利用CRISPR/Cas9系统敲除绵羊皮肤成纤维细胞Wnt2基因的研究

为了研究无翅基因相关整合位点2（Wnt2）在绵羊毛囊发育中的作用,通过CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑技术在绵羊原代皮肤成纤维细胞中敲除Wnt2基因,经T7E1酶切试验进行敲除结果验证,实时荧光定量PCR分析Wnt2、E-钙黏蛋白（CDH1）、半光天冬氨酸酶3（Caspase3）和成纤维细胞生长因子5（FGF5）在敲除后的表达量变化。结果显示：绵羊原代皮肤成纤维细胞中Wnt2基因敲除成功,编辑效率约14.35%;Wnt2相对表达量极显著下调（P〈0.01）,CDH1相对表达量极显著上调（P〈0.01）,Caspase3及FGF5表达上调显著（P〈0.05）。结果表明：Wnt2基因对毛囊的生长发育具有促进作用。