HPV E2、E5致癌机制及相关疫苗研究进展

宫颈癌是影响女性的常见恶性肿瘤之一,其中高危型HPV的持续感染是导致宫颈癌的主要病因。在宫颈癌的发生发展过程中,除了HPV E6、E7与宫颈癌病变有主要的关系外,其他一些早期蛋白如E2、E5也发挥了重要的作用。如E2可以启动并维持病毒的复制,而E5可以与E6、E7癌蛋白合作,促进感染细胞增殖。本研究仅就HPV E2、E5在宫颈癌发生发展中的机制以及相关的治疗性疫苗研究进展进行综述。

人乳头瘤病毒16型E6和E7细胞毒性T淋巴细胞表位的预测与筛选

目的以人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6和E7癌蛋白为靶抗原,通过生物信息学方法及小鼠体内实验,筛选出能被人与鼠主要组织相容性复合体(MHC)共呈递的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)优势表位。方法在美国国家生物技术信息中心(NCBI)网站上获取HPV16 E6和E7的参考蛋白序列,通过免疫表位数据库(IEDB)网站中的MHC-Ⅰ加工和MHC-Ⅰ结合方法,预测出人类白细胞抗原(HLA)-A*02:01、HLA-A*11:01、HLA-A*24:02限制性和C57BL/6小鼠H-2b限制性的CTL表位,根据评分筛选出两者共同呈递的CTL表位。同时,构建表达HPV16 E6和E7的DNA疫苗(pVAX1-E6E7Com),免疫小鼠后分离脾淋巴细胞,以预测得到的CTL表位作为抗原,与小鼠脾淋巴细胞共培养40 h后,通过酶联免疫斑点法来评估各CTL表位诱导的特异性T细胞免疫应答的能力。所有实验数据均通过单因素方差分析和Dunnett t检验进行组间比较。结果预测筛选获得10条人鼠共呈递的抗原肽。酶联免疫斑点法检测结果表明,实验组的每种表位均能诱导小鼠淋巴细胞产生特异性免疫应答,与阳性参考肽(E7-^(49)RAHYNIVTF^(57))相比,实验组中每种表位差异均无统计学意义(均P>0.05),其中E6-^(38)VYCKQQLL^(45)(175.60±52.88)、E6-^(49)VYDFAFRDL^(57)(202.20±108.50)、E6-^(86)YCYSLYGTTL^(95)(157.00±44.46)和E7-^(77)RTLEDLLMGTL^(87)(162.20±49.35)激发的特异性斑点数比阳性参考肽E7-^(49)RAHYNIVTF^(57)(156.20±97.40)的斑点数量多。结论通过这种生物信息学方法预测和筛选得到的10个CTL表位均具有一定的免疫原性,可作为HPV16型治疗性疫苗的优势候选表位。