氢氧化铝佐剂吸附肠道病毒71型灭活病毒的特性

目的探讨氢氧化铝佐剂吸附肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活病毒的特性。方法采用透射电镜、凝胶排阻层析高效液相色谱(size exclusion chromatography HPLC,SEC-HPLC)及动态光散射(dynamic light scatter,DLS)技术分析灭活EV71颗粒的形态、纯度及粒径分布,并以透射电镜观察氢氧化铝佐剂纳米颗粒形态。以灭活EV71抗原含量(4000、6000、8000、10000、11000、12000、13000、14000、20000、30000 U/mL)、氢氧化铝佐剂浓度[0.35、0.25、0.17、0.085 mg/mL(按铝含量计)]、吸附时间(0、30及120 min)、离子强度(NaCl浓度0.15、0.75和1.25 mol/L)及磷铝摩尔比(P/Al,0.15、0.64、2.08及7.87)为变量,考察氢氧化铝佐剂吸附灭活EV71抗原后所呈现的吸附特性。结果灭活EV71颗粒主要以完整的病毒颗粒形式存在,直径约30 nm;氢氧化铝佐剂具有纳米化的特征,粒径分布在200~700 nm之间。≤11000 U/mL浓度的灭活EV71抗原可被0.35 mg/mL(按铝含量计)的氢氧化铝佐剂完全吸附,上清中未检测到游离抗原,从12000 U/mL起,随抗原量的增加,上清中游离抗原含量也增加;各浓度氢氧化铝佐剂能完全吸附250 U/mL的灭活EV71抗原,上清中未检测到游离抗原,不同孵育时间的吸附效果一致。在单剂量疫苗氢氧化铝含量(0.35 mg/mL,按铝含量计)及灭活EV71抗原含量(250 U/mL)条件下,NaCl离子强度对灭活EV71吸附无影响,而磷酸离子浓度明显影响吸附。结论单剂量疫苗中的氢氧化铝佐剂可完全吸附灭活EV71抗原,基团置换在其中发挥了重要作用。