血管紧张素转换酶的固相化与性质

目的为从天然肽类混合物中分离血管紧张素转换酶（ angiotensin converting enzyme, ACE）抑制活性物质，对固相化 ACE（固相酶）进行研究。方法在低水活度条件下利用苯甲磺酰氯活化 Sepharose CL- 4B凝胶侧链基团上的羟基，形成高反应活性的苯磺酰基团，通过与 ACE上的氨基反应将酶固定于琼脂糖凝胶。结果固相化 ACE的反应 pH范围较宽，最适反应 pH比溶液酶（自由酶）增加 0.6个单位，达到 8.8。分别在 pH9.0和 pH6.5条件下处理 24 h，固相酶活力保留 82％和 68％，溶液酶只剩下 64％和 39％。两种酶均在 50℃左右活力最大，温度继续升高溶液酶迅速失活。分别在 40℃和 50℃处理 2 h，固相酶剩余活力为 82％和 34％，溶液酶为 52％和完全失活。 20℃放置 1个月，固相酶剩余活力为 61％，而溶液酶只有 20％。结论 ACE固相酶在 pH和温度稳定性方面强于溶液酶。