膜片钳阵列技术及其应用于药物筛选的研究进展

离子通道是一类重要的药物作用耙点。膜片钳技术是目前进行离子通道研究和影响离子通道药物研究的最好方法。但膜片钳技术通量低,成为应用该法进行药物筛选的最大障碍。膜片钳阵列技术是在普通膜片钳技术基础上发展起来的高通量技术,包括平面膜片钳阵列技术和微管自动化膜片钳技术,已经在药物筛选中得到应用。本文仅就这2种方法当前的研究进展及其在药物筛选中的应用做简单的介绍。

滨蒿化学成分的研究(Ⅲ)

目的 :研究滨蒿花蕾的化学成分。方法 :采用硅胶、聚酰胺、SephadexLH - 2 0柱色谱和高压液相色谱法分离化学成分 ,UV ,NMR和MS等方法进行结构鉴定。结果 :从干燥花蕾中又分离鉴定了 6个化合物 ,为 β 谷甾醇 (Ⅸ ) ,6 ,7 二甲氧基香豆素 (Ⅹ ) ,6 去甲基茵陈色原酮 (Ⅺ ) ,茵陈香豆酸乙 (Ⅻ ) ,华良姜素 ( ) ,异东莨菪苷 ( )。结论 :化合物Ⅺ ,Ⅻ , ,为首次从该植物中分离得到 ,其中化合物Ⅺ为一新化合物。

春根藤化学成分的研究(Ⅱ)

目的 :探讨春根藤的化学成分。方法 :柱色谱分离 ,波谱及单晶X衍射分析鉴定结构。结果 :分离鉴定了 8个化合物 ,为bauerenylacetate(18) ,东莨菪素 (19) ,liriodendrin(2 0 ) ,松脂醇 2 氧 β D 葡萄糖苷 (2 1) ,胡萝卜苷 (2 2 ) ,白瑞素 (2 3) ,七叶素 (2 4)和七叶苷 (2 5 )。结论 :8个化合物均系首次从该植物中分得 ,化合物 2 0 ,2 1,2 3～ 2 5系首次从该属植物中分得 ,bauerenylacetate为新的天然产物。

白杄体细胞胚胎发生的细胞组织学和淀粉积累动态的研究

以白木千（ＰｉｃｅａｍｅｙｅｒｉＲｅｈｄ．ｅｔＷｉｌｓ．）的成熟种胚为外植体，诱导体细胞胚胎发生。整体染色封片和组织切片的观察结果表明，白木千体细胞胚起源于胚性愈伤组织的单个细胞。胚性细胞经过一次不均等分裂产生两个细胞，即胚细胞和胚柄细胞。然后依次经过胚性胚柄团、球形胚、心形胚及鱼雷形胚阶段，最后发育成具有子叶的成熟胚。通过ＰＡＳ反应研究后发现，在体细胞胚发育过程中，淀粉粒在胚性胚柄团时期开始积累，至心形胚时期达到积累高峰，且淀粉粒的分布主要集中于胚柄细胞、分裂旺盛的胚细胞、器官原基及其附近细胞。据此结果推测淀粉的消长与体细胞胚发生的能量供应有关。

海洋红藻松节藻Rhodomela confervoides化学成分研究

目的:对采自青岛海滨的海洋红藻松节藻 Rhodomela confervoides进行化学成分研究。方法:各种色谱柱层析和IR、MS、~1H-NMR、^(13)C-NMR、DEPT等波谱解析技术。结果:从松节藻中分离得到5个化合物,其结构经过鉴定分别为:2,2′,3,3′-四溴-4,4′,5,5′-四羟基双苯基甲烷(Ⅰ)、2,2′,3-三溴-3′,4,4′,5-四羟基-6′-甲氯甲基双苯基甲烷(Ⅱ),2,3-二溴-4,5-羟基苯甲醇(Ⅲ)、2,3-二溴-4,5-二羟基-苯甲醛(Ⅳ)、2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基已基醚(Ⅴ)。其中化合物Ⅱ对KB和Be17402肿瘤细胞有选择性细胞毒活性。

黄毛耳草化学成分的研究

目的 :研究黄毛耳草抗癌活性成分。方法 :用硅胶、聚酰胺、SephadexLH 2 0等层析方法分离化合物 ,用光谱和化学方法鉴定结构。结果 :鉴定了 2 3个化合物 ,其中 5个新化合物 ;黄毛耳草碱具有较强的细胞毒活性。结论 :黄毛耳草中主要含有环烯醚萜甙、黄酮、香豆素、木脂素、生物碱等成分 ,其中生物碱是抗癌活性成分。

异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制研究

目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定转染细胞周期蛋白D1启动子萤光素酶报告基因至UMUC3细胞并筛选后,检测ISO预处理后萤光素酶活性。ISO预处理UMUC3细胞后,提取核蛋白检测核转录因子表达水平的变化。分别稳定转染GFP和GFP-细胞周期蛋白D1表达构建载体,筛选克隆;ISO预处理后,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达水平,贴壁依赖性细胞生长实验法检测细胞生长能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的变化。分别稳定转染人源性细胞周期蛋白D1野生型和-163位点突变型萤光素酶报告基因质粒载体至UMUC3细胞并筛选,ISO预处理后检测细胞的萤光素酶活性。最后利用染色质免疫沉淀的方法,以抗Sp1抗体检测ISO对Sp1与细胞周期蛋白D1启动子结合力的影响。结果:ISO可从mRNA和蛋白水平显著抑制肿瘤细胞的细胞周期蛋白D1水平,并且是从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的转录。ISO可抑制、下调核转录因子Sp1的表达,并抑制Sp1与细胞周期蛋白D1启动子区域的结合力,该结合位点主要位于启动子-92到+27bp的5’-非翻译区。结论:ISO可通过下调Sp1核转录因子表达及其与细胞周期蛋白D1启动子的结合,从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的表达,从而诱导G0/G1细胞周期阻滞并抑制肿瘤细胞增殖。我们的研究将为临床中药单体ISO综合治疗肿瘤提供新的策略。

耳草属植物化学成分的研究VI.牛白藤化学成分的研究

从茜草科耳草属植物牛白藤Ｈｅｄｙｏｔｉｓ ｈｅｄｙｏｔｉｄｅａ中分离鉴定了１０个化合物，经光谱和化学方法鉴定为：三十一烷，β－谷甾醇，表明白桦脂酸（３－ｅｐｉ－ｂｅｔｕｌｉｃ ａｃｉｄ，Ⅲ），白桦脂酸，乌苏酸，东莨菪甙，大叶芸香甙Ａ，胡萝卜甙，鹅掌楸甙，东莨菪内酯，均为首次从该植物中得到。

活性氧对蛋白激酶和基因表达调节作用的研究进展

活性氧在维持血管稳态方面有着十分重要的生理和病理生理作用。活性氧的产生和代谢失衡与多种血管性疾病有着密切的关系。近年来的研究发现 ,活性氧对信号转导通路中氧化还原敏感的蛋白激酶有调节作用 ,通过影响这些氧化还原敏感蛋白酶的活性 。

红豆杉组织培养中SINENXANS高产细胞系Ts19的几种同工酶动态比较研究

对从中国红豆杉的茎来源的愈伤组织经筛选而得的ｓｉｎｅｎｘａｎｓ高产细胞系Ｔｓ１９的过氧化物酶（ＰＯＤ）、酯酶（ＥＳＴ）、细胞色素氧化酶（ＣＯＤ）、淀粉酶（ＡＭＬ）、多酚氧化酶（ＰＰＯ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的同工酶，可溶性蛋白的含量及电泳谱带、超氧化物歧化酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）的活性作了比较研究。并与培养过程中ｓｉｎｅｎｘａｎｓ含量的动态变化相比较，探索了这几种同工酶的酶谱和两种酶活性与ｓｉｎｅｎｘａｎｓ的生物合成的关系。旨在为建立紫杉醇生物合成的中间代谢模型奠定基础。

硬毛耳草化学成分的研究

从茜草科耳草属植物硬毛耳草Hedyotislindleyanu中分离鉴定了12个化合物，经光谱和化学方法鉴定为：山柰酚（kampferol，Ⅰ），尿黑酸（gentisicacid，Ⅱ），β-谷甾醇（β-sitosterol，Ⅲ），乌苏酸（ursolicacid，Ⅳ），5，5'，6，7，8-五甲氧基-3'，4'-二氧亚甲基黄酮（5，5'，6，7，8-pentamethoxy-3'，4'-methylenedioxy-flavone，Ⅴ），东莨菪内酯（scopoletin，Ⅵ），七叶内酯二甲醚（aesculetin6，7-dimethylether，Ⅶ），3'，4'，5，6，7-五甲氧基黄酮（3'，4'，5，6，7-pentamethoxy-flavone，Ⅷ），3'，4'，5'，5，6，7-六甲氧基黄酮（3'，4'，5'，5，6，7-hexamethoxy-flavone，Ⅸ），3'，4'，5'，5，6，7，8-七甲氧基黄酮（3'，4'，5'，5，6，7，8-heptamethoxy-flavone，Ⅹ），3'，4'，5，6，7，8-六甲氧基黄酮（3'，4'，5，6，7，8-hexamethoxy-flavone，Ⅺ），4'-羟基-3'，5'，5，6，7-五甲氧基黄酮（4'-hydroxy-3'，5'，5，6，7-pentamethoxy-flavone，Ⅻ），均为首次从该植物中得到。

环氧合酶-2抑制剂的三维定量构效关系研究

建立三环系COX-1和COX-2抑制剂结构与活性的三维定量构效关系模型,为设计新型的具有选择性的COX-2抑制剂提供线索.通过与酶的对接并优化,确定化合物在受体结合腔中的构象,利用比较分子力场分析方法建立三维定量构效关系模型.模型1R_(cv)~2=0.685,最佳主成分数为6,传统相关系数为R^2=0.988,F=726.2,标准偏差S=0.080;模型2R_(cv)~2=0.573,最佳主成分数为6,传统相关系数为R^2=0.996,F=1147.6,标准偏差S=0.034.所得的模型不仅解释了化合物的构效关系,而且对预测集中的化合物有很好的预测能力;比较不同模型的系数相关图,分析了结构与活性、结构与选择性的关系,得到的结果可以指导新化合物的设计与合成.

海燕Asterina pectinifera化学成分研究

目的对产于中国青岛海域的生物量很大的棘皮动物海燕Asterinapectinifera进行化学成分研究。方法海燕的 95 %EtOH提取物用大孔吸附树脂柱、凝胶柱和硅胶柱进行的反复分离 ,用NMR、MS和IR分析技术鉴定了它们的结构。结果分别鉴定为 1 5 β ,1 6 β 异丙叉基二氧 5α 胆甾烷 3β ,4 β ,6α ,7α ,8β ,2 6 六醇(Ⅰ )和 5α 胆甾 3β ,6α ,7α ,8β ,1 5 β ,1 6 β ,2 6 七醇 (Ⅱ ) 。

大丁草属植物的化学成分和药理活性研究

本文概述了大丁草属植物的化学成分和药理活性研究。着重介绍了其中所含的香豆素类化合物的化学结构特点、光谱特征及生物活性。

二肽肽酶IV抑制剂的三维定量构效关系研究

二肽肽酶IV是一类用于治疗II型糖尿病具有潜在价值的关键酶, 很多此类酶的抑制剂用于处理此病具有相当好的有效性. 一系列N-取代的甘氨酰氰基吡咯烷衍生物对于二肽肽酶具有高的活性和选择性. 我们使用比较分子力场分析方法建立DPP-IV 抑制剂——N-取代的甘氨酰氰基吡咯衍生物的三维定量构效关系, 该模型为设计用于治疗II 型糖尿病的高效DPP-IV抑制剂提供结构信息. CoMFA模型的交叉验证相关系数q2=0.575, 非交叉验证相关系数r2=0.981,绝对误差S=0.184, F9.68=388.5. 使用七个预测集检验了模型的预测能力. 所得的模型解释了已有的构效关系, 并对同类化合物有较好的预测能力, 该模型可用于指导新型的DPP-IV 抑制剂的设计与优化.

药物分析进展概述

药物分析进展概述中国药学会药物分析专业委员会药物分析是分析化学技术在药学领域中的具体应用。分析化学的进步，尤其是近年仪器分析和计算机技术的进展，为药物分析的发展提供了坚实的基础。药物分析的任务是在药学各个领域中，对出于不同的目的和要求，不同来源和组成...

天然虫草和人工虫草菌丝体的抗氧化活性比较研究

目的:通过比较生物活性,探索对天然虫草与人工虫草菌丝体的质量进行控制的方法。方法:采用邻苯三酚自氧化法和DPPH自由基清除实验来评价天然虫草与人工虫草菌丝体的抗氧化活性。结果:人工虫草菌丝体具有比天然虫草更好的抗氧化活性,抗氧化活性与虫草中含有的某些成分的含量有关。结论:抗氧化活性可以作为评价人工虫草菌丝体质量的指标之一。

光叶紫玉盘多氧取代环己烯类成分研究

从番荔枝科紫玉盘属植物光叶紫玉盘（ＵｖａｒｉａｂｏｎｉａｎａＦｉｎｅｔ）地上茎ＥｔＯＨ提取物中分离出７种新的多氧取代环己烯类化合物，用波谱分析和Ｍｏｓｈｅｒ酯制备等方法确定了全部化学结构及其绝对构型，分别命名为光叶紫玉盘醇Ａ～Ｇ（ｕｖａｒｉｂｏｎｏｌＡ～Ｇ，１～７）。体外抗肿瘤筛选表明，这些天然化合物均无活性，但部分半合成衍生物活性明显，其中尤以光叶紫玉盘醇Ｂ（２）的氧化物（２ａ）最为显著，抑制ＫＢ、Ｂｅｌ７４０２和Ａ２７８０细胞的ＩＣ５０值均小于１μｇ·ｍｌ－１，抑制ＨＣＴ８的ＩＣ５０则小于０１μｇ·ｍｌ－１。