海南罗勒精油成分及其抗氧化作用评价

目的 分析海南罗勒精油成分并对其抗氧化能力进行评价。方法 采用水蒸气蒸馏法提取罗勒精油,利用气质联用(GC-MS)技术分析其主要成分,通过测定精油对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基的清除能力,并以FRAP值进行抗氧化能力评价。结果 共分析鉴定出27种化合物,其中萜烯类成分占精油总成分的78.24%,主要成分为反-3-苯基-2-丙烯酸甲酯(25.60%)、p-烯丙基茴香醚(23.43%)、β-芳樟醇(14.24%)等;自由基清除率最高可达59.10%,且FRAP值为313.50μmol/L。结论 海南罗勒精油具有较好的抗氧化活性。

虫害诱导植物合成防御性次生代谢产物的研究进展

昆虫对植物的取食活动可以激活植物的防御反应,诱导植物通过调控自身的代谢网络合成防御性次生代谢产物,抵御外界不良刺激。虫害诱导植物合成防御性次生代谢产物及其机制研究已成为近年来的研究热点之一。现对虫害诱导的植物防御性次生代谢产物、昆虫危害产生的各类激发子、植物对激发子的识别、虫害应答相关的信号转导通路及其对次生代谢物质积累的调控进行了综述,可为虫害诱导植物合成防御性次生代谢产物的机制研究提供参考,为植物虫害防治研究、植物次生代谢物质的生产和利用提供理论依据。

世界各国(地区)沉香资源与保护

沉香是亚洲各国(地区)传统名贵药材及天然香料,瑞香科(Thymelaeaeeae)中的沉香属(Aquilaria)是其最主要的结香树种。随着沉香市场的发展及沉香属自然生存生境的破坏,属内大多数物种现已濒临灭绝。为了更好地保护以及开发利用该属资源,本文对世界上各个国家(地区)沉香属植物的野生分布及资源现状、人工种植现状、采集贸易和保护现状等方面进行了简要概述,并从可持续发展的角度出发,提出了保护与开发利用沉香资源的一些建议。

正交试验法探讨实验室提取沉香挥发油的最佳条件

用正交试验法对沉香挥发油的提取工艺条件进行优选,以挥发油得率和乳化比值为指标,考察影响挥发油收率的因素并得出最佳提取工艺。结果发现沉香挥发油的最佳提取工艺为药材粉碎成粗粉过10目筛,加入6倍量的水、浸泡8 h、提取8 h。此提取工艺适合实验室及小批量生产。

薰衣草挥发油香薰吸入给药助睡眠作用及机制探究

目的探讨薰衣草挥发油吸入助睡眠作用及其作用机制。方法实验动物随机分为空白对照组、氯苯丙氨酸模型组(300 mg·kg^(-1))、地西泮对照组(2.5 mg·kg^(-1))及薰衣草挥发油低剂量组(4μL)、中剂量组(8μL)、高剂量组(16μL);采用自制熏香仪加热熏香给药,1次·d^(-1),1 h/次,连续7 d。观察熏香吸入后小鼠行为学变化并进行评价;同时采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定动物脑内海马区谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABAA)、五羟色胺(5-HT)以及腺苷(AD)等神经递质水平,并对GABAA/Glu值进行评估;采用免疫印迹法(Western blot)检测熏香对谷氨酸受体(GluR1)及囊泡谷氨酸转运蛋白(VGluT1)表达的影响。结果薰衣草挥发油各组熏香吸入均可显著提高失眠模型小鼠入睡效率和时长(P<0.05,P<0.01);熏香中剂量组可显著减少失眠模型小鼠活动路程且增加静止时间(P<0.05,P<0.01),熏香高剂量组可减少失眠模型小鼠活动路程和运动速度(P<0.05,P<0.01),且增加静止时间(P<0.01);可显著升高Glu、GABAA、5-HT及AD的递质水平(P<0.05或P<0.01),同时上调GABAA与Glu的比值(P<0.05或P<0.01);可显著升高海马组织中GluR1及VGluT1相关蛋白的表达。结论薰衣草挥发油熏香吸入具有助睡眠的作用,作用机制可能与调控神经递质的分泌、GABAA/Glu分泌平衡以及影响Glu合成代谢和转运有关。

白木香种子质量分级标准研究

目的:确定白木香种子的质量分级标准。方法:对不同产地36个批次的白木香种子样本进行分选,测定净度、千粒重、含水量、生活力、发芽率等指标,通过SPSS软件对以上数据进行逐步聚类分析,确定白木香种子质量分级标准。结果:白木香种子被分为2个等级,其中达到二级及以上标准的种子认定为合格种子。其中,种子含水量、发芽率、生活力和千粒重为影响白木香种子质量的主要因素,其余指标作为参考指标。结论:建立了白木香种子的分级质量标准。

中国沉香科技创新与产业发展的现状及思考

沉香为我国名贵中药和香料。中国沉香产业既是传统产业也是可培育为千亿元的新兴产业,市场潜力巨大,但目前仍处于初级发展阶段。本文从科学技术创新的角度阐述了中国沉香产业的发展现状和取得的成绩,分析了中国沉香科技和产业发展存在的问题,在此基础上提出几点发展思路,为中国沉香产业发展提供参考。

通体结香技术产沉香的提取物灌胃KM小鼠的急性毒性研究

目的:考察KM小鼠灌胃给药接受过量通体结香技术产沉香的提取物后可能出现的急性毒性反应。方法:采用"最大给药量法"进行试验灌胃给予小鼠通体结香技术产沉香的提取物,观察记录小鼠的中毒症状及死亡情况,并于14 d后剖检小鼠观察其主要脏器。结果:以40 g·kg-1剂量给药后,小鼠均未产生明显的毒性症状,其体重与阴性对照组小鼠体重比较无显著差异(P>0.05),且大体剖检生命脏器未见异常。结论:通体结香技术产沉香的提取物对KM小鼠无明显毒性。可认为成人以临床常用剂量服用通体结香技术产沉香药材安全可行。

22个白木香倍半萜合酶(AsTPS)基因的健康与伤害诱导表达特性研究

目的:明确22个As TPS基因在健康和伤害白木香中的表达情况,筛选出催化沉香倍半萜合成的关键酶基因。方法:全断法伤害处理白木香,常规PCR和荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达情况。结果:22个As-TPS基因中,1个基因在健康和伤害白木香中均不表达;3个基因在健康白木香中不表达,但明显响应于外界伤害;18个基因在健康白木香中均有一定量表达,而伤害处理后,其中7个基因相对表达量达数千倍,11个基因虽也被诱导表达,但相对表达量仅达几十倍至几百倍。结论:21个As-TPS基因为伤害诱导型基因,其中3个是沉香倍半萜合成的关键催化酶基因;在伤害诱导后含量急剧表达上升的7个As-TPS是白木香伤害诱导结香早期倍半萜合成的重要催化酶。

44批次不同来源国产沉香药材松香酸类物质的检测

目的:考察不同来源的44批次沉香药材含松香酸类物质情况,为沉香药材正确使用提供依据。方法:建立超高效液相色谱法,并结合乙酸铜化学显色反应和薄层色谱法对沉香药材中松香酸类物质进行鉴别分析。结果:44批次不同来源的沉香样品中,药材市场所售10批次沉香药材中松香酸类物质检出率达40%;其余34批次沉香药材(包括19批次通体结香技术产沉香,5批次火烙法产沉香和10批次野生沉香)均未检出松香酸类物质。结论:采用通体结香技术等方法产的沉香药材和野生沉香不含松香酸类物质,但药材市场所售沉香药材有掺入松香酸类物质的现象。

植物microRNA功能瞬时验证体系的建立

目的:建立植物microRNA(miRNA)功能的瞬时活体验证体系,并检验该体系的有效性。方法:选用双元表达载体pCAMBIA1200,并插入烟草花叶病毒双35S启动子,以驱动目标miRNA超表达;选用双元表达载体pFGC5941的绿色荧光蛋白(GFP)改造载体用于潜在的靶基因与GFP融合蛋白的超表达,以转入这2种载体的农杆菌侵染烟草叶片,观察GFP融合蛋白的荧光,作为验证miRNA对其潜在靶基因调控作用的瞬时验证体系。选取拟南芥已知功能的miR393及其靶基因AFB3,分别构建pCAMBIA1200-35S-miR393和pFGC5941-GFP-AFB3载体,利用农杆菌注射烟草叶片进行2个载体共转化,并以pFGC5941-GFP-AFB3单转化作为对照,激光共聚焦显微镜下观察融合蛋白的表达。结果:只将AFB3导入烟草表皮细胞,可观察到绿色荧光;而将miR393与AFB3同时导入烟草表皮细胞后,未能观察到绿色荧光。表明miR393抑制了AFB3的表达。结论:本瞬时表达体系可作为植物miRNA功能的活体瞬时验证体系,为miRNA调控靶基因表达功能提供简单、快速、有效的证据。

8种生物农药对温郁金叶枯病病原菌的室内毒力测定

为了筛选出有效防治温郁金弯孢霉叶枯病的药剂,采用菌丝生长速率法测定8种生物农药对温郁金弯孢霉叶枯病病原菌(Curvularia clavata)的抑菌效果。8种生物农药对温郁金叶枯病病原菌抑菌效果好的为0.5%氨基寡糖素AS、3%中生菌WP、荧光假单胞杆菌WP和枯草芽孢杆菌WP。毒力最强为荧光假单胞杆菌WP,EC50值为0.93 mg/L;其次为哈茨木霉菌WP、枯草芽孢杆菌WP、0.5%氨基寡糖素AS和3%中生菌素WP,EC50分别为1.30、3.27、6.14、8.42 mg/L。荧光假单胞杆菌、0.5%氨基寡糖素AS、枯草芽孢杆菌和3%中生菌素WP均可有效抑制温郁金叶枯病病原菌的生长,可进一步用于田间试验。

沉香醇提物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:探讨沉香醇提物对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:采用CCl4腹腔注射制备小鼠急性肝损伤模型,给药处理后计算肝脏指数;检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性;肝组织匀浆液中髓过氧化物酶(MPO)、一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD);肝脏进行病理切片观察;酶联免疫法(ELISA)检测血清中白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)的表达水平。结果:与模型组相比,通体沉香醇提物能剂量依赖性显著降低血清ALT、AST活性,降低MPO活性、NO含量,提高T-AOC能力及SOD活性;缓解肝脏组织病理损伤;减低IL-1β和升高IL-10的表达水平,且通体沉香醇提物高剂量效果最好,优于等剂量的野生沉香和火烙沉香醇提物。结论:沉香醇提物对肝损伤有保护作用,其机制可能与抗氧化应激,抑制脂质过氧化及抗炎作用有关。

不同施肥与灌水量对槟榔土壤氨挥发的影响

利用通气法田间原位试验,研究了不同施肥模式、灌溉量对槟榔土壤氨挥发速率和挥发量的影响。结果表明:槟榔恢复期和出花期追肥灌水后,不同施肥处理均在第3天出现氨挥发速率峰值(0.50—3.42 kg·hm-·2d-1),而后迅速下降并进入低挥发阶段。出花期氨挥发速率峰值(1.50—4.42 kg·hm-·2d-1)比恢复期氨挥发速率峰值明显高。灌水量小(300 m3/hm2)的氨挥发率和总量比灌水量大(600 m3/hm2)的明显减小。在同一氮水平下,有机质含量较低的氨挥发率较高。在同一有机质含量条件,氨挥发率随着N肥含量增加而升高。与单施N肥处理相比,有机肥与N肥配施可明显减少氨挥发速率和总量,可减少氮损失。

拟层孔菌(Fomitopsis sp.)促进沉香的形成及其生物学特性

目的:为了获得促进白木香(Aquilaria sinensis)形成沉香的真菌及其生物学特性。方法:采用PDA培养基分离并纯化真菌及菌液接种到白木香树进行功能验证。形态学特征结合ITS序列进行真菌鉴定和平板培养法测定真菌生物学特性。结果:分离到1株真菌ASAF01,其菌液输到白木香6个月后能促进沉香的形成。ASAF01鉴定为拟层孔菌(Fomitopsis sp.),属于拟层孔菌属(Fomitopsis),拟层孔菌科(Fomitopsidaceae),多孔菌目(Polyporales),伞菌纲(Agaricomycetes),担子菌门(Basidiomycota),其菌最适在马铃薯葡萄糖培养基上生长,最适温度是35℃,最适p H值为7,最适碳源和氮源为可溶性淀粉和酵母浸膏。结论:拟层孔菌(Fomitopsis sp.)ASAF01能促进白木香结香。

虫漏沉香的基本特征及其品质评价

目的:明确虫漏沉香的基本特征和品质特征。方法:调查野外虫蛀产生的虫漏沉香,并用分子方法鉴定虫源;收集市场上典型的虫漏沉香,进行感官特征、显微特征、醇浸物含量、沉香四醇含量及挥发油成分的测定和分析。结果:野外采集的虫漏沉香虫源鉴定出天牛科Cerambycidae眼花天牛属Acmaeops和木蠹蛾科Cossidae豹蠹蛾属Zeuzera的昆虫;市售虫漏沉香具有独特虫道特征,易于辨认,有明显的甘甜和清凉香味,木间韧皮部和木射线填充油脂;醇浸物含量相对较高,最高达38.35%,但沉香四醇含量相对较低,且不与醇浸出物呈正向关系;相对通体香和板头香,虫漏沉香具有G-cadinene、Guaia-3,9-diene或Costunolide等独特挥发油成分,但不同虫漏沉香之间挥发性成分种类差异较大。结论:本文首次报道了虫漏沉香可由天牛、木蠹蛾、白蚁等昆虫伤害形成,鉴定了二类可产生虫漏沉香的蛀干昆虫;首次报道虫漏沉香具有的感官特征、显微特征和化学成分特征,明确了虫漏沉香化学成分有其独特性。

白木香AsMAPK3基因的克隆及表达分析

目的:克隆白木香中分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)基因,检测其组织表达及诱导表达特性。方法:在454高通量测序获得部分c DNA序列基础上,利用RACE方法获得全长cDNA。采用NCBI在线Blastp、DNAman和MEGA4软件,对序列进行生物信息学分析。随后,通过荧光定量PCR检测目的基因的组织表达及诱导表达特性。结果:扩增到了白木香中分裂原活化蛋白激酶基因AsMAPK3,并对其进行了生物信息学分析和表达特性分析。结论:通过As MAPK3的克隆及分析,为后续验证其生物学功能奠定了基础。

植物中转录抑制机制的研究进展

基因表达的激活和抑制是构成生机盎然、绚烂多彩的植物世界的核心机制。转录调控是基因表达至关重要的环节,其中转录抑制是通过阻碍目的基因的活化来实现基因转录负调控的。目前的研究已揭示出了多种植物基因转录激活的分子调控机制,但转录抑制方面的内容还相对较少。本文将从转录前起始复合物、染色质修饰重构、蛋白磷酸化、转录抑制子等几方面的调控作用着眼,概述在植物生长发育及胁迫防御过程中植物基因转录抑制的研究进展,重点阐述转录抑制子的抑制与解除作用,为进一步解读此调控"密码"提供参考依据,并为我们深入了解基因表达调控,特别是植物防御反应的分子机制提供参考。

促进沉香形成真菌ASAF05的分离、筛选和鉴定

目的为了获得促进白木香(Aquilaria sinensis)高效形成沉香的真菌,本实验对白木香中的真菌进行分离、筛选及鉴定。方法采用PDA培养基分离并纯化菌株,真菌菌液接种到白木香树进行功能验证,通过形态学特征结合ITS序列分析进行真菌鉴定。结果分离到1株真菌ASAF05,其菌液输到白木香6个月后能促进沉香的形成。ASAF05鉴定为条纹拟盘多毛孢(Pestalotiopsis virgatula),属于拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis),黑盘孢科(Melanconiaceae),黑盘孢目(Melanconiales),腔胞纲(Coelomycetes),半知菌亚门(Deuteromycotina)。结论首次报道条纹拟盘多毛孢(P.virgatula)能促进白木香结香。