RGD序列多肽与不同肿瘤细胞结合特性研究

目的:通过体外细胞和动物体内研究期望获得不同肿瘤细胞整合素αvβ3受体表达的资料,以指导临床研究。材料和方法:采用荧光显微镜检测FITC标记HYNIC-RGD对人胰腺癌、肝癌、肠癌和子宫颈癌细胞的结合;用99mTc-HYNIC-RGD在小鼠乳腺和肝癌动物模型上比较了肿瘤对99mTc-HYNIC-RGD的摄取。结果:体外研究表明胰腺癌和肝癌细胞对RGD结合明显高于肠癌和子宫颈癌。注射后3小时小鼠皮下接种的乳腺癌和肝癌肿瘤组织对99mTc-HYNIC-RGD的摄取达到高峰,乳腺癌对99mTc-HYNIC-RGD摄取高于肝癌40%以上。结论:体外研究表明胰腺癌和肝癌细胞均对RGD有高的摄取,活体小鼠动物模型研究表明乳腺癌对RGD具有高的摄取。

蛋白质组学中的双相电泳技术

本文主要阐述了在蛋白质组研究中双相电泳 (2 - dim ansional electrophoresis,2 - DE)的应用方法。在制备组织的蛋白样品时 ,细胞刮落法和激光捕捉显微切割 (laser capture microdissection,L CM)法较为理想。细胞裂解液除了标准的裂解方法外 ,新型变性剂如硫尿、TBP、ASB14 / C8Φ 等的加入可显著增强蛋白在 2 - DE中的溶解性。固定胶条 (imm obilized p Hgradients,JPG)的使用 ,不仅提高了胞内蛋白的分离效率 ,而且增加了双相电泳的可重复性。在蛋白染色技术方面 ,出现了一种新型染色材料 SYPRO RU BBY,它不但具有较高的灵敏度 ,而且使分析和制备合二为一 ,简化了 2 -

食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达

目的:研究食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达及相关性。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁正常黏膜cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达。结果:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段各在82.9％(34/41)、41.5％(17/41)食管癌组织中的表达水平低于配对的食管癌旁正常黏膜,cystatin B基因的表达下调情况显著高于D10-86 cDNA片段(P<0.05),但2者的表达无相关性(JD>0.05)。结论:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段在食管癌中表达下调,可能源于不同的机制。2者可能分别是由不同的机制而导致在食管癌组织中表达下调。

硒蛋白P在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究硒蛋白P(selenoprotein P,Sel P)在胰腺癌组织中的表达及意义。方法:胰腺癌病人36例,分别切取肿瘤组织和癌旁正常胰腺组织,用免疫组织化学的方法检测Sel P在各组织标本中的表达。结果:Sel P在胰腺癌组织的表达率为55.6%,低于其在正常胰腺组织中的表达率86.1%(P<0.05);Sel P在高、中分化腺癌标本中表达率为76.2%,其在低分化腺癌标本中的表达率为53.3%(P>0.05)。另外,Sel P在TNMⅠ、Ⅱ期病人中表达率为60.9%,而在Ⅲ期病人中表达率为53.8%(P>0.05)。结论:Sel P在胰腺癌组织中的表达低于癌旁正常胰腺组织。尚未发现Sel P表达强度与肿瘤的分化程度及TNM分期相关。

脂质体在基因治疗中的应用及前景

脂质体作为基因的运载工具，用于基因治疗，具有无毒性，无致癌性等优点，这是逆转录病毒载体等不可比拟的，脂质体是一种具有广泛应用前景的体内基因转移的工具。本文总结了近几年来应用脂质体进行体内外基因转移的研究进展，并归纳了几种提高脂质体转化效率和通过毛细血管进入淋巴组织效率的方法。

单细胞cDNA的制备及扩增

目的建立微量细胞的基因表达分析系统，解决细胞全基因组表达模式分析和同质细胞材料获取困难之间的矛盾。方法挑取单细胞直接进行逆转录，随后以１个含有ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）的通用引物进行序列非依赖性的ｃＤＮＡ扩增并检测其代表性。结果从单个ＨＬ－６０细胞中成功地扩增了全ｃＤＮＡ。结论利用单个或少数细胞制备全ｃＤＮＡ探针，为在高分化的异质性系统中进行差异基因表达分析、建立细胞／组织特异性全基因表达图谱提供了一条合理的途径。