巨噬细胞特异性表达载体的构建及鉴定

目的构建巨噬细胞特异性白喉毒素受体过表达载体并检测其在巨噬细胞中的表达情况。方法将白喉毒素受体基因Hbegf克隆入pc DNA3. 1载体中扩增Hbegf与BGHpoly A尾片段,与克隆入p UCm-T载体中的巨噬细胞特异性启动子相连接,分别转染巨噬细胞与其他细胞,通过荧光定量PCR鉴定其表达情况。结果特异性表达载体通过测序以及酶切鉴定构建成功,在巨噬细胞中的表达高于未转染的巨噬细胞以及转染的非巨噬细胞。结论构建了巨噬细胞特异性表达人白喉毒素受体载体,瞬时转染后可在巨噬细胞中特异性表达白喉毒素受体,为动脉粥样硬化易损性斑块的建立以及斑块内与凋亡相关的其他研究提供了一定依据。