重组RA538、反义c-myc腺病毒对bcl-2高表达细胞系的作用及分子机制

目的 研究重组RA5 38(Ad RA5 38)、反义c myc腺病毒 (Ad ASc myc)在bcl 2高表达细胞系中的作用及其分子机制。方法 采用细胞形态学观察、MTT、RT PCR和Northernblot等方法 ,研究RA5 38、反义c myc重组腺病毒在bcl 2高表达的人宫颈癌细胞系HeLa bcl2和SiHa bcl2以及在其亲本细胞中的生物学作用及其分子机制。结果 以Lipofectin转染bcl 2真核表达质粒建立的bcl 2基因高表达细胞系HeLa bcl2和SiHa bcl2 ,均能高效、稳定地表达bcl 2。Ad RA5 38和Ad ASc myc对HeLa和SiHa均有明显的生长抑制及凋亡诱导作用 ,并可以抑制HeLa细胞bcl 2和c myc基因的表达。但Ad RA5 38、Ad ASc myc对高表达bcl 2的HeLa bcl2和SiHa bcl2细胞bcl 2和c myc基因表达虽有一定抑制作用 ,但对其生长抑制及诱导凋亡的作用轻微 ,未能抵消高表达的bcl 2抑制细胞凋亡的作用。结论Ad RA5 38、Ad ASc myc可能是通过抑制bcl 2及c

金雀异黄素拮抗生长因子对HCE 16/3细胞的生长刺激作用

研究金雀异黄素影响生长因子（ＫＧＦ和ＥＧＦ）对ＨＰＶ１６型ＤＮＡ－永生化人宫颈角质细胞（ＨＣＥ１６／３细胞）的生长调节。方法使用［３Ｈ］－胸苷掺入试验，ｕＰＡ分泌的检测和酪氨酸蛋白激酶试验，分析金雀异黄素影响生长因子对培养的ＨＣＥ１６／３细胞的生长调节。结果在无血清培养的条件下，生长因子刺激ＨＣＥ１６／３细胞的生长，但金雀异黄素不仅抑制生长因子对ＨＣＥ１６／３细胞的生长刺激，而且抑制ＫＧＦ对ＨＣＥ１６／３细胞ｕＰＡ分泌的刺激作用，这种抑制效应可能与它抑制生长因子受体的酪氨酸蛋白激酶活性有关。

胰岛素样生长因子-Ⅰ上调表皮生长因子对HCE16/3细胞的作用

目的了解胰岛素样生长因子－Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）对ＨＰＶ１６型ＤＮＡ－永生化的人宫颈上皮细胞（ＨＣＥ１６／３细胞）的生长和病毒基因表达的调节。方法使用流式细胞术、软琼脂糖试验和ＲＴ－ＰＣＲ分析了ＩＧＦ－Ｉ和表皮生长因子（ＥＧＦ）对ＨＣＥ１６／３细胞的生长和病毒早期基因表达的调节。结果在缺乏血清的培养条件下，ＩＧＦ－Ｉ对ＨＣＥ１６／３细胞的生长几乎没有调节作用。但ＥＧＦ对永生化上皮细胞有生长刺激作用，这种刺激作用可被ＩＧＦ－Ｉ增强。ＥＧＦ合并使用ＩＧＦ－Ｉ可诱导ＨＣＥ１６／３细胞停泊不依赖性生长。ＲＴ－ＰＣＲ显示ＩＧＦ－Ｉ并不明显改变ＨＣＥ１６／３细胞病毒早期基因的表达。结论ＩＧＦ－Ｉ是ＨＣＥ１６／３细胞生长的弱调节剂。

人食管癌细胞系中缺失的新基因片段在食管癌发生中的可能意义

目的寻找食管癌的抑癌基因，揭示食管癌的遗传易感性和癌变原理。方法采用Ｓｏｕ－ｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ方法，检测食管癌细胞系中缺失的三个ＤＮＡ片段（１２Ｈ２、３３Ｂ２和３３Ｂ３），在２０例食管癌组织和相应的癌旁组织及三个高危家族成员外周血中的缺失情况。结果在癌和癌旁组织标本中，１２Ｈ２的缺失频率最高，癌组织为６１．１％，癌旁组织为２２．２％，淋巴结转移阳性率为４５．４％；３３Ｂ２分别为３０．０％、１０．０％和５０．０％；３３Ｂ３分别为２０．０％、１０．０％和２５．０％。１２Ｈ２和３３Ｂ３在三个高危家族中未发现种系改变和先证者的体细胞纯合缺失。３３Ｂ２在一个家系的先证者中存在体细胞纯合缺失，但未发现种系改变。结论１２Ｈ２、３３Ｂ２和３３Ｂ３可能为新的食管癌候选抑癌基因，且与食管癌的进展和转移相关。

人胰腺癌组织3、5、7、9和18号染色体部分位点的杂合性丢失

目的了解人胰腺癌组织３、５、７、９和１８号染色体部分位点的杂合性丢失的状况。方法选择来自３、５、７、９和１８号染色体不同位置的９对多态性引物，对４５例胰腺癌存档石蜡标本经显微镜下剥离后，以ＰＣＲ－ＳＳＬＰ－银染法检测胰腺癌中这些位点的杂合性丢失。结果胰腺癌组织在１８ｑ２１．１、３ｐ１４．２、３ｐ２１．１和９ｑ２２－３１等处存在较高频率的杂合性丢失。