一株小反刍兽疫病毒的分离鉴定与生长曲线测定

将含高滴度小反刍兽疫病毒的新鲜病料研磨后接种VERO DS细胞系进行病毒分离,出现细胞病变后连续传代,取3代以上培养物,进行RT-PCR和间接免疫荧光试验及生长曲线测定。生长曲线测定分别以0.01和0.1MOI接种VERO DS细胞,每隔12h测定病毒滴度,连续培养168h,绘制病毒生长曲线,分析生长特性。结果显示,病料接种细胞72h后,出现细胞病变,经RT-PCR和间接免疫荧光试验鉴定为小反刍兽疫病毒;生长特性研究显示,0.01和0.1 MOI两种病毒接种量,病毒滴度最高均为106 TCID50左右,但峰值出现时间和下降速度存在差异,0.01 MOI接种量出现峰值晚,但是维持高滴度时间较长。本文成功分离一株小反刍兽疫病毒,并对两种接毒量的生长特性差异进行了初步分析,为探索该病毒培养方法和收毒时间提供了借鉴。

蛋白质组学在病毒致病机理研究中的应用

近年来,蛋白质组学技术成为医学研究的热点。蛋白质组学是高通量的分析正常及病理条件下机体、组织、细胞或亚细胞成分中的全部蛋白质。对不同空间、不同时间上动态变化的蛋白质组的整体进行比较,分析不同蛋白质组之间在表达数量、表达水平和修饰状态上的差异。蛋白质组学分析作为对生物代谢调控分析的技术手段,以病毒为研究的对象和工具,该技术的研究主要集中在新蛋白的发现、致病机理、疫苗的研制及耐药机制等方面。本文主要概述了蛋白质组学在一些动物传染病病毒致病方面研究和应用,分析了蛋白质组学技术对蛋白功能研究存在的问题和未来发展趋势,以便使研究者了解该技术使用的现状,提供理论参考。

ELISA法检测非洲猪瘟抗体实验条件的优化

本文以灭活非洲猪瘟病毒为包被抗原,分析了包被浓度、酶标二抗、显色底物对ELISA法检测非洲猪瘟抗体的影响,以期获得最适反应条件。以2个阳性血清和一个阴性血清为待检样品,用不同包被浓度、2种酶标二抗和2种显色底物进行ELISA反应,记录吸光值,分析阴阳性样品吸光值差异,优化阴性样品背景值,计算P/N值。结果表明,包被浓度为15μg/m L、二抗为HRP标记蛋白A、显色底物为OPD时,两个阳性样品P/N值分别为4.920和7.259,为本方法的最适反应条件。

中缅边境勐阿渡口边贸传入口蹄疫风险不确定性研究

为量化中缅边境地区猛阿渡口非法传入牛导致的输入口蹄疫风险,基于渡口流行病学调查和统计分布模拟,开展对中缅边境南卡江畔勐阿渡口跨境动物移动互市导致的口蹄疫传入风险不确定性研究。结果表明:勐阿渡口年均非法入境牛的数量在95%的置信区间分布在5万头到2.64万头左右,95%的高置信上限为264 185头,抽样监测模拟显示年输入至少1头阳性牛的概率在95%的置信区间内大于97%。接触评估也显示由于渡口牛群的非法入境使得孟连县的养殖牛群受到至少1头感染的接触风险在95%的CI内分布在0.77到0.79之间,而入境畜群的移动和贩运则会给边境地区和内地动物卫生安全带来更大的风险不确定性。渡口每年非法过境的牛的经济交易量在95%的置信区间分布在4.473亿元到19.903亿元之间,95%的高置信上限接近20亿元人民币的交易额。结果提示,对我国边境地区如猛阿渡口此类的边境贸易需制定强制性规范,亦可考虑通过立法提高边境口岸地区外来动物疫病风险管理的规范性和合法性,逐步提高边境口岸风险管理的效率,降低疫病传入风险。