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RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α对人乳腺癌细胞功能的影响
被引量:
4
1
作者
王晗
刘拥军
+3 位作者
韩之波
梁琳慧
吕璐璐
韩忠朝
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期670-674,共5页
目的研究靶向针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的短发夹RNA(shRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞功能的影响。方法氯化钴模拟低氧环境。采用RNA干扰技术,构建针对HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染MCF-7细胞。RT-PCR检测RNA干扰后MCF-7中血管...
目的研究靶向针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的短发夹RNA(shRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞功能的影响。方法氯化钴模拟低氧环境。采用RNA干扰技术,构建针对HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染MCF-7细胞。RT-PCR检测RNA干扰后MCF-7中血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。实时定量PCR和Westernblot技术分别检测HIF-1αmRNA和蛋白质水平。Sub-G1测定、AnnexinⅤ荧光标记和DNAladder检测细胞凋亡。流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果缺氧后,MCF-7中的HIF-1α表达增加(P<0.01),而凋亡率较常氧降低(P<0.05)。shRNA转染MCF-7后,HIF-1α的表达下调91.63%(P<0.01)。阿糖胞苷诱导或无凋亡诱导剂时,干扰组凋亡率比未转染组分别增高1.75倍(P<0.01)和61.31倍(P<0.01)。与未转染组相比,干扰组中的VEGF下调66.8%(P<0.05)。干扰组细胞周期进程也较未转染组减缓。结论HIF-1α在MCF-7中发挥抗细胞凋亡的作用。本室构建的针对HIF-1α的shRNA能够促进MCF-7凋亡,下调VEGF表达,推迟细胞周期。
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关键词
缺氧诱导因子-1Α
短发夹RNA
人乳腺癌细胞系
细胞凋亡
血管内皮生长因子
细胞周期
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职称材料
题名
RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α对人乳腺癌细胞功能的影响
被引量:
4
1
作者
王晗
刘拥军
韩之波
梁琳慧
吕璐璐
韩忠朝
机构
中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所泰达生命科技研究中心
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期670-674,共5页
基金
国家自然科学基金(30300186
30570905)
天津市自然科学基金(043607211)~~
文摘
目的研究靶向针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的短发夹RNA(shRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞功能的影响。方法氯化钴模拟低氧环境。采用RNA干扰技术,构建针对HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染MCF-7细胞。RT-PCR检测RNA干扰后MCF-7中血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。实时定量PCR和Westernblot技术分别检测HIF-1αmRNA和蛋白质水平。Sub-G1测定、AnnexinⅤ荧光标记和DNAladder检测细胞凋亡。流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果缺氧后,MCF-7中的HIF-1α表达增加(P<0.01),而凋亡率较常氧降低(P<0.05)。shRNA转染MCF-7后,HIF-1α的表达下调91.63%(P<0.01)。阿糖胞苷诱导或无凋亡诱导剂时,干扰组凋亡率比未转染组分别增高1.75倍(P<0.01)和61.31倍(P<0.01)。与未转染组相比,干扰组中的VEGF下调66.8%(P<0.05)。干扰组细胞周期进程也较未转染组减缓。结论HIF-1α在MCF-7中发挥抗细胞凋亡的作用。本室构建的针对HIF-1α的shRNA能够促进MCF-7凋亡,下调VEGF表达,推迟细胞周期。
关键词
缺氧诱导因子-1Α
短发夹RNA
人乳腺癌细胞系
细胞凋亡
血管内皮生长因子
细胞周期
Keywords
hypoxia-inducible factor-1α
short hairpin RNA
human breast carcinoma cell line
cell apoptosis
vascular endothelial growth factor
cell cycle
分类号
R738 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α对人乳腺癌细胞功能的影响
王晗
刘拥军
韩之波
梁琳慧
吕璐璐
韩忠朝
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
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