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EV71病毒对树鼩原代肾上皮细胞感染模型的建立
被引量:
3
1
作者
杨铭
胡晓星
+5 位作者
王文广
张莉
董书维
冯悦
代解杰
夏雪山
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期117-122,共6页
目的建立EV71对树鼩原代肾细胞的感染模型。方法胰蛋白酶消化法获得树鼩的原代肾细胞,用EV71感染树鼩肾细胞,测定1、2、4、6和8 d培养上清病毒滴度,分别用Western blot和间接免疫荧光法检测细胞中EV71病毒VP1蛋白的表达,以确定EV71病毒...
目的建立EV71对树鼩原代肾细胞的感染模型。方法胰蛋白酶消化法获得树鼩的原代肾细胞,用EV71感染树鼩肾细胞,测定1、2、4、6和8 d培养上清病毒滴度,分别用Western blot和间接免疫荧光法检测细胞中EV71病毒VP1蛋白的表达,以确定EV71病毒对树鼩原代肾细胞的感染性。结果对分离得到的树鼩原代肾细胞进行传代纯化和形态鉴别,建立以树鼩原代肾细胞为主的细胞培养。用EV71病毒感染树鼩原代肾细胞,感染后48~96 h病毒滴度可达到1.3×10~6TCID_(50)/m L,说明EV71病毒可有效感染树鼩原代肾细胞并有效增殖。Western blot检测发现,EV71病毒VP1蛋白可在感染后2~8 d的树鼩原代肾细胞中有效检出,间接免疫荧光法则在感染后2~6 d细胞的细胞质中检测到病毒VP1蛋白的分布。结论在成功建立树鼩原代肾细胞培养的基础上,确定了EV71病毒对树鼩原代肾细胞的感染性和病毒增殖特性,初步建立了EV71树鼩原代肾细胞感染模型。
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关键词
树鼩原代肾细胞
EV71
病毒增殖
VP1蛋白
感染模型
下载PDF
职称材料
人轮状病毒G1P[8]型感染树鼩原代小肠上皮细胞模型的建立
2
作者
李道群
彭杰
+6 位作者
甸子芩
王文广
张阿梅
冯悦
牛华
代解杰
夏雪山
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期111-116,共6页
目的探究树鼩原代小肠上皮细胞的增殖特性,建立人轮状G1P[8]型病毒体外感染树鼩原代小肠上皮的细胞模型。方法采用胶原酶XI和中性蛋白酶I联合消化法获取树鼩原代小肠上皮细胞,经纯化和鉴定,用人轮状G1P[8]型病毒感染细胞,测定培养上清...
目的探究树鼩原代小肠上皮细胞的增殖特性,建立人轮状G1P[8]型病毒体外感染树鼩原代小肠上皮的细胞模型。方法采用胶原酶XI和中性蛋白酶I联合消化法获取树鼩原代小肠上皮细胞,经纯化和鉴定,用人轮状G1P[8]型病毒感染细胞,测定培养上清的病毒滴度和载量,并用Western blot和间接免疫荧光检测法检测人轮状病毒G1P[8]型VP6蛋白的表达情况,评价人轮状G1P[8]型病毒体外对树鼩原代小肠上皮细胞的感染性。结果分离的树鼩原代小肠上皮细胞经传代培养纯化,获得纯度达90%树鼩原代小肠上皮细胞。对树鼩原代小肠上皮细胞、原代肾细胞、HCT116细胞和MA104细胞进行轮状病毒易感性比较,确定树鼩原代小肠上皮细胞可以被人轮状病毒G1P[8]感染,培养72 h时病毒滴度可达到2.0×105TCID_(50)/m L。经Western blot和间接免疫荧光发现在人轮状G1P[8]型病毒感染树鼩原代小肠上皮细胞1~5 d均能检测到人轮状病毒VP6蛋白的表达和分布。结论确立了树鼩原代小肠上皮细胞的分离、纯化与培养方法,并建立了人轮状G1P[8]型病毒感染树鼩原代小肠上皮细胞的体外模型。
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关键词
树鼩原代小肠上皮细胞
轮状病毒
病毒增殖特性
VP6蛋白
下载PDF
职称材料
题名
EV71病毒对树鼩原代肾上皮细胞感染模型的建立
被引量:
3
1
作者
杨铭
胡晓星
王文广
张莉
董书维
冯悦
代解杰
夏雪山
机构
昆明理工大学生命
科学
与技术
学院
中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩标准化研究与疾病动物模型创建省创新团队
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期117-122,共6页
基金
国家科技支撑计划项目子课题(2014BAI01B01)
文摘
目的建立EV71对树鼩原代肾细胞的感染模型。方法胰蛋白酶消化法获得树鼩的原代肾细胞,用EV71感染树鼩肾细胞,测定1、2、4、6和8 d培养上清病毒滴度,分别用Western blot和间接免疫荧光法检测细胞中EV71病毒VP1蛋白的表达,以确定EV71病毒对树鼩原代肾细胞的感染性。结果对分离得到的树鼩原代肾细胞进行传代纯化和形态鉴别,建立以树鼩原代肾细胞为主的细胞培养。用EV71病毒感染树鼩原代肾细胞,感染后48~96 h病毒滴度可达到1.3×10~6TCID_(50)/m L,说明EV71病毒可有效感染树鼩原代肾细胞并有效增殖。Western blot检测发现,EV71病毒VP1蛋白可在感染后2~8 d的树鼩原代肾细胞中有效检出,间接免疫荧光法则在感染后2~6 d细胞的细胞质中检测到病毒VP1蛋白的分布。结论在成功建立树鼩原代肾细胞培养的基础上,确定了EV71病毒对树鼩原代肾细胞的感染性和病毒增殖特性,初步建立了EV71树鼩原代肾细胞感染模型。
关键词
树鼩原代肾细胞
EV71
病毒增殖
VP1蛋白
感染模型
Keywords
Tree shrew, primary renal cells
EV71 virus
Virus proliferation
Protein VP1
Infection model
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
下载PDF
职称材料
题名
人轮状病毒G1P[8]型感染树鼩原代小肠上皮细胞模型的建立
2
作者
李道群
彭杰
甸子芩
王文广
张阿梅
冯悦
牛华
代解杰
夏雪山
机构
昆明理工大学生命
科学
与技术
学院
昆明理工大学附属医院(云南
省
第一人民医院)
中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩标准化研究与疾病动物模型创建省创新团队
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期111-116,共6页
基金
国家科技支撑计划项目(编号:2014BAI01B01)
文摘
目的探究树鼩原代小肠上皮细胞的增殖特性,建立人轮状G1P[8]型病毒体外感染树鼩原代小肠上皮的细胞模型。方法采用胶原酶XI和中性蛋白酶I联合消化法获取树鼩原代小肠上皮细胞,经纯化和鉴定,用人轮状G1P[8]型病毒感染细胞,测定培养上清的病毒滴度和载量,并用Western blot和间接免疫荧光检测法检测人轮状病毒G1P[8]型VP6蛋白的表达情况,评价人轮状G1P[8]型病毒体外对树鼩原代小肠上皮细胞的感染性。结果分离的树鼩原代小肠上皮细胞经传代培养纯化,获得纯度达90%树鼩原代小肠上皮细胞。对树鼩原代小肠上皮细胞、原代肾细胞、HCT116细胞和MA104细胞进行轮状病毒易感性比较,确定树鼩原代小肠上皮细胞可以被人轮状病毒G1P[8]感染,培养72 h时病毒滴度可达到2.0×105TCID_(50)/m L。经Western blot和间接免疫荧光发现在人轮状G1P[8]型病毒感染树鼩原代小肠上皮细胞1~5 d均能检测到人轮状病毒VP6蛋白的表达和分布。结论确立了树鼩原代小肠上皮细胞的分离、纯化与培养方法,并建立了人轮状G1P[8]型病毒感染树鼩原代小肠上皮细胞的体外模型。
关键词
树鼩原代小肠上皮细胞
轮状病毒
病毒增殖特性
VP6蛋白
Keywords
Primary intestinal epithelial cells, Tree shrews
Rotavirus
Virus proliferation
Protein VP6
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EV71病毒对树鼩原代肾上皮细胞感染模型的建立
杨铭
胡晓星
王文广
张莉
董书维
冯悦
代解杰
夏雪山
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
下载PDF
职称材料
2
人轮状病毒G1P[8]型感染树鼩原代小肠上皮细胞模型的建立
李道群
彭杰
甸子芩
王文广
张阿梅
冯悦
牛华
代解杰
夏雪山
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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