受体相互作用蛋白3——细胞凋亡与坏死的调节阀

综述了受体相互作用蛋白(RIPs)蛋白结构和RIP3调控细胞凋亡与坏死机制的研究进展.受体相互作用蛋白3(receptor-interacting protein3,RIP3)是丝/苏氨酸蛋白激酶家族成员之一,该蛋白质家族包含一类高度保守的丝/苏氨酸激酶结构域.RIP家族激酶作为细胞应激传感分子,在调控细胞凋亡、细胞坏死和存活通路中发挥重要作用.近年发现,RIP3参与肿瘤坏死因子TNFα诱导的细胞程序化坏死的生物学过程.认识RIP3调控TNFα诱导的细胞凋亡与坏死不同死亡途径转换的分子机制,有助于发现肿瘤治疗的新策略.

Cdc2/cyclin B1对中心体蛋白Nlp的调控在细胞生长中的作用

目的研究中心体蛋白Nlp受Cdc2/cyclinB1磷酸化调控对细胞生长的影响。方法 Northern blot检测不同组织中Nlp的表达;EGFP-Nlp转染HeLa细胞,采用Double-Thymidine方法细胞同步化后释放,细胞免疫荧光方法观察Nlp在整个细胞周期中的亚细胞定位;构建Nlp磷酸化位点突变细胞系,采用人工计数和MTT法检测磷酸化位点突变对细胞生长的影响。结果 Nlp在不同组织中存在表达差异,Nlp在不同细胞周期呈现不同的亚细胞定位,磷酸化位点Ser185和Ser589的突变促进细胞的体外生长。结论 Cdc2/cyclin B1磷酸化位点突变后,Nlp获得了更强的促进细胞生长的能力。

ABCC4与人类肿瘤

ABCC4(ATP-binding cassette transporter family class C4,ABCC4)是ABC蛋白家族成员,主要参与转运机体物质代谢中产生的有机阴离子和一些异型生物质等生物学功能。近年研究发现某些人类肿瘤存在Abcc4基因的拷贝数变异,主要表现为Abcc4基因拷贝数增加和ABCC4蛋白过表达,这些改变与肿瘤发生发展、耐药,以及治疗疗效具有相关性。该文综述了Abcc4基因的拷贝数变异和异常表达与肿瘤生物学特性的关系,探讨ABCC4在肿瘤发生发展中的作用机制。

叶酸受体介导pH敏感型分子靶向阿霉素脂质体的表征与含量测定法的建立

目的:表征叶酸受体介导pH敏感型分子靶向阿霉素脂质体,建立RP-HPLC法进行含量测定。方法:采用动态光散射法测定脂质体的粒径;采用液相色谱法开展含量测定的方法学研究与验证。选用Agilent HC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为1.23%醋酸钠水溶液(用冰醋酸调pH至3.3)-甲醇(55∶45),等度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,检测波长233 nm,柱温30℃。结果:自制的新型脂质体粒径(120±20)nm(PDI<0.200),包封率不小于91.0%。建立的RP-HPLC法中,自制脂质体的辅料对主峰无干扰,且各杂质峰与主成分峰均能达到基线分离,检测限为0.2 ng(S/N=3),定量限为1.0 ng(S/N=10),主成分的浓度在1.0～40.0μg.mL-1范围内线性良好(r=0.9991)。结论:本文所建方法简便易行,专属性强,灵敏,耐用性好,适于本脂质体中阿霉素的含量测定。

外显子组测序技术在人类疾病研究中的应用

外显子组测序是针对基因组中的蛋白质编码区,靶向富集外显子区域测序,以发现疾病相关遗传变异的技术。该技术近年越来越多地应用于发现人类基因组低频变异、鉴定单基因遗传病致病基因和肿瘤等复杂疾病易感基因研究,成为人类疾病相关变异研究的重要工具。综述了外显子组测序技术的基本原理及其在人类疾病相关基因研究中的应用。

自组装蛋白质芯片--功能蛋白质组学的新工具

传统的蛋白质芯片制备需要进行繁琐的蛋白质表达与纯化。同时,由于蛋白质活性不稳定,蛋白质芯片不宜长期保存。新一代自组装蛋白质芯片,利用无细胞表达体系和DNA固定技术,能够将蛋白质即时、原位表达并固定在芯片上,有效地解决了传统蛋白质芯片的制备和保存问题。目前自组装蛋白质芯片已初步用于大规模蛋白-蛋白质相互作用的筛选,以及鉴定免疫优势抗原等研究。该文介绍了近年自组装蛋白质芯片技术的进展和应用研究。