于FP细胞,其中AP细胞内[Na^+]高于PP细胞;NaV1.1基因在AP细胞中特异性转录;睾酮对这3种细胞内[Na^+]水平没有显著影响;但是,MS-222处理能够在一定程度上降低细胞内[Na^+]。本研究发现:鹿茸干细胞内[Na^+]与其干性一致,干性高的AP细胞内[Na^+]也相对较高;NaV1.1基因在转录水平上的差异,可能是造成AP细胞内[Na^+]高的主要原因;干扰NaV的MS-222能够在一定程度上降低细胞内[Na^+]。说明哺乳动物器官的发生和再生可能与低等动物器官上的发现类似,都与细胞内[Na^+]有关。