造血干细胞联合骨髓间充质干细胞移植实验效果观察

目的：对骨髓问充质干细胞（MSC）在造血干细胞移植后造血重建中的作用进行探讨。方法：分离培养水囊引产4～5个月龄胎儿来源的骨髓MSC和脐血CD34^＋造血干／祖细胞（HSC），作为供体细胞。23只重症联合免疫缺陷（scm）小鼠作为受体，随机分成4组，^137Cs全身照射350cGy后，在4h内从尾静脉输入供体细胞。①阴性对照组：5只，不输入任何细胞。②阳性对照组：6只，单纯输入HSC5×10^6ml^-1。③实验Ⅰ组：6只，输入HSC5×10^6ml^-1和MSC5×10^6ml^-1。④实验Ⅱ组：6只，输入HSC5×10^6ml^-1和MSC5×10^6ml^-1输注后观察各组小鼠的存活情况；每周计数外周血单个核细胞（MNC）总数；移植后第7周，PCR检测外周血人体细胞DNA，并用流式细胞仪测定供体骨髓人源细胞嵌合比例。结果：阴性和阳性对照组小鼠均于10d内死亡，骨髓病理切片提示小鼠死于骨髓衰竭。实验Ⅰ、Ⅱ组小鼠均保持良好的生存状态，皮肤黏膜无溃烂、出血，毛发无缺损。实验Ⅰ、Ⅱ组外周血象逐渐回升，第3周，实验Ⅱ组外周血MNC数量（2．63±0．32）×10^9L^-1，高于实验Ⅰ组的（1．33±0．21）×10^9L^-1（P〈0．01），第5周即恢复正常水平。第7周，实验Ⅰ、Ⅱ组小鼠外周血均检测出供体细胞；实验Ⅱ组人源细胞嵌合比例为（7．41±0．79）％，高于实验Ⅰ组（5．11±0．07）％（P〈0．05）。结论：SCID小鼠致死剂量照射后．联合输入HSC和MSC可明显促进造血干细胞移植后造血重建，且不增加移植物抗宿主病的发生率。