APOB基因XbaI多态性与中国维吾尔族自然长寿关联研究

目的探讨栽脂蛋白B（Apolipoprotein B，apoB）基因XbaⅠ多态性与维吾尔族自然长寿之阃的关系。方法选择新疆和田地区191名年龄90岁以上的健康维吾尔族个体为研究对象，另选53名年龄65—70岁、民族、性别、地域相匹配的正常个体为对照。采用PCR-序列特异引物（Sequence specifc primer，PCR—SSP）、PCR-限制长度片段多态性（Restriction fragmem length polymorphism，PCR—RFLP）和PCR-直接测序（PCR—sequencing）等技术对apoB基因第26外显子XbaⅠ限制性片段长度多态性（Restriction fragment length polymorphisms，XbaⅠ—RFLP）进行分型。结果经Logistic回归分析显示，长寿组apoB基因X^＋X^＋基因型频率显著高于对照组（P〈0．05）。结论基因型X^＋X^＋与自然长寿显著正相关，可能为长寿的保护因素。

F-box蛋白家族的功能研究进展

F box蛋白是一类含有F box基序 (motif) ,在泛素介导的蛋白质水解过程中具有底物识别特性的蛋白质家族 .这类蛋白质在细胞时相转换、信号传导、发育等多种生理过程中都具有重要功能 .

医学发展的未来:从基因组学到整合医学

综观20世纪生命科学发展，从宏观向微观、由表型到机制的探求是其重要特征。以还原论为基础的经典结构生物学、分子生物学与细胞生物学的研究极大地增进了人们对生命本质的理解。人类基因组计划（HGP）完成后，生命科学研究进入到“功能基因组学”研究时代，转录组学、蛋白质组学、代谢组学开始迅速发展，生命科学的研究方法不再局限于以还原论为指导的微观拆分，

反义技术研究进展

反义技术利用DNA或RNA分子通过Watson Crick碱基配对原则与目的基因的mRNA互补结合 ,通过各种机制使其降解或抑制其编码蛋白的翻译 ,从而抑制目的基因的表达。与基因敲除(geneknockout)等功能缺失性研究方法相比 ,反义技术具有投入少 ,周期短 ,操作简单等优点 ,因此受到了广泛的关注。对几种常用反义技术的研究进展及存在的问题进行概述。

基因差异表达的研究方法

基因差异表达的研究方法△潘美辉金虎林袁建刚强伯勤（中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室，北京，１００００５）ＡｂｓｔｒａｃｔＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅ...

D构象丝氨酸在中枢神经系统中的功能研究进展

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细胞而非神经元来源的“异常”构象氨基酸作为一种新型神经递质 ,不仅更新了传统“神经递质”的定义 。

连接介导PCR及其在体内足迹研究中的应用

连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接介导聚合酶链反应的敏感性 .

载脂蛋白家族新成员——载脂蛋白A5基因研究进展

通过抑制消减杂交技术和生物信息学技术发现并证实了载脂蛋白家族新成员载脂蛋白A5基因的存在 ,进一步的实验结果证实该基因定位于人 11号染色体长臂 2 3区。该基因可能在大鼠肝脏再生过程中调节肝脏脂质的摄入量 ,但具体机制不详。转基因动物以及基因敲除动物与对照组动物比较发现 ,该基因非常显著地影响实验组动物的血浆甘油三酯水平。讨论了在不同地域人群中该基因的多态性以及单倍型与人血浆中甘油三酯水平的关系 ,介绍了载脂蛋白A5的表达调控机制。

羊瘙痒因子263K感染仓鼠终末期脑中胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶的表达和分布变化研究

为了探讨羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织中星形胶质细胞和神经元的数量及功能改变,利用免疫印迹、免疫组化方法研究了胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specificenolase,NSE)在受染仓鼠各脑区中表达变化的特点,同时比较其与神经病理学改变及PrPSc沉积的关系。结果表明,感染终末期仓鼠的脑组织中GFAP表达量明显增高,与正常对照相比,大脑皮质、脑干和小脑区域GFAP着色细胞数量分别增高3 69、2 41和1 56倍。感染仓鼠脑组织NSE表达量低于正常对照,小脑、海马CA1区和大脑皮质NSE着色细胞数量分别仅为正常对照相应区域的22 5%、54 2%和53 9%。这些变化与PrPSc在脑组织中的沉积程度和空泡样变性程度相吻合。结果提示,GFAP和NSE的检测可分别很好地反映星形胶质细胞和神经元的数量及功能状态,成为在朊病毒病发病过程中重要的病理变化指标。

人载脂蛋白AV原核表达载体的构建与纯化研究

目的:构建人载脂蛋白AV(apolipoprotein AV,apoAV)的原核载体并表达纯化该蛋白。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,以反转录的cDNA第一链为模板,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到含有编码apoAV完整成熟肽段的PCR片段。PCR产物和原核表达载体pET30b经核酸内切酶双切后连接,连接产物经转化至大肠杆菌感受态细胞Top10,挑选克隆测序。重组质粒pET30b-apoAV转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并优化诱导表达条件,重组的apoAV经镍离子螯合树脂纯化获得。结果:经测序证实人apoAV目的基因成功克隆入pET30b原核表达载体中,经过IPTG诱导有约40KD的特异性蛋白表达,与预期大小一致。该蛋白在IPTG诱导下的最佳表达时间为5h,最佳浓度在31.3μmol/L。纯化的apoAV纯度在95%以上,产率约为15 mg/L。结论:成功构建人apoAV的原核表达载体,实现了高效表达和纯化,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。

人类基因组计划研究进展

本文简要介绍了人类基因组计划的研究目标、内容、策略和人类基因组计划研究的新进展，如遗传图谱、转录图谱的构建、序列分析、疾病基因的鉴定等。同时还介绍了可能力。快基因组全序列分析的新策略和基因组后研究的几种方法。

多功能转录因子——阴阳因子-1研究进展

真核基因的表达受到顺式作用元件和反式作用因子的调控。阴阳因子－１（ＹｉｎＹａｎｇ－１，ＹＹ１）是一类新的反式作用因子的代表，它具有转录激活功能、转录阻遏功能，可作为一个起始子结合蛋白因子，同时它又是核基质结合蛋白，阴阳因子－１可与其他蛋白发生作用，其结合基序的多样性可能是其功能多样性的基础，据信，阴阳因子－１可以通过多种机制发挥作用。

载脂蛋白apoA-Ⅰ抗动脉粥样硬化的相关研究

Apolipoprotein A Ⅰ, the major protein component of the HDL, exerts its important function during modulating the metabolism of lipids in the plasma. Animal experiments have established that high concentration of the apo A Ⅰ not only inhibits the initiation and progression of atherosclerosis, but also makes the preexisting atherosclerotic lesions regress. The most accepted mechanism is reverse cholesterol transport(RCT). It may become a new non traumatic therapy that the atherosclerosis is prevented and treated by the purified or recombinant human apolipoprotein A Ⅰ.

微管成核的研究进展

微管成核是指微管蛋白 (tubulin)分子相互作用形成微管组织“核心”的过程 ,它是微管形成的初始阶段。在一定条件下 ,微管蛋白溶液中可以发生微管成核现象。γ微管蛋白 (γ tubulin)或多种γ微管蛋白复合体的存在能够加速这一过程。在体内 ,一般是由γ TuRC (γ tubulinringcomplex)启动微管的装配。近年来研究发现即使没有γ微管蛋白 ,机体仍然能够利用某种机制组织微管成核。

人β^(41/42)地中海贫血基因的转基因小鼠研究

人β珠蛋白基因簇位于第11号染色体短臂,由5个功能基因组成:5′-ε-G_γ-A_γ-δ-β-3′,其表达具有红系特异性和发育阶段特异性,并且β类珠蛋白基因与α类珠蛋白基因表达的终产物始终维持平衡。这些基因的适宜表达依赖于ε珠蛋白基因上游由4个DNaseⅠ高敏感位点(HS)组成的位点控制区(LCR),其中HS2具有主要的增强子活性。

应用mRNA差异显示技术研究精子发生中阶段特异性基因表达

为进行精子发生过程中具有阶段特异性表达特征的基因研究，本文应用mRNA差异显示与曲细精管透光分期技术相结合的方法，对大鼠IX～XII期和XIII～Ⅰ期曲细精管的基因表达指纹图谱进行了比较。通过27组不同引物组合的差异PCR反应，共得到56个具有阶段特异性表达特征的cDNA片段。通过对它们中的12个进行序列测定和序列同源性分析，其中8个为代表未知基因的新的EST，另有一个与小鼠quaking基因具有高度的同源性，提示这一基因同样存在于大鼠曲轴精管中并呈阶段特异性表达。将所得序列送至GenBank，均获得新的序列编号。