基质辅助激光解吸附电离质谱成像技术在帕金森病研究中的应用

基质辅助激光解吸附电离质谱成像(MALDI-MSI)技术是一种基于质谱检测的成像技术,可以无标记地在生物样品组织上同时检测多种物质的分布情况。目前,MALDI-MSI越来越多地用于分子水平的中枢神经系统疾病研究,包括帕金森病、阿尔茨海默病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化症和脑卒中等。本文就MALDI-MSI在帕金森病研究中的应用情况进行综述,为定位帕金森病发展过程中小分子代谢产物的功能障碍途径提供信息,为研究其治疗策略的潜在机制提供参考。

杏芎氯化钠注射液改善凝血纤溶系统抗脑缺血-再灌注损伤作用及分子机制研究

目的:探究杏芎氯化钠注射液修复缺血性脑卒中的潜在作用及作用机制。方法:复制大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型,采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色、ELISA、Western Blot探究杏芎氯化钠注射液对缺血性脑卒中的治疗作用及作用机制。结果:与模型组比较,杏芎氯化钠注射液能显著降低MCAO/R后的脑梗死体积,抑制血脑屏障(BBB)中MMP-3、MMP-9含量,提高claudin-5、occludin含量;降低血浆凝血纤溶相关因子(血小板膜蛋白CD61、D-dimer、GMP-140、PAI-1、TF、TXB、vWF)含量,升高血浆t-PA、AT-Ⅲ含量;促进脑组织缺血半暗带中AMPK磷酸化及上调NAMPT、SIRT1、PGC-1α、PPAR、ERRα、VEGF蛋白表达。结论:杏芎氯化钠注射液能改善MCAO/R大鼠凝血纤溶系统紊乱,其机制与激活p-AMPK/SIRT1-PGC-1α/VEGF通路有关。

NLRP3炎症小体在心血管疾病中的研究进展

炎症在心血管疾病的发生、发展中有重要作用,核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在心血管炎症中起重要作用。NLRP3炎症小体参与多种病理生理学过程,在动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、压力超负荷或心肌病引起的心力衰竭等心血管疾病中发挥关键作用。目前天然药物和化学药物可通过抑制NLRP3的激活及表达来发挥治疗心血管疾病的作用。本文就NLRP3炎症体在心血管疾病发病机制和相关药物进行综述。

三七皂苷R1-低相对分子质量三七多糖纳米粒的制备及其对SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的利用水溶性低相对分子质量三七多糖(low molecular weight Panax notoginseng polysaccharide,PNP-L)作为新型载体制备纳米粒,实现对三七皂苷R_(1)的增溶并提高其治疗效果。方法利用SephadexG-100凝胶对三七多糖(Panax notoginseng polysaccharide,PNP)分级纯化,得到相对均质的低相对分子质量三七多糖(PNP-L)。以PNP、PNP-L作为三七皂苷R_(1)的载体,采用乳化溶剂挥发法制备三七皂苷R_(1)-三七多糖(R_(1)-PNP)纳米粒和三七皂苷R_(1)-低相对分子质量三七多糖(R_(1)-PNP-L)纳米粒。测定其载药量及包封率,探索低相对分子质量多糖作为载体的可行性。采用马尔文粒度分析仪对纳米粒粒径、粒度分布及Zeta电位进行测定,差示扫描量热仪(DSC)进行晶型分析,透射电子显微镜(TEM)测定其形态。体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,构建缺氧/复氧模型,比较三七皂苷R_(1)、R_(1)-PNP-L物理混合制剂、R_(1)-PNP-L纳米粒对神经细胞损伤的保护作用。结果R_(1)-PNP-L纳米粒平均粒径(139.17±7.22)nm,多分散指数(PDI)为0.41±0.19,Zeta电位(-19.14±3.14)mV,载药量28.62%,包封率85.85%,将三七皂苷R_(1)溶解度提高了32.30倍,并起到缓释作用。R_(1)-PNP-L纳米粒对SH-SY5Y细胞无明显细胞毒性,对缺氧/复氧模型诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护效果R_(1)-PNP-L纳米粒>R_(1)-PNP-L物理混合制剂>三七皂苷R_(1)。结论PNP-L可作为三七皂苷R_(1)的一种良好载体,形成的纳米粒可有效提高三七皂苷R_(1)溶解度并对缺氧/复氧模型诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用。

HPLC指纹图谱和UPLC-Q-TOF-MS方法对芪冬颐心口服液中成分研究

目的建立芪冬颐心口服液的HPLC指纹图谱,结合UPLC-Q-TOF-MS方法对其成分进行归属,为芪冬颐心口服液质量控制提供理论依据。方法建立10批次芪冬颐心口服液指纹图谱,采用“中药指纹图谱相似度评价系统(A版)”进行相似度评价,方法学考察精密度、重复性、稳定性,同时应用UPLC-Q-TOF-MS方法对其成分进行鉴别和归属。结果10批次芪冬颐心口服液指纹图谱中有7个共有峰,指纹图谱相似度大于0.99。同时应用UPLC-Q-TOF-MS方法,正离子质谱数据鉴定出25个成分,负离子质谱数据鉴定出17个成分,正、负离子质谱数据共同鉴定出9个成分,并对每个共有峰进行单味药材归属。结论HPLC指纹图谱结合UPLC-Q-TOF-MS方法准确可靠,重复性和稳定性较好,可为芪冬颐心口服液的质量控制提供参考。

三七皂苷抗缺血性脑卒中的分子机制研究进展

脑卒中具有复发率高、致残率高、致死率高等特点。缺血性脑卒中是一种常见的脑卒中类型,占脑卒中发病率的70%,是引起我国居民寿命降低的危险因素。缺血性脑卒中病理机制复杂,以往的神经保护方法仅限于单一的机制,此类药物不能充分抑制缺血性脑卒中患者复杂的病理生理级联反应。来源于天然产物的药物所含化学成分复杂,能够同时作用于疾病的不同靶点,因此使用中药抗缺血性脑卒中仍然是目前的研发重点。中药三七的药用历史悠久,源于五加科人参属植物三七的干燥根及根茎,具有散瘀止血、消肿定痛的功效,在防治脑血管疾病中有着“金不换”的赞誉,其皂苷类成分包括二醇型人参皂苷、三醇型人参皂苷及特殊类型皂苷。三七皂苷对缺血性脑卒中的保护作用确切,在抑制钙超载、抗氧化应激、抗炎、抗焦亡、抗凋亡、修复血脑屏障、促进血管新生以及调节肠道菌群等方面均有相关作用。同时,三七皂苷在与黄芪甲苷、栀子苷、丹参多酚酸及冰片的联合应用中表现出协同增效的作用,三七皂苷在预防和治疗脑卒中方面显示出潜在应用价值和巨大的药用开发前景。因此,现对三七皂苷中所含皂苷类化学成分、三七皂苷抗缺血性脑卒中的药理作用以及三七皂苷联合用药抗缺血性脑卒中三方面进行总结归纳。

杏芎氯化钠注射液对缺血性脑卒中的保护作用及初步机制研究

目的:研究杏芎氯化钠注射液对缺血性脑卒中大鼠的保护作用及作用机制。方法:以线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,观察杏芎氯化钠注射液对缺血性脑卒中的改变。采用TTC染色法检测脑梗死体积;应用ELISA法检测血清中炎症反应指标TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-4、IL-10、ICAM-1、CD11a、MCP-1含量和氧化应激指标NOX、4-HNE、PC、8-OHdG、HO-1的含量。结果:杏芎氯化钠注射液腹腔注射给药3天能够有效减小缺血部位脑梗死体积;降低血清中促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β、ICAM-1、CD11a、MCP-1的含量;同时抑制血清中氧化应激因子NOX、4-HNE、PC、8-OHdG含量,升高HO-1的含量。结论:杏芎氯化钠注射液对缺血性脑卒中大鼠有神经保护作用,可减少脑梗死体积,其作用机制与抑制血清中炎症及氧化应激因子含量有关。