苏云金芽孢杆菌菌株B-Hm-16的生物学特性及cry基因型鉴定

B-Hm-16是我室从患病昆虫体内分离的一株苏云金芽孢杆菌,对小菜蛾、甜菜夜蛾、棉铃虫、粘虫和甘蓝夜蛾等多种害虫均具有较高活性;主要形成钝菱形晶体,杀虫蛋白晶体主要由130kDa的蛋白组成;酯酶型与标准菌株蜡螟亚种(B.t.subsp.galleriae)和库斯塔克亚种(B.t.subsp.kurstaki)一致,属于galleriae型;10项生理生化反应结果同标准菌株鲇泽(B.t.subsp.aizawai)亚种一致;经PCR-RFLP鉴定该菌株含有cry1Ab和cry9Ea基因,不含有cry2、cry3、cry4、cry5、cry8和cry11等基因。

遗传工程微生物在生物防治中的应用

本文以杀虫、防病和防霜冻的遗传工程微生物为例,综述了国内外这一研究领域的最新进展概况。遗传工程微生物开始走向实用化,标志着生物防治研究和应用进入了一个新阶段。我国生防微生物资源的开发、利用,为发展遗传工程微生物创造了条件。

遗传工程微生物农药研究进展

近年来各类遗传工程微生物(GeneticallyEngineered microorganisms)的研究十分活跃,其中,令人瞩目的发展是用于植物病虫害的防治。遗传工程微生物农药的研究正以超出人们预想的速度走向产业化。现将国内外有关发展动向作一简单介绍。1 具有杀虫作用的工程微生物1.1 复合苏云金杆菌(Bt) 苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)因能产生伴胞晶体-δ内毒素而对数百种农林、

利用转座子Tn5诱变植物青枯菌获得胞外蛋白输出功能丧失突变体

通过Tn5诱变技术,分离了植物青枯菌生理小种1号、3号的胞外蛋白输出功能丧失突变体。由于Tn5在其基因组单一的eep位点的插入,突变体失去了向培养滤液分泌产生胞外酶和胞外蛋白质的能力。用碱性磷酸酯酶基因PhoA作为报导基因,研究这些胞外蛋白穿越突变体细胞内膜,结果表明,这些胞外蛋白质可以穿过其内膜,但失去了穿越其外膜的能力。胞外多糖在植物体内和体外的产生没有受到eep基因位点突变的影响。该突变体失去了对番茄植株的致萎能力。

温度对椰甲截脉姬小蜂功能反应的影响

在16、20、24、28、32℃5个温度梯度下，测定了椰甲截脉姬小蜂对椰心叶甲的寄生情况。结果表明：在试验温度范围内各温度的功能反应数据均能用Holling圆盘方程很好地拟合；瞬时攻击率在一定范围内随温度的升高而增大，28℃时达到最高值，32℃显著下降；在16～32℃范围内，温度对处理时间影响较小；各温度下在供寄主的24h内，均有部分雌蜂并不产卵寄生于椰心叶甲幼虫，产卵寄生的雌蜂百分率随寄主密度增加而增加。

苏云金杆菌HBF-1菌株的活芽孢对HD-1菌株增效作用的特异性

通过HBF-1菌株培养物各组分与HD-1菌株混合对棉铃虫的LC50测定结果表明,HBF-1孢晶混合物对HD-1的纯晶体和孢晶混合物分别增效170.0%、80.0%,HBF-1活芽孢对HD-1的纯晶体和孢晶混合物分别增效240.0%、160.0%,HBF-1纯晶体和死芽孢均无增效作用。在一定范围内,随着HBF-1菌株活芽孢浓度的增高,其增效作用逐步提高,HBF-1活芽孢浓度为100μg/g时对棉铃虫的增效作用最大,使其死亡率提高了40.0%;HBF-1活芽孢浓度为50μg/g时对小菜蛾的增效作用最大,使其死亡率提高了47.0%。

青枯菌的运动性野生型菌株的发现和鉴定

运用 SMM半固体平板法和悬滴法 ,检测了不同来源的青枯菌野生型菌株 1 0 7株 ,发现 3 0株有明显运动性的青枯菌野生型菌株 ,这与在科学界沿用至今已有 2 0多年的青枯菌野生型菌株没有运动性 [1 1 ]的观点不相符。青枯菌的运动性分为爬行运动和游泳运动 2种方式 ,具有爬行运动能力的青枯菌还表现游泳运动性。同时笔者对数个有运动性的野生型菌株进行了检测、鉴定 ,结果显示 ,被检测菌株的检测性状与前人测定的结果相符 [1～ 4] 。

高寒区玉米早霜防御的技术研究

利用药剂和生防菌防除玉米叶片上的INA细菌,可以减轻或控制玉米早霜危害。研究表明,在-4.6℃霜冻条件下,不同药剂有不同程度的防霜效果,防效顺序:防霜剂1号(55.0%)>抗霜素1号+SR01006(生防菌)混剂(33.15%)>抗霜素1号+壮丰优混剂(23.62%)>抗霜素1号(8.46%),其中防霜剂1号防效达到极显著水平,它能杀灭INA细菌和破坏冰核活性物质(冰蛋白)。

荧光93菌体和代谢物对全蚀病菌和小麦生长影响的初步研究

对荧光假单胞菌工程菌剂“荧光93”菌体和代谢物的作用特性进行了比较。结果表明:该菌剂能保护小麦根系免遭全蚀病危害,对植株生长有促进作用。菌体的抑菌能力强于代谢物,浸种处理防效分别为44.8％和27.8％;代谢物具有更强的刺激植株生长作用,在无病条件下,代谢物灌根处理鲜重增加34.5％,菌体处理鲜重增加7.5％。培养基成份对代谢物的作用有一定影响:以马铃薯葡萄糖培养产生的代谢物,抑菌效果好;营养肉汁酵母粉培养产生的代谢物,促生作用好。据此推断,荧光93菌剂代谢产物中含有抑制全蚀病菌和刺激植株生长的物质。

细菌冰核基因的应用研究

细菌冰核基因的应用研究已成为生物冰核领域的研究热点 ,研究涉及细菌细胞表面展示、促冻杀虫、报告基因、病原微生物高敏检测、作物抗寒育种等多个领域 ,显示良好应用前景。通过对国外在该方面的研究现状的综述 ,和我们在冰核基因促冻杀虫研究方面重要进展的介绍 ,对今后我们拟开展的这一研究工作进行了展望。

运用电激转化技术构建杀虫工程菌

将苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)内毒素杀虫蛋白基因(简称Bt基因)导入荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens),创建新型微生物农药,在国外已有产品试销。在国内,也已引起广泛重视。本实验室曾运用转座子接合转移技术,将Bt基因导入对小麦全蚀病防治效果显著、并有促进植物生长作用的荧光假单胞菌P303菌株中,构建了兼有杀虫防病作用的工程菌。此后,又运用电激转化技术将带有Bt基因的重组质粒转入P303菌株中,获得了具有杀虫活性的PT410、PT415等工程菌株。