基于代谢组学分析海分枝杆菌对巨噬细胞的影响

目的通过靶向代谢组学分析海分枝杆菌刺激巨噬细胞引起的能量代谢和氧化脂质代谢变化,为了解巨噬细胞抵御海分枝杆菌感染的免疫机制提供线索。方法从小鼠双侧股骨中获取小鼠骨髓来源巨噬细胞,培养后将其分为活菌组和灭活菌组;采用临床分离培养的海分枝杆菌制备菌悬液,活菌组加活海分枝杆菌刺激12 h,灭活菌组加灭活的海分枝杆菌刺激12 h。显微镜下观察两组细胞的形态并测量巨噬细胞长度。收集两组细胞的裂解液,利用液相色谱串联质谱法检测能量代谢物和氧化脂质代谢物。采用t检验比较组间巨噬细胞长度,采用主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析等筛选差异代谢物。结果镜下可以见活菌组巨噬细胞形成更多的肉芽肿样细胞聚集,灭活菌组巨噬细胞[(439.52±91.67)μm]较活菌组[(289.96±70.11)μm]更细长,差异有统计学意义(P<0.001)。巨噬细胞能量代谢和氧化脂质代谢的主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析均显示两组分离度好。能量代谢方面共发现12种差异代谢物,以氨基酸代谢变化最为显著,其中瓜氨酸的含量明显升高,亮氨酸和丝氨酸的含量下降。氧化脂质代谢方面共发现20种差异代谢物,以花生四烯酸代谢变化最为显著。结论相较于灭活菌,海分枝杆菌活菌刺激的巨噬细胞氨基酸代谢和花生四烯酸代谢发生改变,瓜氨酸代谢水平升高、亮氨酸和丝氨酸代谢水平降低、花生四烯酸类代谢水平改变。

分枝杆菌感染易感基因的研究进展

人致病性分枝杆菌主要有结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌和非结核分枝杆菌,是严重危害人类健康的病原微生物之一,其感染与宿主遗传背景关系密切.研究表明,宿主基因在分枝杆菌感染中起重要作用.近年来通过全基因组关联分析、人群候选基因研究、基于家庭连锁分析和罕见易感个体基因分析,发现和分枝杆菌感染易感相关的基因有IL12B、IL12RB1、IFNGR1、IFNGR2、TLRs、NOD2、MRC1、IRGM、NRAMP1、VDR及LTA4H等,研究这些基因为揭示分枝杆菌感染免疫机制提供可能,同时也为麻风和结核高危人群的筛查,预防提供理论依据.

结核感染T细胞检测在结核感染相关皮肤病的应用价值

结核病常用的实验室检测方法,包括抗酸染色涂片镜检、组织分离培养、组织病理、PCR检测等.结核感染T细胞检测是实验室检测结核病较新的辅助手段,属γ干扰素释放试验的一种,现已被越来越广泛地应用于临床.回顾结核感染T细胞检测的原理、特性及结核感染T细胞检测在诊断皮肤结核、探讨与结核感染相关的皮肤病的发病机制、药物治疗前评估潜伏结核激活的风险等方面的应用价值.