不同等电点沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白的双向电泳分析

为探索牛奶乳清蛋白提取的最适方法,以生鲜荷斯坦牛奶为对象,采用不同等电点(pH 4.6和pH 4.8)沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白样品,并对提取效果进行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱分析。依据凝胶图谱上蛋白斑点比较图谱质量,采用PDQuest 8.0凝胶图像分析软件进行凝胶图谱分析。结果显示:2种方法均能有效提取牛奶乳清蛋白,且获得的2-DE凝胶图谱背景清晰、蛋白点个体独立、无明显的拖尾现象,且重复性强,但都存在一定的酪蛋白残留。与超速离心法相比,pH 4.6沉淀法和pH 4.8沉淀法提取乳清蛋白的2-DE凝胶图谱可检测到较多的蛋白质斑点。pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备的2-DE凝胶图谱中蛋白点的表达丰度略高于pH 4.8沉淀法。研究表明:pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备2-DE凝胶图谱略优于pH 4.8沉淀法和超速离心法。但2种等电点沉淀法和超速离心法都可有效去除牛奶中的高丰度酪蛋白,提高低丰度蛋白的检出敏感性。

蒙脱石和凹凸棒石对霉菌毒素吸附性能的研究

试验将蒙脱石和凹凸棒石分别添加到含有黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的人工胃液或人工肠液中,探讨2种矿物对霉菌毒素的吸附作用。结果表明,蒙脱石和凹凸棒石对AFB1、玉米赤霉烯酮、T-2毒素的吸附均在1h达到平衡;钠基蒙脱石对AFB1和T-2毒素的吸附率高于钙基蒙脱石和凹凸棒石,吸附率分别为96.8%、38%;蒙脱石和凹凸棒石对玉米赤霉烯酮的吸附率均小于10%。pH对蒙脱石和凹凸棒石吸附霉菌毒素影响显著(P<0.05),pH 5时钙基蒙脱石对AFB1的吸附率显著高于pH 3、pH 7时(P<0.05),为90.1%;蒙脱石和凹凸棒石对玉米赤霉烯酮的吸附效果在pH 3时较佳,对T-2毒素的吸附效果在pH 7时显著高于pH 3、pH 5时(P<0.05)。蒙脱石和凹凸棒石对吸附的霉菌毒素均存在解吸现象,其中AFB1和玉米赤霉烯酮解吸明显。蒙脱石和凹凸棒石对霉菌毒素的吸附作用使其成为重要的吸附剂,然而作为吸附剂的同时不能忽视霉菌毒素的解吸现象,综合考虑吸附与解吸2种现象以便在生产实践中更好的脱除霉菌毒素。

围产期奶牛免疫抑制发生原因及其缓解的营养对策

奶牛围产期一般是指产前3周至产后3周这一时期,此时奶牛生理、代谢和免疫功能发生显著变化,会出现不同程度的免疫抑制现象。由于免疫功能下降,此时也是传染病的高发期,严重影响奶牛健康,进而导致产后牛奶品质下降。因此,如何缓解围产期奶牛免疫抑制状态,降低产后的发病率,已成为目前研究的一个热点。本文综述了围产期奶牛发生免疫抑制的原因及用于缓解的营养对策。

营养素缺乏或充分补给对动物机体免疫功能的调控作用机制

免疫是机体的一种生理功能,机体依靠这种功能识别"自己"和"非己"成分,从而破坏和排斥进入机体的抗原物质,或机体本身所产生的损伤细胞,以维持机体的健康。营养素是维持正常生命活动所必需摄入生物体的食物成分,同时也是维持机体正常免疫的基础。两者关系密切,且营养与免疫的关系逐渐成为研究的热点,深入揭示营养素缺乏或充分添加对动物机体免疫功能的调控作用及其机理,对提高动物免疫力,抵抗感染、增强抗病力及提高生产性能具有重要作用。研究综述了特定营养元素,如蛋白质、维生素(维生素A、维生素E、维生素C等)以及微量元素(铁和锌)等缺乏与供给状态对机体免疫功能的调控作用及其可能机制,旨在进一步探究营养与免疫的关系,为实际生产提供理论基础。

肉牛血浆和尿液中莱克多巴胺残留消除规律分析

【目的】研究莱克多巴胺在肉牛血浆和尿液中的残留消除规律.【方法】选取3头中国‘西门塔尔’杂交肉牛,连续饲喂莱克多巴胺28d,给药剂量2.01mg/(kg·d),采集给药第1、7、14、21、28d和停药第3、7、14、28d血浆和尿液样品,采用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS-MS)检测血浆和尿液中莱克多巴胺含量.【结果】血浆与尿液中莱克多巴胺含量均在给药7d达到峰值,血浆中残留量为(6.55±1.93)ng/mL,未酶解尿液中残留量为(8 402.03±1 307.09)ng/mL.峰值之后莱克多巴胺含量开始下降,停药后下降迅速,停药3d时血浆中残留量为(0.60±0.01)ng/mL,未酶解尿液中残留量为(1 334.93±25.74)ng/mL,停药28d时血浆中未检测到莱克多巴胺,而未酶解尿液仍可检测到(5.77±0.10)ng/mL;酶解后尿液中莱克多巴胺含量显著高于酶解前(P<0.05).【结论】与血浆相比,肉牛尿液更适合作为莱克多巴胺的监管靶标.

氯化铵对泌乳奶牛生产性能及血尿代谢的影响

本试验通过探究饲粮添加不同水平的氯化铵对泌乳奶牛生产性能及血尿代谢的影响,旨在确定氯化铵在泌乳奶牛饲粮中的适宜添加量。采用完全随机设计,将48头泌乳日龄、体重、胎次及产奶量相近的中国荷斯坦奶牛随机分为4组,每组12头,各组氯化铵添加量分别为每头牛0(对照)、150、300和450 g/d。预试期14 d,正试期56 d。结果表明:1)干物质采食量(P=0.012)和产奶量(P=0.008)随氯化铵添加量的增加线性降低,300 g/d组和450 g/d组显著低于对照组(P<0.05);乳脂率和乳糖率未受氯化铵添加的影响(P>0.05),乳蛋白率有线性升高的趋势(P=0.094)。2)随氯化铵添加量的增加,尿液p H呈二次曲线降低(P=0.012),且300 g/d组和450 g/d组显著低于对照组(P<0.05);血清的氯离子(P=0.002),尿液的氯离子(P=0.004)、钙离子(P<0.001)、磷离子(P=0.017)及镁离子(P=0.048)浓度均随氯化铵添加量的增加线性升高。3)血清尿素浓度随氯化铵添加量的增加线性升高(P=0.018),300 g/d组和450 g/d组显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,泌乳奶牛饲粮中氯化铵添加量不能超过300 g/d,推荐剂量为150 g/d。

我国北方不同饲养模式下奶牛饲粮对体外瘤胃发酵特性的影响

本试验采用体外产气法,研究我国北方3种饲养模式下奶牛饲粮对体外瘤胃发酵特性的影响。选取苜蓿、玉米青贮、玉米秸秆、豆粕为主要原料配制3种精粗比一致的不同饲养模式下奶牛饲粮,MF组模拟规模化牛场,粗饲料来源为苜蓿和玉米青贮,CSA组模拟养殖小区,粗饲料来源为玉米秸秆,CSB组模拟散养户,与CSA组粗饲料一致,使用杂粕(菜籽粕、棉籽粕、甜菜渣)代替豆粕与大豆。采用体外产气法体外培养饲粮48h结合动态产气实时记录技术,测定饲粮48h累积产气量、发酵动力学参数以及体外瘤胃发酵指标。结果表明:MF组的体外干物质降解率显著高于CSA组,CSA组显著高于CSB组(P<0.05);MF组与CSA组的48h累积产气量差异不显著(P<0.05),但均显著高于CSB组(P<0.05);各组间总挥发性脂肪酸和氨氮浓度均差异不显著(P<0.05),CSB组微生物蛋白浓度有低于MF、CSA组的趋势(P>0.05)。由此可见,玉米秸秆代替玉米青贮、苜蓿降低了饲粮干物质降解率;杂粕代替豆粕降低了体外发酵48h累积产气量及体外干物质降解率,而对其他瘤胃的发酵指标没有显著影响。

热应激通过诱导奶牛乳腺细胞凋亡减少乳蛋白

本试验旨在研究热应激时乳蛋白含量和产量降低与泌乳相关激素、乳蛋白合成相关信号通路及乳腺细胞凋亡的关系,并揭示热应激引起乳蛋白含量和产量下降的原因。选取4头泌乳日龄、体重、产奶量相近的经产健康荷斯坦奶牛作为试验动物。采取2×2交叉试验设计,试验共2期,每期18 d(其中预试期和试验期各9 d),2期之间间隔30 d。预试期为热中性环境,自由采食。试验期奶牛随机分为2组(n=2),分别为热应激组和配对限饲组。结果表明:1)热应激显著降低了乳蛋白的含量和产量(P<0.05)。2)热应激对酪氨酸激酶(JAK)-信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路及κ-酪蛋白(CSN3)基因表达量没有显著影响(P>0.05)。3)热应激显著增加了哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路中的m TOR的基因表达量(P<0.05),且有增加核糖体S6蛋白激酶(S6K1)基因表达量的趋势(0.05≤P<0.10)。4)热应激增加了乳腺细胞中与细胞凋亡相关的半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)、环氧合酶-2(COX2)基因的表达量(P<0.05),且有增加B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(BAX)基因表达量的趋势(0.05≤P<0.10)。综合可知,热应激可能并不是通过调控单个乳腺细胞合成乳蛋白的能力来影响乳蛋白的含量和产量,而是通过诱导乳腺细胞的凋亡,减少可用于乳蛋白合成的乳腺细胞的数量来影响的。