包膜病毒膜融合及其在生物医学中的应用

病毒结合到宿主细胞表面受体后,启动了病毒融合蛋白的一系列构象变化,暴露出融合肽,使病毒包膜和细胞膜融合.膜融合使病毒蛋白及病毒RNA基因组释放到宿主细胞内而感染宿主.针对包膜病毒进入细胞的分子机制设计抗病毒药物和疫苗,为防治疾病发生开辟了新的思路.

猕猴自体骨髓干细胞移植治疗急性肝损伤的实验研究

目的探讨自体骨髓干细胞肝门静脉移植对猕猴急性肝损伤的治疗作用和为人类肝损伤治疗提供依据和方法。方法猕猴10只,随机分为实验组和对照组,每日皮下注射40%CCL40.8ml/kg,连续注射4d,经肝功能生化指标检测及肝穿组织病理学观察确认肝损伤后,分离实验组猴的自体骨髓单个核细胞,按3×108细胞/kg将骨髓细胞植入肝门静脉,植入后60d进行肝功能相关指标检测及组织病理学观察。结果连续注射CCL44d后,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLOB)(P<0.001),而总蛋白(TP)和白蛋白含量无变化(P>0.05),肝组织结构紊乱,大量肝细胞坏死,部分细胞变性,水肿,汇管区及周围有大量炎性细胞浸润。骨髓细胞肝门静脉移植后60d,血清AST、ALT活性和GLOB、BIL含量显著低于对照组(P<0.05),而TP、ALB、LDL含量高于对照组(P<0.05),病理组织学观察结构清楚,而对照组有纤维增生和肝细胞有脂肪变性。结论自体骨髓细胞肝门静脉移植能对猕猴急性肝损伤有明显治疗作用,可改善急性肝损伤猕猴的肝功能及组织结构,提示该方法可能对人类急性肝损伤有一定治疗意义。

CCR2-64Ⅰ在中国南方14个少数民族群体中的分布

为调查HIV-1感染相关等位基因CCR2-64Ⅰ在我国南方14个少数民族群体的频率和多态性分布,从上述人群外周血中抽提基因组DNA,采用PCR和PCR-RFLP等方法进行基因分型。在791例调查对象中,636例是野生纯合子基因型,104例为杂合子基因型,51例为突变纯合子基因型。上述各群体等位基因型的分布符合Hardy-Weinberg平衡。14个民族群体的平均突变基因频率为13.6%,等位基因频率范围分布在1.6%～30.3%之间,14个民族群体之间突变基因频率具有显著差异（P〈0.05）。广西壮族群体CCR2-64Ⅰ突变基因频率最低,为1.6%,云南的六库傈僳族频率最高,为30.3%。12个群体的突变基因频率均低于中国汉族健康群体,南方3个少数民族群体基因突变频率显著低于西南11个少数民族群体,该突变基因在艾滋病发病过程中的影响值得进一步深入研究。

应用转基因小鼠作为脊髓灰质炎活疫苗神经毒力实验动物模型的研究

选用Ⅲ型脊髓灰质炎病毒 ,3批活疫苗样品 (WHO/Ⅲ ,参考疫苗 ;93/ 36 3和 3J 2批猴体神经毒力实验不合格的疫苗 )和 1株标准强毒株 (Leon) ,脊髓内注入携带有人细胞脊髓灰质炎病毒受体基因的转基因小鼠 (PVRTg2 1)。临床观察和组织病理学检查表明 ,Leon病毒的毒力极强 ,2 .0LogTCID50 可使 10 0 %小鼠麻痹和死亡。WHO/Ⅲ参考疫苗毒力最弱 ,5 .5LogTCID50 才能使 81.7%小鼠麻痹和 5 1.7%小鼠死亡。另 2种疫苗样品的毒力都高于参考制品。各项观察指标随毒力的不同而有明显差别 ,与猴体神经毒力实验结果一致。证明PVRTg2 1小鼠可以用作评价脊髓灰质炎活疫苗毒力试验的动物模型 。

鲍特菌属基因组比较研究进展

鲍特菌属的百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌和支气管炎败血鲍特菌都是引起哺乳动物呼吸道感染的病原菌,宿主范围各不相同.本文从基因组一般结构、插入序列元件和菌种进化、菌种的特有基因和宿主范围限制、重要毒力因子等4个方面对三者进行了比较分析.

猕猴自体骨髓CD133^+细胞肝门静脉移植治疗肝损伤的实验研究

目的探讨自体CD133+细胞肝门静脉移植对猕猴肝损伤的治疗意义,为人类肝损伤治疗提供新技术。方法猕猴每日皮下注射40%CCL40.5ml/kg复制肝损伤模型后连续饲喂高脂饲料,经肝功能生化指标检测及肝穿组织病理学观察确认肝损伤后,免疫磁珠法分离自体骨髓CD133+细胞,按3×105细胞/kg将细胞植入肝门静脉,植入后60d进行肝功能相关指标检测及组织病理学观察。结果连续注射CCL44d后,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLOB)均显著升高,而总蛋白(TP)和白蛋白含量无变化(P>0.05),肝组织结构紊乱,部分肝细胞水肿、变性和坏死,汇管区及周围有大量炎性细胞浸润。第二次肝门静脉细胞移植后30d,血清AST、ALT活性和GLOB、BIL含量显著低于对照组(P<0.05),而TP、ALB、LDL含量高于对照组(P<0.05),治疗组肝组织结构清楚,而对照组有部分纤维增生和肝细胞有脂肪变性。结论自体CD133+细胞肝门静脉移植能有效促进肝损伤修复和阻止猕猴肝损伤的发展,改善猕猴肝组织结构和功能。

rhbFGF研制及促冠状动脉血管新生作用时间的研究

目的 探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhb FGF)促冠状动脉血管新生的作用时间。方法 开胸结扎兔冠状动脉左前降支 (L AD) ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备 rhb FGF蛋白 ,将其直接四点注入兔缺血心肌内 ,通过病理切片观察缺血心肌内血管新生情况。结果 结扎 L AD后 6周及 12周 ,rhb FGF组与生理盐水对照组 (NS)病理切片 ,随机观察 10个高倍视野无平滑肌小血管计数分别为 6周 (W) :41.13± 10 .0 4,30 .33± 3.2 1,P<0 .0 1;12 W:5 0 .5 0± 9.2 0 ,32 .6 3± 7.2 5 ,P<0 .0 1;有平滑肌血管计数分别为 6 W:16 .2 5± 5 .2 3,10 .75± 4.2 5 ,P<0 .0 1;12 W:16 .88± 4.87,11.2 5± 5 .0 9,P<0 .0 1。结论 缺血心肌内注射 rhb FGF可促进冠状动脉血管侧支新生 ,其作用时间可能小于 12 W。

白细胞介素-18研究进展

白细胞介素１８（ＩＬ１８），是最近发现的一种新型免疫细胞调节因子，能显著刺激Ｔｈ１细胞产生ＩＦＮγ，所以最初命名为ＩＧＩＦ（ＩＦＮγｉｎｄｕｃｉｎｇｆａｃｔｏｒ）。它与ＩＬ１２有协同作用，却不互相依赖。此外，它还能增强ＮＫ细胞和ＦａｓＬ介导的细胞毒效应，能促进内毒素引发的肝损伤。在肿瘤。

rhbFGF基因及其蛋白对兔冠状动脉血管结构影响的对比研究

目的:探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)基因及其蛋白对免冠状动脉血管结构的影响。方法:66只实验兔随机分为心肌内注射基因组、心肌内注射蛋白组、心肌内注射生理盐水组及静脉内注射蛋白组。建立兔急性心肌梗死模型,缺血心肌内分别注射真核表达质粒pcDNA_3-bFGF、rhbFGF蛋白、生理盐水及静脉内注射rhbFGF蛋白,观察免冠状动脉血管结构的变化及血管重塑情况。结果:术后12周,心肌内注射基因组、心肌内注射蛋白组、心肌内注射生理盐水组及静脉内注射蛋白组平均管壁厚度分别为:(39.21±10.46)μm、(29.87±12.96)μm、(18.13±11.33)μm、(20.25±9.56)μm;管壁/管腔比值分别为0.35±0.12、0.33±0.14、0.24±0.09、0.25±0.09。结论:缺血心肌内注射rhbFGF基因及其蛋白均能引起免冠状动脉血管重塑,而基因的作用更显著,静脉内注射蛋白没有观察到明显的血管重塑。

KRAB锌指蛋白的研究进展

约有三分之一C2 H2 锌指蛋白的N端都含有KRAB结构域 ,该结构域在进化上极其保守 ,含有约 75个氨基酸 ,其中富含极性氨基酸 ,因而易于形成两个双亲性螺旋。该结构域已被证实是一个强有力的转录抑制结构域 ,但其介导的抑制作用需要它与TIF1β/KAP - 1/KAIP - 1结合。实验表明 ,结合了KRAB结构域针对特异靶基因的锌指蛋白 ,不仅可以抑制基因的表达 ,还可以降低病毒在细胞内的复制。因此 ,KRAB在调控基因表达和胞内抗病毒方面表现出极大的应用潜能。

人类白细胞抗原与HIV/AIDS相关的研究进展

HIV引起的AIDS严重威胁着人类的健康。近年来的研究表明,HLA抗原尤其是I类抗原的多态性与HIV/AIDS患者病情进展的状况有着明显的关联作用。在对AIDS的病原体HIV病毒的研究过程中,HLA分子与病毒的相互作用似乎是一个非常关键的要素。本文对目前HLA抗原与HIV相关的一些研究进展进行综合性的回顾,以期进一步加深人们对HIV病毒和人体自身免疫系统的了解,并促进人们更行而有效地对抗HIV/AIDS。

中国四个少数民族九个Y-STR位点基因频率和单倍型研究

目的通过对中国满族、维吾尔族、壮族、柯尔克孜族4个少数民族群体共117个男性样本9个Y-STR位点的多态性分析,得到其相关位点的多态信息。方法对所有样本的9个YSTR位点进行PCR扩增,产物在ABIPRISMTM377DNASequencer上进行电泳,结果用Genotyper2.0软件进行分型。计算基因频率、多样性、遗传距离。结果在这9个位点上满族有43个等位基因,32种单倍型;维吾尔族43个等位基因,33种单倍型;柯尔克孜族有31个等位基因,15种单倍型;壮族有34个等位基因,23种单倍型。其中满族和维吾尔族的遗传距离最小,仅为0.02530。而柯尔克孜族和壮族的遗传距离最大,达到了0.34590。结论4个民族均有较高的单倍型多样性。研究不同民族群体的遗传多样性对了解他们的起源、迁移以及相互关系有重要的意义。

猕猴肝纤维化模型建立与评价

目的:探讨灵长类动物肝纤维化模型制作方法,建立与人类肝纤维化更接近的动物肝纤维化模型.方法:猕猴10只,随机分为实验组和对照组,实验组每周皮下注射400mL/LCCl40.8mL/kg,连续10wk,同时辅以高脂饲料饲喂.注射CCl4后11wk,检测肝功相关的血清蛋白、血脂浓度及观察肝组织病理学变化.结果:实验组血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLO)、血清总胆固醇酯(TCH)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、血清胆红素(TBIL)、血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原含量与对照组相比均显著升高(2017.1±244.5nkat/Lvs550.1±72.8nkat/L,1978.6±237.0nkat/Lvs488.9±55.2nkat/L,47.7±5.4g/Lvs41.5±6.1g/L.4.2±0.5mmol/Lvs3.3±0.4mmol/L,1.1±0.2nmml/Lvs0.5±0.1mmol/L,1.9±0.3mmol/Lvs1.4±0.2mmol/L,9.5±1.2μmol/Lvs6.3±0.8μmol/L,419.3±42.1μg/Lvs68.4±8.2μg/L,274.6±32.2μg/Lvs39.4±4.5μg/L,269.7±18.2μg/Lvs103.7±12.3μg/L,P<0.01),而总蛋白(TP)和白蛋白含量降低与对照组相比显著降低(74.3±8.4g/Lvs84.3±7.7g/L,34±4.3g/Lvs41.7±4.8g/L,P<0.01).纤维化动物肝组织显示,肝小叶间纤维增生,部分纤维细胞向肝细胞间延伸.

重组人碱性成纤维细胞生长因子对缩小兔急性心肌梗死面积作用的观察

目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对缩小兔急性心肌梗死面积的作用。方法 :将 3 6只日本大耳白兔分为 2组 :①生理盐水对照组 (n =11) ,②rhbFGF组 (n =2 5 )。在无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备rhbFGF蛋白 ,将其直接 4点注入兔缺血心肌内 ,通过心肌酶学及心电图QRS积分观察rhbFGF对兔急性心肌梗死面积的影响。结果 :①血清心肌酶学观察 :2组左前降支结扎后 2 4h与基础值比较血清谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB同工酶、α 羟丁酸脱氢酶均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1) ,2组左前降支结扎后48h与基础值比较 ,除生理盐水组的谷草转氨酶和rhbFGF组的谷草转氨酶及乳酸脱氢酶同工酶外 ,其它均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1)。左前降支结扎后 48h ,rhbFGF组较生理盐水对照组乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶及肌酸激酶MB同工酶明显降低 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。生理盐水对照组乳酸脱氢酶同工酶 ,左前降支结扎后48h与左前降支结扎后 2 4h比较升高 ,而在rhbFGF组降低 ,均有显著性差异 (P <0 0 5 )。②心电图QRS积分 :左前降支结扎后 6周rhbFGF组QRS积分 (4 3 0± 0 95 )

猴脑血管缺血模型复制及骨髓间充质干细胞移植治疗

目的建立猕猴局灶性血管缺血性脑损伤模型,评价自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑损伤的疗效及临床治疗可行性。方法用导管介入法从股动脉将栓子输送至大脑中动脉使大脑中动脉分支动脉栓塞,诱发局灶性缺血性脑损伤,经CT扫描确认脑损伤及部位和行为学观察符合脑损伤要求。分离扩增自体骨髓间充质干细胞至第4代,于脑血管栓塞后30d,在CT引导下将4×108细胞/kg骨髓间充质干细胞移植到脑损伤部位,每月1次连续观察脑损伤面积及行为学变化。结果脑血管栓塞前造影明显可见左侧大脑中动脉血管树及其分支分布情况,栓塞后血管造影证实额颞区无血管显示,随后连续CT扫描见额颞叶区明显梗死灶,行为学观察可见血管栓塞对侧前后肢运动功能严重障碍。间充质干细胞移植后3个月可见脑损伤面积明显缩小,脑神经功能明显改善,半年后脑损伤面积进一步缩小,脑神经功能基本恢复正常。结论自体骨髓间充质干细胞移植有助于缺血性脑损伤结构修复和功能恢复。

实验性猕猴1型糖尿病模型的建立及评价

7～10岁健康猕猴15只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组5只,分别按照100、125、150mg/kg的剂量一次性静脉注射链脲菌素,连续观察血糖、血浆C肽和胰岛素浓度的动态变化,观察期15周.结果:与注射链脲菌素前比较,注射后1周,Ⅰ组猕猴血糖浓度明显升高,血浆C肽和胰岛素浓度显著下降(P＜0.01),随后趋于正常水平,而Ⅱ、Ⅲ组猕猴血糖浓度明显升高并在随后的时间内持续维持在高水平,血浆C肽和胰岛素浓度持续维持在低水平(P＜0.001),Ⅲ组动物至15周全部死亡.结论:按照125mg/kg的剂量一次性给猕猴静脉注射链脲菌素,可成功复制1型糖尿病动物模型,其维持高血糖和低胰岛素及C肽浓度至少15周.

猴B病毒PCR检测方法的建立

目的 建立检测猴血B病毒的PCR方法。方法 根据MakotoH报道的引物 ,用PCR方法直接扩增猴血B病毒及扩增经Vero细胞培养后的猴血B病毒 ,扩增产物连于pGEM T载体。结果 这四对引物可同时对猴血B病毒及经Vero细胞培养后的猴血B病毒进行扩增 ,扩增结果一致 ,对扩增片段克隆测序的结果证实 ,其与美国猴B病毒E2 4 90株同源性为 10 0 %。结论 建立了从血样中直接检测猴B病毒DNA的PCR方法。

日粮中添加苜草素对幼猴免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的影响

目的本实验通过在幼年恒河猴日粮中添加不同浓度的苜草素,对实验前后组间IgG、IgA、IgM进行比较分析。方法将15只人工饲养的健康幼年恒河猴随机分为3组:A组为对照组,饲喂基础日粮;B、C组在基础日粮中分别加入0.1%和0.2%的苜草素。饲喂两个月后检测15只恒河猴血液中IgG、IgA、IgM水平。结果A、B、C三组实验后IgG分别为644.8 mg±72.23 mg/dL7、56.4 mg±55.87 mg/dL、776.4 mg±193.84 mg/dL;IgA分别为12.41 mg±3.31 mg/dL1、7.2 mg±1.77 mg/dL、19.75 mg±0.72 mg/dL;IgM分别为42.66 mg±4.45 mg/dL6、5.58 mg±10.11 mg/dL、71.36 mg±10.62 mg/dL。结论B、C组实验后IgGI、gAI、gM水平明显高于A组(P<0.05),同时两组实验后IgG、IgA、IgM水平也明显高于实验前(P<0.05),实验后C组IgG、IgA、IgM水平明显高于其他两组(P<0.05),表明苜草素能有效提高猕猴免疫球蛋白水平,增强猕猴自身免疫力。