饲料产品中转基因成分定量分析的问题与对策

文章综述了国内外农产品转基因成分标识管理的现状,评价了现有转基因作物定量检测方法的特点与弊端,提出了以基因特异性为依据、建立更适合饲料等复杂产品中转基因成分定量检测的改进建议。

豆粕抗营养因子及其生物改性的研究

豆粕是饲料工业应用最广泛的植物性蛋白质原料,但由于存在多种抗营养因子,降低了豆粕利用率。微生物发酵法不仅可有效去除豆粕抗营养因子,而且能积累有益代谢产物,提高豆粕营养价值。本文综述了豆粕抗营养因子种类、特征及其作用机理,重点论述了微生物发酵豆粕增值除弊的研究进展。

大豆主要致敏蛋白生化特性的研究进展

大豆是一种优质植物蛋白原料,其种子中蛋白质含量为36%～38%,但大豆中所含的多种致敏蛋白质是限制大豆在饲料和食品中利用的关键因素。本文对大豆主要致敏原的生物化学特性进行了综述。

布拉酵母抗腹泻作用机制研究进展

针对布拉酵母抗腹泻作用机理,包括抗微生物作用、免疫调节作用及调节肠道微生态环境三个方面进行综述。

二硫键及其连接方式对防御素抗菌功能的影响研究进展

防御素是一类内源性、高度稳定、富含半胱氨酸的抗菌肽,对抗感染和宿主免疫调控具有重要作用。其序列内一般有6-8个保守半胱氨酸形成3-4对二硫键。二硫键对数和连接方式在维持防御素结构和抗菌功能方面具有重要作用,此外,高活性线型及低二硫键含量突变体在减少生产成本,简化生产流程方面具有重要作用。综述了防御素分子特征、结构和功能,在此基础上报道二硫键氧化还原状态、数量及其连接方式影响防御素抗菌活性的最新研究进展。

乳铁蛋白分子结构及其抗菌机制

乳铁蛋白是一种单体糖蛋白,是哺乳动物非特异性免疫系统的第一道防线,具有防御微生物感染的功能。分析了乳铁蛋白氨基酸组成、多肽链折叠、铁结合结构、分子表面特性等与抗菌有关的分子结构。综述了乳铁蛋白抗微生物活性的作用机制,包括限制Fe3+利用,抑制细菌生物膜形成,与负电性生物大分子结合,降解细菌毒力因子以及阻止细菌入侵等。

非洲猪瘟的风险分析和防控措施

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一类动物传染病。由于该病死亡率较高,一旦发生将会给养殖业带来巨大的经济损失。该病因保护性免疫反应的复杂性,目前尚无有效的疫苗进行预防。为了防范非洲猪瘟病毒传入我国,根据该病毒的病原学和流行病学特性,尽可能的降低该病的感染和传播途径。并应用血清学和分子生物学无感染性的诊断方法快速、灵敏的检测该病毒,从而将该病传入我国的风险降至最低。

防腹泻布拉酵母培养条件的响应面法优化

在摇瓶水平上对布拉酵母(Saccharomyces boulardii)培养基及培养条件进行优化。先通过单因子法筛选最优碳源、氮源及无机盐,再利用响应面法优化发酵培养基组分及培养条件,采用Plackett-Burman法筛选影响布拉酵母生长的主要因素,用最陡爬坡试验及Box-Benhnken设计进一步优化选定的主要因素。得出最佳发酵培养基为:麦芽糖2%,蛋白胨2%,酵母浸提取物2.08%,培养基初始pH值为6;最佳发酵条件为:温度29.6℃,转速250 r/min,250 mL三角瓶培养基装量29 mL,接种量为5%,培养时间为24 h。优化后的布拉酵母菌体湿重达到32.2 g/L,比优化前(20.9 g/L)提高了54.1%;优化后活菌数达8.3×108CFU/mL,比优化前(5.5×108CFU/mL)提高了50.9%。

嗜酸乳杆菌和乳酸链球菌混合培养及产物分析

嗜酸乳杆乳菌(LA)和酸链球菌(SL)在33℃培养48 h的发酵液中抑菌(金黄色葡萄球菌ATCC25923)效果最好;2菌混培20h后生物量和体系总产酸量远大于各自纯培养,乳酸含量一直上升,到24 h达23.175 mg/L,乙酸含量一直稳定在12 mg/L左右,变化不大,乳酸与抑菌关系密切。LA和SL两菌混培接种比例的抑菌优先顺序为(1:1)、(2:1)、(1:2)。

菌龄与培养基组分对曲霉原生质体释放的影响

培养基组分显著影响曲霉菌丝原生质体的释放，降低培养基中碳素或氮素养分供给量能显著促进原生质体的释放，且降低碳素养分的促效更大。菌龄与原生质体释放量之间的关系因培养基种类而异，在完全培养基上营养体生物量累积曲线具典型正S型曲线特征，原生质体释放量与菌龄呈明显反比例关系，在本研究条件下12h龄固培菌丝体最宜制备原生质体。在酪素培养基上，原生质体释放量与菌龄无关，12-26h菌龄期间的固培菌丝体均可释放出大量原生质体。

非洲猪瘟病毒VP73基因主要抗原表位区的融合原核表达

人工合成VP73基因全长序列,利用DNAstar软件确定其中抗原性较高的区域,利用Primer Premier5.0设计一对特异性引物,通过PCR扩增得到243bp的非洲猪瘟病毒VP73基因片段(vp73l)。将该片段与表达载体pET-32a连接克隆至大肠杆菌Escherichia coli(E.coli)DH5α菌株,经测序、菌落PCR和酶切鉴定,选取VP73L基因正向插入,读码框正确的阳性克隆。构建重组质粒并转化BL21(DE3),经IPTG诱导,融合蛋白以可溶性形式在E.coliBL21(DE3)高效表达,经His亲和层析柱得以纯化。Western blotting显示,该融合蛋白能与兔抗非洲猪瘟病毒VP73多克隆抗体发生特异性反应。所得结果为进一步研究:分离纯化该重组融合蛋白;确证目标抗原蛋白VP73L免疫原性及其特异性,进而达到建立非洲猪瘟病毒的免疫检测方法奠定了必要的材料与技术基础。

管窥一斑:乳铁蛋白研究为实际应用拓展空间——第9届国际乳铁蛋白结构、功能与应用大会召开随笔

乳铁蛋白是一种首先于乳汁中发现的铁结合糖蛋白，对哺乳动物免疫防御起关键作用。“国际乳铁蛋白结构、功能和应用大会”每两年举办一次，是国际同行就乳铁蛋白（1actoferrin，LF）的研发进展和潜在应用价值进行交流的学术平台。来自23个国家和地区的130多位代表们参加了为期4天的九届会议（北京，2009冬），专家们就LF构效关系、配体与受体、细胞增殖与分化调节、免疫调节、药理与临床、LF及衍生肽抗菌活性、

抗菌肽药物工程化技术研究进展

尽管抗生素在畜牧业疾病防治中的主导地位在短期内不会动摇,但病原菌耐药性形成与快速发展让抗菌肽成为近年新药研发热点之一。作为一种在生物体内广泛存在的天然免疫物质,抗菌肽具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等功能,由于药效短、对蛋白酶敏感、细胞毒性高等缺陷而限制其应用。本文综述了抗菌肽基因工程技术、聚乙二醇(PEG)化、靶向性改造和固定化等工程技术在抗菌肽新药开发中的应用研究进展,以促进抗菌肽产业化。

大豆球蛋白A3酸性多肽的原核表达及B细胞表位分析

人工合成大豆球蛋白A3酸性多肽基因cDNA序列,构建原核表达载体pET30a-A3,将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21后用IPTG诱导表达,经His亲和层析纯化,获得纯度约91%融合A3蛋白。Western blotting显示,所获得的A3融合蛋白可与对豆粕过敏的仔猪血清发生免疫反应,表明所得融合蛋白具有免疫活性。利用Lasergene7.0中Protean软件对A3蛋白氨基酸序列进行B细胞抗原表位预测和分析,推测其中97～113、156～160、169～176、186～193、271～284和295～312氨基酸区段是A3酸性多肽的B细胞抗原表位,其中169～176区段的平均抗原指数最高,表位抗原性最强。本结果为进一步研究该蛋白致敏机理及单抗制备奠定了初步基础。

布拉酵母防治病原微生物感染的机制及效果

肠杆菌科细菌、霍乱弧菌、难辨梭菌、幽门螺杆菌和原虫等病原体感染是引起腹泻的主要原因。布拉酵母作为一种益生菌,通过抗微生物、免疫调节、肠道屏障、增加肠道营养等方面维持肠道微生态平衡。该酵母用于治疗肠杆菌科细菌、霍乱弧菌等病原菌感染引起的急性腹泻,能显著降低腹泻频率,缩短腹泻时间;而作为辅助药物联合抗生素治疗难辨梭菌、幽门螺杆菌和原虫等顽固性病原微生物感染,具有提高根除率、减少副作用、降低复发率的作用。本研究综述了布拉酵母对若干腹泻病原体的防治机制和临床应用研究进展。