干细胞的医学生物学潜势及其攻坚难点

章静波研究员1961年毕业于上海第一医学院医疗系。1965年在中国医学科学院实验医学研究所研究生毕业。1976年和1989年先后在英国Imperial Cancer Research Fund和加拿大British Columbia Can-cer Research Center从事细胞与分子生物学研究,现任中国医学科学院基础医学研究所细胞生物室主任、博士生导师,兼任中华医学会医学细胞生物学会副主任委员、《解剖学报》主编、《世界医学杂志》副主编等职。迄今出版专著(主编、参编、译校等)30余部。

RNAi技术在研究神经科学中的应用

使用RNAi技术可以有效而且特异地抑制目的基因的表达,为神经科学的研究提供了有力的技术手段.

神经营养素信号转导研究进展

神经营养素（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｓ，ＮＴｓ）与其膜受体相结合，促成ｔｒｋ同源二聚体的形成，激发Ｒａｓ信号转导途径，启动即早基因和延迟反应基因的转录，或直接参与各种生理反应。靶源性ＮＴｓ的作用由轴突末端ｔｒｋ受体介导，以磷酸化状态的ｔｒｋ或ＮＴ－ｔｒｋ复合物或被活化的其它信使分子等形式沿轴突逆行运输至胞浆胞核，实现其信号转导。ＮＴｓ的作用除了靶源性方式外，也存在局部的自分泌与旁分泌。损伤情况下，ＮＴｓ及其受体表达均增加，轴突运输加快，有助于神经元的存活与再生。ＮＴｓ及其受体基因的缺失将严重影响神经系统的发育。

人干燥综合征A抗原重组体的构建及鉴定

目的克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-52kD),为SSA抗原的表达和使用重组抗原用于自身抗体的临床检测奠定基础。方法根据GenBank中检索到的人SSA-52kDcDNA序列,在5′非编码区和3′非编码区设计特异性引物,提取人源Hela细胞总RNA作为模板,反转录RT-PCR扩增人干燥综合征SSA-52kD抗原cDNA。PCR产物纯化后连接至载体PET-30a,导入大肠杆菌DH5α,构建重组质粒PET-30a-SSA-52kD。对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序;对DNA测序结果进行鉴定分析。结果RT-PCR扩增产物为1447bp。重组质粒PET-30a-SSA-52kD经BglⅡ和HindⅢ双酶切证实含目的基因片段。序列分析提示与GenBank中检索到的一致。结论成功克隆人SSA-52kD基因,并构建重组质粒PET-30a-SSA-52kD。

药物治疗脂质异常新靶点的研究进展

血脂异常是冠心病的危险因素,本文综述了近年来关于脂质异常药物治疗新发现的作用靶点及其特异的抑制剂/激活剂的相关研究,分为影响胆固醇吸收和影响HDL-C、TG代谢两类,包括植物固醇类、二氮杂环丁酮类、ACAT抑制剂、MTP抑制剂、重组载脂蛋白AI脂质体、CETP抑制剂、LPL激活剂等,这些新靶点成为降脂药物开发的研究方向。

北京市儿童、青少年肺功能及其相关因素分析

肺功能检测是-项重要的人体生理功能检测,其生理参考值不仅在医学领域广泛应用,在劳动卫生、体育及相关的科研教学、国计民生中都可能用到,也是衡量人体生长发育的重要指标之一.2001年下半年,本课题组分别在北京城区及郊区抽样的大、中、小学近500名学生进行检测(分为6个年龄组),旨在探讨儿童、青少年肺功能情况,并为今后的全国范围肺功能检测奠定基础及积累经验.

含H^+库杀精聚合物的体外缓释实验研究

当前世界人口迅速增长,到本世纪将达到60亿。研究和开发安全长效的新型避孕节育材料和技术一直是各国关注的问题。已有的避孕技术大致分为口服避孕药、避孕环,外用避孕药膏及皮下埋植缓释避孕药物等,但存在着影响人体内分泌、容易引发一些合并症的副作用或时效短等问题。八十年代以来。

功能高分子H^+库杀精材料的实验研究

本文报道了用我们设计合成的一种具有H^+库缓释作用的杀精聚合物电解质高分子材料进行体外和体内模拟杀精实验的初步结果。实验结果表明,此种高分子材料具有较好的杀精效果,但其生物相容性有待进一步研究改善。

17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯抗肿瘤活性及辐射增效作用研究

目的本文报告新型雌激素化合物17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯对多种瘤谱的抑瘤活性及对肿瘤辐射抑瘤的增效作用;并通过对胸腺、脾等指标综合考察17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯的高抑瘤活性和低副作用特征。方法选择小鼠宫颈癌(U14)瘤株分别接种于IRM-2小鼠,腹腔给予17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯。对辐射抑瘤的增效作用以肉瘤(S180)加以1×5Gy照射,比较对给药组抑瘤的增效作用。结果宫颈癌(U14)使用17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯有明显的抑瘤效果,最佳抑瘤率为U1464.3%,并且17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯对小鼠的造血系统(脾指数)、免疫系统(胸腺指数)几乎无影响;而阳性对照环磷酰胺(CCP)组对小鼠的肝、脾指数、胸腺指数有着明显的损伤(P<0.01)。对肉瘤(S180)辐射抑瘤的增效作用,各剂量组均有较明显抑瘤增效作用。结论17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯有可能成为一种低毒、高效且有辐射增效作用的多功效抗肿瘤新药。

不易感动脉粥样硬化动物脂代谢相关基因的克隆与分析

北京鸭和树鼩是两种很好的不易感动脉粥样硬化的模型动物,以往的研究显示它们血浆中富含HDL和apoA Ⅰ,同时发现其血浆中LCAT活性高、CETP活性低的特点,喂饲高脂饮食数周后动脉壁不易形成粥样硬化斑块.它们的动脉粥样硬化不易感性可能与其血浆中特殊的脂质结构和代谢有关.

胞膜(Ecto)-6A8α-甘露糖苷酶

68Aα-甘露糖苷酶是本实验室克隆的cDNA(GenBank的登记号为AF044414)编码的一个新的人α-甘露糖苷酶[1].该cDNA长3300bp,其开放阅读框架编码1062个氨基酸的蛋白质.蛋白质的1028～1048aa为穿膜区.6A8α-甘露糖苷酶属工型穿膜蛋白.6A8基因定位于第15号染色体q11～13区.

Williams-Beuren综合征的发生机制和研究进展

Williams-Beuren 综合征(WBS)是由于7q11.23邻近基因杂合性丢失所致的部分单体性综合征。临床表型包括心血管疾病、特殊面容、神经行为异常和一过性婴儿期高钙血症。在新生儿中的发病率为1/7500～1/25000,多数为散发,部分为常染色体显性遗传。WBS 的发生机制为染色体间或染色体内低拷贝重复序列的重排。其缺失区域包含20多个基因,其中ELN、LIMK、CYLN2和 TFII-I 等基因的功能已经明确。关于基因型和表型的关系还需要进一步研究。

Sirtuin:依赖NAD^+的去乙酰化酶

组蛋白的乙酰化-去乙酰化修饰在基因表达调控中起重要作用。参与去乙酰化的酶除了经典的Ⅰ类和Ⅱ类组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase,HDAC),还有比较特殊的III类HDAC———Sirtuin,其活性依赖于NAD+。酵母的Sirtuin———Sir2在交配型基因沉默、端粒区基因沉默、rDNA沉默中起重要作用,还可能参与长寿与衰老的调节。在人类,Sirtuin的底物是组蛋白、各种转录因子如p53、FOXO、NF-κB、乙酰化酶如p300和其他的各种功能蛋白质。根据底物特点推测,人类Sirtuin蛋白的生理功能可能一方面是参与调节细胞在应激条件下的存活与死亡的平衡,另一方面是参与代谢的调节。

6A8α-甘露糖甘酶的基因克隆、表达与功能研究

糖蛋白中的糖链在细胞-细胞、细胞-基质及细胞-分子间信息交通起重要作用.糖链可以N-连接方式(连接于蛋白质中由天冬酰氨酸、除脯氨酸外的任意氨基酸、丝氨酸/苏氨酸组成的序列子中的天冬酰胺)或O-连接方式(连接于蛋白质中的丝氨酸或苏氨酸)与蛋白质相连.N-连接与O-连接均需要一系列酶的催化.这些酶的识别与特性研究有助于对蛋白质糖基化机制与糖链功能的了解.

三维细胞培养与肿瘤细胞恶性表型研究

了解肿瘤细胞与微环境的相互作用,对研究肿瘤的发生、发展及抗癌药物的筛选具有重要意义。三维细胞培养技术近年被用于研究肿瘤细胞恶性表型,与传统二维细胞培养相比,它可以模拟体内细胞生长的微环境,是研究肿瘤细胞恶性表型、细胞与细胞外基质信号传递的有力工具。

SUMO:一种新发现的翻译后修饰蛋白

靶蛋白被小泛蛋白样修饰蛋白 (smallubiquitin likemodifier,SUMO)修饰属于真核基因表达的翻译后加工 ,这一过程与细胞核内的一系列生理过程中有关 ,包括 :核运输、信号传递、维持复杂基因组的复制忠实性 。

EGF结构与功能研究

表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)在1962年首次由Cohen报道发现,其后的三十余年,对这一小分子蛋白进行了广泛而深入的研究.人和小鼠的EGF由53个氨基酸组成的、分子量为6KDa,有三对保守的二硫键,没有糖基化位点,二级结构中没有α-螺旋.

v-fos转化效应因子是CD2胞内区新的结合蛋白

在以前的研究中,本实验室采用酵母双杂交技术,从人KT3T淋巴细胞cDNA文库中筛选到一个与CD2胞内区结合的新的蛋白分子,称为v-fos转化效因子(v-fostransformationeffector,Fte-1).本研究进一步分析鉴定了Fte-1与CD2相互作用的分子机制和Fte-1的生物学功能.应用研究生物大分子相互作用的生物传感器分析了CD2胞内区与Fte-1结合特性和亲和力,表明二者确为特异性结合,其解离常数KD值为10?7mol/L;分子缺失突变和体外磷酸化实验结果表明,Fte-1可被蛋白激酶C(PKC)磷酸化,其磷酸化位点为Ser238;基因表达研究显示,在JurkatT淋巴细胞白血病细胞中Fte-1呈簇集性分布;CD2单克隆抗体T11刺激JurkatT淋巴细胞后,Fte-1这种簇集性分布特征消失,而趋向细胞膜,并与CD2共定位于细胞膜区域;Fte-1的PKC磷酸化位点Ser238突变为Gly238后,其与CD2分子的共定位能力丧失,表明Fte-1的Ser238的PKC磷酸化对Fte-1和CD2在T淋巴细胞内的结合起关键作用;使用Fte-1干扰RNA技术抑制Fte-1在JurkatT淋巴细胞中的表达,可抑制佛波酯(PMA)和离子霉素(ionomycin)引起的JurkatT淋巴细胞激活后凋亡,提示Fte-1参与了CD2对T淋巴细胞凋亡的调节.上述结果进一步确证Fte-1是CD2胞内区的特异结合蛋白,并可能参与了CD2介导的细胞凋亡信号传递.