组织工程血管种子细胞的培养

目的:为构建组织工程血管提供种子细胞。方法:全麻下取兔的主动脉,分别采用酶消化法和组织块贴壁法培养血管内皮细胞和平滑肌细胞,并传代、免疫组化鉴定及倒置显微镜下形态学观察。结果:成功地培养出血管内皮细胞和平滑肌细胞并传代。倒置显微镜下血管内皮细胞呈“鹅卵石”形态,平滑肌细胞呈典型的“峰-谷”状。免疫组化鉴定内皮细胞Ⅷ因子(+),平滑肌细胞α-肌动蛋白(+)。结论:所培养的血管内皮细胞和平滑肌细胞为研究组织工程血管提供了细胞来源。

N-乙酰-L-半胱氨酸对供者肺的保护作用

目的 观察在离体肺再灌注期间应用核转录因子 κB(NF- κB)抑制剂 N-乙酰 - L-半胱氨酸 (NAC)对大鼠供者肺的保护作用。 方法 2 4只 SD大鼠按完全随机方法分成实验组和对照组。 12只大鼠供者肺用低钾右旋糖酐(L PD)液灌洗后于 4℃保存 16小时 ,建立离体肺再灌注模型 ,实验组在灌注期间应用 NAC;对照组应用生理盐水 ,循环灌注 1小时。再灌注期间每隔 15分钟测定供者肺氧合后动脉血氧分压 (Pa O2 )、气道峰压 (Paw P) ,再灌注后测定肺组织湿干比 (W/ D) ,髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,分别用免疫组化和逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)方法测定肺组织NF- κB、细胞间黏附分子 1(ICAM- 1)的蛋白和信使核糖核酸 (m RNA)的表达。 结果 再灌注 6 0分钟后实验组 Pa O2降低和 Paw P升高程度明显低于对照组 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;再灌注后 ,与对照组比较实验组 W/ D、MPO明显降低 (P<0 .0 1) ;NF- κB、ICAM- 1的蛋白和 m RNA表达明显减少 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。 结论 再灌注期间应用NAC能有效地抑制 NF-κB和 ICAM- 1的表达 。

乌司他丁对供体肺的保护作用

目的:观察乌司他丁对长时间低温保存的供体肺的保护作用。方法:实验于2004-10/2005-03在北京阜外心血管病医院完成。①选取健康15周龄SD大鼠36只,随机分为空白对照组、乌司他丁0.5万u/kg组、乌司他丁1.0万u/kg组,12只/组,每组均取6只作为肺移植的供体鼠和受体鼠。②空白对照组大鼠供肺经低钾右旋糖苷液灌洗后,4℃冷冻保存18h后静脉血再灌注1h;乌司他丁0.5,1.0万u/kg组大鼠供肺经低钾右旋糖苷液灌洗后,再灌注静脉血中分别加入乌司他丁0.5,1.0万u/kg,余同空白对照组。③各组供体鼠腹腔麻醉后摘取供肺,4℃经肺动脉插管灌注低钾右旋糖苷液30mL,灌注高度25cmH2O。④各组受体鼠于再灌注20min前,麻醉后游离左总颈静脉,插入颈静脉插管与相应的循环管道连接。游离左侧颈总动脉,插入颈动脉插管与预充好的循环管道连接。游离左股动脉,插入入股动脉插管并连接动脉测压管测压。⑤于供体肺循环灌注1,15,30,45,60min测定供肺静脉流出血氧分压、平均肺动脉压、气道峰压;灌注结束后测定肺组织湿干比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性、白细胞介素8的含量。结果:实验选取大鼠36只,作为受体的18只(每组各6只)进入结果分析。①供体肺再灌注过程中各时段氧合血氧分压、平均肺动脉压、气道峰压的变化:与空白对照组比较,乌司他丁0.5,1.0万u/kg组供体肺灌注30,45,60min时氧分压均明显升高(P<0.01),平均肺动脉压和气道峰压均明显降低(P<0.01或0.05);与乌司他丁0.5万u/kg组比较,乌司他丁1.0万u/kg组供体肺灌注45,60min时氧分压均明显升高(P<0.05),平均肺动脉压和气道峰压均明显降低(P<0.01或0.05)。②再灌注后肺组织湿干比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性、白细胞介素8含量的变化:与空白对照组比较,乌司他丁0.5,1.0万u/kg组供体肺再灌注后湿干比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性、白细胞介素8含量均明显降低(P<0.01);与乌司他丁0.5万u/kg组比较,乌司他丁1.0万u/kg组供体肺再灌注后以上各指标亦均有所降低(P<0.01或0.05)。结论:于灌洗液中及再灌注时应用乌司他丁,可以减轻供肺的缺血再灌注损伤,改善供肺功能,其保护作用与给药剂量具有明显的量效关系,1.0万u/kg保护效果较佳。

扩张压力对兔颈外静脉移植物再狭窄的影响

目的 研究不同扩张压力对兔颈外静脉内皮完整性及颈外静脉桥再狭窄的影响。方法 1 8只NZW兔 ,随机分为A、B、C组。每组兔颈外静脉分别以 50、1 0 0和 2 0 0mmHg(1mmHg=0 .1 33kPa)扩张 ,静脉内银染铺片法和扫描电镜进行内皮完整性评分。扩张后行颈外静脉颈总动脉移植 ,2 8d后测定静脉桥管腔面积和内膜厚度。结果 A组内皮完整性评分 (1 .42 )显著低于B组 (2 .67,P <0 .0 1 )和C组 (3 .83 ,P <0 .0 1 )。A组的静脉桥的管腔面积 (1 1 .3± 2 .0 )mm2 显著大于B组 [(6 .0± 1 .7)mm2 ,P =0 .0 0 1 ]和C组 [(4.5± 1 .2 )mm2 ,P <0 .0 0 1 ] ;A组的静脉桥的内膜厚度 (36 .2± 3 .4) μm显著小于B组 [(52 .3± 7.7) μm ,P =0 .0 0 1 ]和C组 [(53 .1± 5 .8) μm ,P <0 .0 0 1 ]。结论 50mmHg的扩张压力引起的兔颈外静脉桥再狭窄的程度明显轻于 1 0 0mmHg和2 0 0mmHg。