基质金属蛋白酶14基因在人喉鳞状细胞癌中表达差异的分析

目的 探讨基质金属蛋白酶14(matrix mettallo-proteinase 14,MMP14)即膜性基质金属蛋白酶(membrane type-1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)基因在喉癌中表达与喉癌临床病理生物学行为的关系。方法 从分子和蛋白质水平,研究MMP14在喉癌组织和其相邻的正常黏膜组织的表达差异,分析MMP14基因及其蛋白表达与喉癌临床病理生物学行为的关系。结果 33例配对喉癌标本中MMP14基因在26例喉癌组织中的表达明显高于其相应的正常黏膜组织,2例喉癌低表达,5例表达差异不明显。MMP14基因在不同分期的声门型喉癌中的表达差异无显著性(P>0.05),但在不同分化程度、有无淋巴结转移的声门型喉癌中,表达差异有显著性(P<0.05);在不同分期、不同分化程度及有无淋巴结转移的声门上型喉癌中,表达差异有显著性(P<0.05)。MMP14蛋白绝大多数位于癌巢细胞质内及癌巢间质内的成纤维细胞质内,在部分病例中有的正常黏膜细胞内不表达,有的表达;MMP14蛋白在绝大多数喉癌组织中的表达明显高于其相邻的正常黏膜组织。MMP14蛋白表达与MMP14基因表达基本是一致的。MMP14蛋白表达差异有显著性组患者的术后生存率与表达差异无显著性组的术后生存率无统计学差异(P>0.05)。结论 MMP14蛋白在喉癌的侵袭中可能只起一定的作用。

RNA干扰技术的应用

RNA干扰(RNAi)能产生序列特异性的基因沉默。RNAi的研究与应用在短时间内得到了迅速发展,其应用主要围绕特异性降解同源mRNA的作用方面。现对其应用进展进行综述。

腺病毒介导的分化基因RA-538诱导肝癌细胞增殖抑制和凋亡的研究

目的 研究携带分化基因RA 53 8的重组腺病毒 (Ad RA53 8)对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法 Ad RA53 8感染人肝癌细胞系BEL 740 2和QSG 770 1 ,绘制生长曲线 ,克隆形成实验评价Ad RA53 8对肝癌细胞增殖的抑制作用 ,应用流式细胞术、DNA原位末端标记、梯形DNA研究细胞周期及细胞凋亡情况 ,逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)和免疫印迹法 (Westernblot)检测相关基因的表达。结果 感染Ad RA53 8后 ,RA53 8在肝癌细胞内获得了表达 ,并且降低了c myc的表达。肿瘤细胞的增殖受到明显抑制 ,感染Ad RA53 85d后 ,BEL 740 2的活细胞数为(1 0 .0± 3 .7)× 1 0 4,对照组为 (1 72 .7± 1 1 .9)× 1 0 4(P <0 .0 0 1 ) ;QSG 770 1感染Ad RA53 83d后的活细胞数为 (2 3 .0± 4.3 )× 1 0 4,对照组为 (91 .7± 7.2 )× 1 0 4(P <0 .0 0 1 ) ;感染Ad RA53 8后BEL 740 2和QSG 770 1形成的克隆数分别为 1 3± 4和 1 5± 2 ,明显少于对照组的 1 88± 9和 1 75± 9(P <0 .0 0 1 ) ,而且还出现了细胞周期的阻滞和凋亡。结论 Ad RA53 8对肝癌细胞具有明显的抑制作用 。