番鸭呼肠孤病毒σC编码基因在昆虫细胞中的表达

经RT-PCR扩增了番鸭呼肠孤病毒S14株σC蛋白编码基因,将其克隆到pFastBacH-TA载体上,酶切鉴定及测序筛选出阳性重组载体pFastBacHTA-σC;将pFastBacHTA-σC转化到DH10Bac感受态细胞中,通过蓝白斑和PCR筛选获得重组转座子rBacmid-σC。在脂质体介导下将rBacmid-σC转染sf-9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBV-σC;SDS-PAGE和Western blot分析表明:在sf-9细胞中表达了分子量约37kD的σC蛋白,并且该蛋白能与原核表达σC蛋白免疫小鼠制备的血清发生特异免疫反应,为今后以表达的σC蛋白作亚单位疫苗的研制奠定了基础。