大蒜素抑制口腔癌细胞系CAL27的增殖

目的探讨大蒜素对口腔舌鳞状细胞癌(OTSCC)细胞系CAL27增殖的影响。方法采用人OTSCC细胞系CAL27,于培养液中加入不同浓度大蒜素(5、10、20、40、60、100、200、400μmol/L)及对照DMSO处理后,进行CCK8法检测细胞增殖,RT-qPCR检测增殖相关标志物ki-67表达,以及转录本测序并进行通路富集分析。结果与对照组相比,较低浓度(20μmol/L)的大蒜素即有抑制CAL27细胞增殖的作用(P<0.01)。RT-qPCR结果显示,大蒜素能明显抑制CAL27细胞中ki-67表达,且在较低浓度(20μmol/L)就有明显抑制作用(P<0.01)。转录本测序结果显示,大蒜素能明显抑制肿瘤相关microRNA表达,尤其是miR-200a和miR-199a1的表达。结论较低浓度大蒜素即可明显抑制口腔癌细胞系CAL27的增殖,其可能通过抑制肿瘤相关microRNA来发挥作用。

结直肠神经内分泌肿瘤细胞突变类型分析

目的 探讨结直肠神经内分泌肿瘤(NETs)的突变类型,更好地了解结直肠NETs的发病机制。方法 招募结直肠NETs手术患者,取结直肠NETs和对应的癌旁组织,并进行全基因组测序(WGS)和进一步深入分析。结果 通过WGS测序发现,结直肠NETs突变类型多样,包括单核苷酸突变、小片段序列的插入和缺失突变(InDel)、基因拷贝数变异(CNV),以及大的结构性变异(SV)如插入(INS)、缺失(DEL)、染色体内易位(ITX)、染色体间易位(CTX)和反转(INV)等。结论 在结直肠NETs发生时,体细胞发生了大量的突变,尤其以染色体CTX变异最为显著。

颞下颌关节3种高清类动态序列成像质量评价

目的比较3种磁共振高清类动态检查方法评价颞下颌关节盘及髁突运动情况的图像质量。方法对25例疑诊颞下颌关节功能紊乱患者进行单次激发快速自旋回波序列(SSFSE)、稳态进动平衡序列(FIESTA)、扰相梯度回波序列(SPGR)的斜矢状位检查。由2名放射科诊断医师采用双盲法分别对图像进行主客观评价,主观评价内容包括髁突、关节盘、关节盘周围软组织、翼外肌的信号强度,关节盘与髁突、周围软组织间的对比度,髁突、关节盘及其运动的显示情况;客观评价指标包括图像的信号强度、信噪比(SNR)及对比噪声比(CNR),并对3种序列图像质量的主客观指标进行比较。结果关节盘SSFSE序列信号强度显著低于FIESTA和SPGR序列(P均<0.001),髁突和周围软组织SSFSE序列信号强度显著高于FIESTA和SPGR序列(P均<0.001),翼外肌SPGR序列信号强度显著高于SSFSE和FIESTA序列(P=0.017、P<0.001);3种序列中,关节盘结构在SSFSE序列显示最清晰(χ^(2)=41.952,P<0.001),关节盘与髁突(χ^(2)=35.379,P<0.001)、关节盘与周围软组织对比度(χ^(2)=27.324,P<0.001)在SSFSE序列最明显;关节盘运动在SSFSE序列最清晰(χ^(2)=44.655,P<0.001);SSFSE、FIESTA序列清晰显示关节盘移位及复位的比例明显高于SPGR序列(P均<0.001)。SSFSE、FIESTA和SPGR序列CNR(χ^(2)=21.400,P<0.001)、SNR(χ^(2)=34.880,P<0.001)、髁突信号强度值(F=337.151,P<0.001)差异有统计学意义,其中,SSFSE序列CNR显著高于FIESTA序列(P<0.001),但与SPGR序列相比差异无统计学意义(P=0.472),而SNR和信号强度值均显著高于FIESTA和SPGR序列(P均<0.001)。结论SSFSE动态序列具有较好的图像质量,能清晰显示颞下颌关节相关结构和运动情况,可作为动态序列扫描的首选。

掺钕钇铝石榴石激光联合脱敏牙膏封闭牙本质小管后抗酸蚀的效果评价

目的 评估掺钕钇铝石榴石(Nd∶YAG)激光和含有氟化亚锡系统的脱敏牙膏不同应用顺序对牙本质小管封闭效果的影响。方法 选择12颗完整的新鲜拔除的人第三磨牙制备成0.8 mm厚牙本质片,将每个牙本质片再分为4小片,取其中3小片,用6%的柠檬酸进行腐蚀,随机分配至以下3组(n=12):(1)对照组:无处理;(2)Nd∶YAG激光+牙膏(TB)组:先用Nd∶YAG激光照射,后用脱敏牙膏刷牙;(3)TB+Nd∶YAG组:先用脱敏牙膏刷牙,后用Nd∶YAG激光照射。Nd∶YAG激光照射参数均为:1 W,15脉冲/s,脉冲宽度150μs,照射10 s, 6个循环。经上述处理后,将Nd∶YAG+TB组和TB+Nd∶YAG组的12个牙本质片随机分配到4个亚组(n=3),分别在可口可乐液中接受酸蚀0、5、10、15 min。采用扫描电子显微镜观察各组牙本质片并拍片,由8名单盲检查员根据统一标准给出评分,采用方差分析对各组评分进行比较。结果 酸蚀前,Nd∶YAG+TB组和TB+Nd∶YAG组的牙本质小管封闭评分分别为(4.83±0.09)分和(3.85±0.66)分,均明显高于对照组的(0.10±0.07)分(P均<0.0001),Nd∶YAG+TB组与TB+Nd∶YAG组差异无统计学意义(P=0.0590)。Nd∶YAG+TB组酸蚀5、10、15 min牙本质小管封闭评分分别为(4.33±0.60)、(4.27±0.24)、(3.63±0.07)分,与TB+Nd∶YAG组的(4.04±0.10)、(3.76±0.59)、(3.17±0.29)分差异均无统计学意义(P均>0.05)。在Nd∶YAG+TB亚组中,酸蚀15 min牙本质小管封闭评分明显低于酸蚀前(P=0.0011)。在TB+Nd∶YAG组中,酸蚀前后牙本质小管封闭评分间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 适当参数的Nd∶YAG激光照射结合使用脱敏牙膏,不论先后顺序,均可以产生良好的牙本质小管封闭效果,但是先用脱敏牙膏刷牙后用Nd∶YAG激光照射组在酸蚀后的牙本质封闭效果更稳定。

单向滤膜减压保髓新技术用于不可复性牙髓炎活髓保存治疗1例

牙髓出现炎症时,继发髓腔内高压及血液循环障碍是牙髓炎出现不可逆缺血坏死的核心环节。单向滤膜减压保髓新技术的基本原理为:通过对髓腔开窗,采用具有阻止口腔微生物入侵牙髓组织的单向滤膜,持续对髓腔进行减压,改善牙髓血液微循环,待炎症的牙髓组织恢复正常后,再行永久性盖髓治疗。本研究应用此项技术,对1例不可复性牙髓炎进行活髓保存治疗,随访4年,效果良好。

孕期尼古丁暴露对子代小鼠牙釉质形成的影响

目的研究孕期尼古丁暴露对子代小鼠牙釉质形成的影响及其可能的表观遗传学机制。方法通过随机数字表法将10只C57BL/6孕鼠分为对照组(皮下注射生理盐水)及孕期尼古丁暴露(prenatal nicotine exposure, PNE)组(皮下注射尼古丁溶液), 每组5只, 孕鼠生产后分别收集出生后0 d(postnatal day 0, P0;P14、P25含义依此类推)、P14、P25新生小鼠, 根据母代分组分为子代对照组及子代PNE组, 并记录P0、P25子代小鼠体质量。采用显微CT(micro-CT)扫描分析、扫描电镜和维氏显微硬度检测对子代小鼠牙槽骨和下颌切牙进行硬组织相关参数分析。提取P25子代小鼠下颌骨组织及第3代牙上皮干细胞(dental epithelial stem cell, DESC)中的总RNA, 通过实时荧光定量PCR检测成骨向及成釉向分化相关基因、增殖相关标志物和干细胞标志物的表达水平。采用石蜡切片免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, Pcna)、釉原蛋白(amelogenin, Amelx)、甲基转移酶ZESTE增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2, Ezh2)、组蛋白H3第27位赖氨酸的三甲基化修饰(histone H3 trimethylated at lysine 27, H3K27me3)阳性染色分布及水平。使用细胞增殖(cell counting kit-8, CCK-8)试剂盒对外源性添加不同浓度(0.01、0.1、1 mmol/L)尼古丁以及Ezh2抑制剂GSK126的DESC进行细胞活力检测。结果 PNE组孕鼠较对照组更容易出现不良妊娠结局, P0时子代PNE组小鼠体质量[(0.99±0.02)g]显著低于子代对照组[(1.20±0.04)g](P<0.001);P25时, 子代PNE组小鼠体质量[(9.65±1.32)g]显著低于子代对照组[(15.26±1.70)g](P<0.001), 死产率[(46.40±9.30)%]显著高于对照组(0)(P<0.001)。P14和P25时, 子代PNE组小鼠下颌切牙釉质矿化沉积点与第一磨牙近中面的距离数值[分别为(-1 349±45)、(-506±380)μm]均较子代对照组[分别为(-1 192±147)、(504±198)μm]显著减小(P<0.05, P<0.001), 提示矿化沉积点延迟。子代PNE组小鼠切牙釉柱及釉柱间质较对照组排列松散无序, 显微硬度[(245.7±18.4)MPa]较子代对照组[(371.9±28.7)MPa]显著降低(P<0.001)。HE染色显示子代PNE组小鼠前成釉细胞(pre-ameloblast, Pre-Am)区域排列较对照组紊乱, 矿化沉积点推迟, 暂时性扩增细胞(transit-amplifying cell, TA)及Pre-Am区域延长。免疫组织化学染色显示, 子代PNE组小鼠唇侧颈环(labial cervical loop, LaCL)整体Pcna表达较子代对照组显著增多(P<0.05), H3K27me3较对照组显著富集(P<0.01), 对应区域可见Ezh2表达显著增加(P<0.01), 同时成釉细胞胞质中Amelx阳性信号减弱。体外实验添加1 mmol/L 尼古丁能显著上调子代PNE组DESC的Pcna基因表达水平(P<0.01), 同时显著下调DESC标志物B淋巴瘤Mo-MLV插入蛋白1、富亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1和成釉细胞向分化的相关基因Amelx等的基因表达水平(P<0.05, P<0.05, P<0.01)。此外, 与0 h时相比, 干预24 h后1 mmol/L尼古丁可显著增强DESC的增殖活性(P<0.001), 添加10 μmol/L Ezh2抑制剂GSK126可挽救1 mmol/L尼古丁对DESC带来的增殖促进作用。结论孕期尼古丁暴露可能导致成釉向谱系定向分化过程延迟, 致子代小鼠DESC增殖及分化异常, 并且影响H3K27me3表观遗传修饰水平, 造成子代牙釉质发育障碍, 提示孕期尼古丁暴露是牙发育的危险环境因素。