药物分析进展概述

药物分析进展概述中国药学会药物分析专业委员会药物分析是分析化学技术在药学领域中的具体应用。分析化学的进步，尤其是近年仪器分析和计算机技术的进展，为药物分析的发展提供了坚实的基础。药物分析的任务是在药学各个领域中，对出于不同的目的和要求，不同来源和组成...

治疗阿尔采末病的药物靶点:β-分泌酶

近年来的研究表明,β-淀粉样蛋白(Aβ)是老年斑的主要成分,有明显的神经细胞毒性作用,在阿尔采末病(AD)的发病过程中发挥了重要作用,因此降低脑中Aβ的生成量是治疗AD的策略。Aβ是由β-和γ-分泌酶裂解其前体蛋白(APP)而生成,其中β-分泌酶(BACE)是启动Aβ形成的关键限速酶,因此BACE是开发治疗AD药物的一个具有吸引力的作用靶点。该文就近来对β-分泌酶的研究作一综述。

膜片钳阵列技术及其应用于药物筛选的研究进展

离子通道是一类重要的药物作用耙点。膜片钳技术是目前进行离子通道研究和影响离子通道药物研究的最好方法。但膜片钳技术通量低,成为应用该法进行药物筛选的最大障碍。膜片钳阵列技术是在普通膜片钳技术基础上发展起来的高通量技术,包括平面膜片钳阵列技术和微管自动化膜片钳技术,已经在药物筛选中得到应用。本文仅就这2种方法当前的研究进展及其在药物筛选中的应用做简单的介绍。

AD治疗新药物——γ-分泌酶抑制剂

家族性阿尔采末病属常染色体显性遗传 ,其中大部分与编码早老素的基因发生突变所导致的γ 分泌酶功能异常有关 ,γ 分泌酶是一包括PS二聚体、Nicastrin、PEN 2等组分的多酶复合体。γ 分泌酶剪切APP、Notch、E cadherin、ErbB 4受体酪氨酸激酶等膜蛋白。目前已发现了许多类型的γ 分泌酶抑制剂 :基于二氟酮、二氟乙醇基团的γ 分泌酶抑制剂 ;脲多肽模拟化合物 ;基于羟乙基二肽电子等配体的化合物 ;具有α 螺旋结构的小肽 ;具有 4 氯 异香豆素基本母核的非肽抑制剂 ;含有丙氨酰基团的化合物。但这些抑制剂目前大多还只是作为一种工具药来研究γ 分泌酶的结构、功能以及作用机制。其中选择性抑制Aβ生成的γ

滨蒿化学成分的研究(Ⅲ)

目的 :研究滨蒿花蕾的化学成分。方法 :采用硅胶、聚酰胺、SephadexLH - 2 0柱色谱和高压液相色谱法分离化学成分 ,UV ,NMR和MS等方法进行结构鉴定。结果 :从干燥花蕾中又分离鉴定了 6个化合物 ,为 β 谷甾醇 (Ⅸ ) ,6 ,7 二甲氧基香豆素 (Ⅹ ) ,6 去甲基茵陈色原酮 (Ⅺ ) ,茵陈香豆酸乙 (Ⅻ ) ,华良姜素 ( ) ,异东莨菪苷 ( )。结论 :化合物Ⅺ ,Ⅻ , ,为首次从该植物中分离得到 ,其中化合物Ⅺ为一新化合物。

反相高效液相色谱法测定人工冬虫夏草中腺苷的含量

目的：采用反相高效液相色谱法测定４种人工冬虫夏草中腺甘的含量。方法：采用ＧｉｌｓｏｎＨＰＬＣ系统，ＤｕｐｏｎｔＣ１８色谱柱，甲醇０．０６ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾四氢呋喃（１０∶１５０∶１．５）为流动相，检测波长为１６０ｎｍ，流速１ｍｌ／ｍｉｎ。结果：该法平均回收率９８．７％，相对标准偏差ＲＳＤ为１．１０％（ｎ＝５）。结论：该法快速简便、灵敏度高。

PPAR激动剂的定向设计、虚拟筛选及合成

过氧化物酶体增殖因子活化受体 (PPAR)是核受体超家族的一员 .基于受体结构的药物分子设计与组合化学策略相结合 ,构建了过氧化物酶体增殖因子活化受体 (PPAR)激动剂的虚拟化合物库 .将已知小分子配体 (GW40 95 44 )与PPAR晶体复合物进行剥离 ,得到受体的活性构象 ,并利用此活性受体分子与虚拟库中小分子进行对接和虚拟筛选 ,得到理论上结合较强的化合物 ,并对这些化合物进行合成 ,共合成 9个新化合物 .活性筛选结果显示化合物对PPAR具有一定的亲和力 ,其中有三个化合物显示出对PPARα ,PPARγ的双重激动作用 。

春根藤化学成分的研究(Ⅱ)

目的 :探讨春根藤的化学成分。方法 :柱色谱分离 ,波谱及单晶X衍射分析鉴定结构。结果 :分离鉴定了 8个化合物 ,为bauerenylacetate(18) ,东莨菪素 (19) ,liriodendrin(2 0 ) ,松脂醇 2 氧 β D 葡萄糖苷 (2 1) ,胡萝卜苷 (2 2 ) ,白瑞素 (2 3) ,七叶素 (2 4)和七叶苷 (2 5 )。结论 :8个化合物均系首次从该植物中分得 ,化合物 2 0 ,2 1,2 3～ 2 5系首次从该属植物中分得 ,bauerenylacetate为新的天然产物。

黄皮酰胺的合成

根据推测的生源关系，以仿生路线合成了有保肝活性的植物成分黄皮酰胺。

老年斑、神经元纤维缠结与硫酸多糖

老年斑 (senileplaques ,SP)、神经元纤维缠结 (neurofib rillarytangles,NFTs)是老年性痴呆最典型的病理特征 ,其中SP的主要成分为 β样淀粉蛋白 (Aβ) ,NFTs主要由异常修饰的tau蛋白组成。许多研究发现硫酸多糖与SP、NFTs的形成密切相关。大量文献报道硫酸多糖与淀粉样前体蛋白(APP)、Aβ以及tau蛋白具有高度亲和性 ,它不仅可以促进APP的异常代谢 ,导致Aβ的大量产生 ,诱导其形成纤丝并聚集、沉积于细胞外 ,而且还可促进tau蛋白发生高度磷酸化 ,形成成对螺旋丝 (PHF)并聚集成NFTs。但也有文献报道外源性硫酸多糖具有促进APP的神经营养作用 ,抑制Aβ纤丝的形成 ,并增强磷酸酯酶PP2B的活性 ,从而减少tau蛋白的磷酸化修饰。并且硫酸多糖的糖基组成、糖链长度、硫酸基的数目及位置不同 ,它在SP、NFTs的形成过程中扮演的作用也不同 ,所以可通过分子结构改造而使硫酸多糖表现抑制SP、NFTs形成的活性 。

白杄体细胞胚胎发生的细胞组织学和淀粉积累动态的研究

以白木千（ＰｉｃｅａｍｅｙｅｒｉＲｅｈｄ．ｅｔＷｉｌｓ．）的成熟种胚为外植体，诱导体细胞胚胎发生。整体染色封片和组织切片的观察结果表明，白木千体细胞胚起源于胚性愈伤组织的单个细胞。胚性细胞经过一次不均等分裂产生两个细胞，即胚细胞和胚柄细胞。然后依次经过胚性胚柄团、球形胚、心形胚及鱼雷形胚阶段，最后发育成具有子叶的成熟胚。通过ＰＡＳ反应研究后发现，在体细胞胚发育过程中，淀粉粒在胚性胚柄团时期开始积累，至心形胚时期达到积累高峰，且淀粉粒的分布主要集中于胚柄细胞、分裂旺盛的胚细胞、器官原基及其附近细胞。据此结果推测淀粉的消长与体细胞胚发生的能量供应有关。

HPLC法测定银杏叶中3种内酯成分

研究了用反相高效液相色谱法测定银杏叶及其提取物中 3种银杏内酯含量的方法 ,采用外标法定量。色谱柱 :ZorbaxODS柱 ,流动相 :甲醇—四氢呋喃—水 (1∶1∶8) ,流速 :1 0mL/min ,检测波长 :2 2 0nm ,线性范围 :2 0 0 8～ 33 4 1μg ,r=0 999～ 0 9999,回收率 :92 7%～10 0 9%。本法结果准确 ,重现性好 ,为生产及工艺研究提供质量控制依据。

总丹酚酸抗脑缺血与抗血栓的关系

目的研究总丹酚酸抗脑缺血与脑血栓的关系。方法采用大鼠大脑中动脉缺血模型，观察总丹酚酸对脑缺血的影响；采用在体动静脉血栓法，观察总丹酚酸对血栓形成的影响，并取血测ＰＧＩ２，ＴＸＡ２及内皮素含量的变化。结果发现总丹酚酸１２５～２５ｍｇ·ｋｇ－１可降低脑梗塞面积和水肿，减少血栓湿重，并降低脑缺血后高水平的ＴＸＡ２，但对ＰＧＩ２则无影响，从而改变ＰＧＩ２／ＴＸＡ２的比值，总丹酚酸亦可降低脑缺血后血中内皮素的含量，２５ｍｇ·ｋｇ－１的ＶｉｔＥ则无上述作用。结论总丹酚酸的抗脑缺血作用与抑制血栓形成有关。

高效液相色谱纤维素类手性固定相法拆分麻黄碱对映体

目的:用手性固定相拆分麻黄碱对映体,并建立检测麻黄碱对映体光学纯度的高效液相色谱法。方法:采用 CHIRAL-CEL OD-H(250 mm×4.6 mm,5 μm)手性柱,柱温为22℃,以正己烷-异丙醇-二乙胺(96:4:0.2)为流动相,流速0.5 mL·min^(-1),在257 nm 检测。结果:麻黄碱对映体拆分效果好,分离度大于2.5,最低检测限分别为5 ng 和10 ng。麻黄碱浓度在0.001～0.25 mg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999)。结论:该方法操作简单,快速,重复性好,可有效地控制药品质量。

神经细胞粘附分子与硫酸化氨基聚糖在神经发育、轴突生长、突触可塑性及学习和记忆中的作用

神经细胞粘附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)是一种主要表达于神经系统的糖蛋白,通过亲同性及亲异性结合介导细胞与细胞及细胞与细胞外基质间的相互作用,参与细胞的识别、迁移、轴突生长、细胞信号转导、学习和记忆等过程。硫酸化氨基聚糖可调节脑发育中的细胞分化、轴突生长及中枢神经系统中神经元的再生,可能参与了与学习和记忆相关的神经结构功能的调节。这些作用可能与神经细胞粘附分子的亲异性结合有关。

中药黄连及其复方对实验动物血糖的影响

黄连具有较强的降血糖作用，与在治疗消渴证的古方中使用频率较高的黄芪、女贞子、麦冬等配伍后，既保留了黄连的降血糖作用，又增强了机体对刚果红的廓清能力。

海洋红藻松节藻Rhodomela confervoides化学成分研究

目的:对采自青岛海滨的海洋红藻松节藻 Rhodomela confervoides进行化学成分研究。方法:各种色谱柱层析和IR、MS、~1H-NMR、^(13)C-NMR、DEPT等波谱解析技术。结果:从松节藻中分离得到5个化合物,其结构经过鉴定分别为:2,2′,3,3′-四溴-4,4′,5,5′-四羟基双苯基甲烷(Ⅰ)、2,2′,3-三溴-3′,4,4′,5-四羟基-6′-甲氯甲基双苯基甲烷(Ⅱ),2,3-二溴-4,5-羟基苯甲醇(Ⅲ)、2,3-二溴-4,5-二羟基-苯甲醛(Ⅳ)、2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基已基醚(Ⅴ)。其中化合物Ⅱ对KB和Be17402肿瘤细胞有选择性细胞毒活性。

黄毛耳草化学成分的研究

目的 :研究黄毛耳草抗癌活性成分。方法 :用硅胶、聚酰胺、SephadexLH 2 0等层析方法分离化合物 ,用光谱和化学方法鉴定结构。结果 :鉴定了 2 3个化合物 ,其中 5个新化合物 ;黄毛耳草碱具有较强的细胞毒活性。结论 :黄毛耳草中主要含有环烯醚萜甙、黄酮、香豆素、木脂素、生物碱等成分 ,其中生物碱是抗癌活性成分。

异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制研究

目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定转染细胞周期蛋白D1启动子萤光素酶报告基因至UMUC3细胞并筛选后,检测ISO预处理后萤光素酶活性。ISO预处理UMUC3细胞后,提取核蛋白检测核转录因子表达水平的变化。分别稳定转染GFP和GFP-细胞周期蛋白D1表达构建载体,筛选克隆;ISO预处理后,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达水平,贴壁依赖性细胞生长实验法检测细胞生长能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的变化。分别稳定转染人源性细胞周期蛋白D1野生型和-163位点突变型萤光素酶报告基因质粒载体至UMUC3细胞并筛选,ISO预处理后检测细胞的萤光素酶活性。最后利用染色质免疫沉淀的方法,以抗Sp1抗体检测ISO对Sp1与细胞周期蛋白D1启动子结合力的影响。结果:ISO可从mRNA和蛋白水平显著抑制肿瘤细胞的细胞周期蛋白D1水平,并且是从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的转录。ISO可抑制、下调核转录因子Sp1的表达,并抑制Sp1与细胞周期蛋白D1启动子区域的结合力,该结合位点主要位于启动子-92到+27bp的5’-非翻译区。结论:ISO可通过下调Sp1核转录因子表达及其与细胞周期蛋白D1启动子的结合,从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的表达,从而诱导G0/G1细胞周期阻滞并抑制肿瘤细胞增殖。我们的研究将为临床中药单体ISO综合治疗肿瘤提供新的策略。