胃癌类器官在基础研究与临床应用中的进展

胃癌在全球癌症发病率和死亡率中均位居第5,具有高度的侵袭性和异质性,但由于缺乏表征胃癌发生进展特性的研究模型,胃癌的研究和治疗比较局限。胃癌类器官是一种在体外培育而成的多细胞三维结构,能够模拟原发胃癌的结构和功能,在建立胃癌研究模型、模拟体内肿瘤微环境、药物高通量筛选、发现治疗新靶点、预测临床治疗反应、指导个体化治疗等方面拥有巨大的应用潜力与发展前景。本文对胃癌类器官在基础研究与临床应用中的进展进行综述,以期推动临床前基础研究的进展,为胃癌的临床治疗提供支持。

肥胖模型小鼠肝脏的病理变化及代谢组分析

目的检测肥胖模型小鼠的肝脏病理变化,并探究肥胖对肝脏代谢的影响。方法通过24周的持续高脂饮食(HFD)喂养,建立肥胖模型小鼠,对照组为正常饮食(CD)喂养。24周后,解剖观察肝脏病变,利用苏木精-伊红(HE)染色和天狼猩红染色观察肝脏组织病理特点。取适量肝脏组织于80%甲醇中萃取后,利用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)进行代谢组检测;并对所获得的代谢组数据进行主成分分析(PCA)、差异代谢物分析以及KEGG通路富集分析,探究肥胖小鼠肝脏的代谢改变。结果高脂饮食24周后,HFD组小鼠的体质量和肝脏质量均显著高于正常饮食的CD组;HFD组小鼠肝脏脂肪变性程度严重,出现轻微纤维化;两组小鼠肝脏代谢物具有明显差异,且HFD组小鼠肝脏的代谢改变主要集中在苯丙氨酸代谢、柠檬酸循环(TCA循环)、鞘脂类代谢、精氨酸生物合成、初级胆汁酸的生物合成等代谢通路。结论成功构建肥胖模型小鼠,阐明了肥胖小鼠肝脏的病理特征;对肥胖小鼠肝脏进行代谢组学分析,揭示了肥胖小鼠肝脏的主要代谢通路改变。

小分子化合物组合改善多能干细胞向脑类器官定向分化的效率

目的优化多能干细胞(PSCs)定向分化为脑类器官的条件,提高人脑类器官的分化效率。方法利用人胚胎干细胞(hESCs)系H9向人脑类器官诱导分化体系,在早期脑类器官分化到神经祖细胞的发育阶段添加小分子化合物组合,通过形态学观察不同分化阶段脑类器官中的神经祖细胞形成的效率、细胞凋亡的情况以及分化成神经元的效率,通过RT-qPCR检测标志性基因的表达量,综合评估添加的小分子化合物组合对脑类器官形成的影响。结果在脑类器官神经祖细胞发育的关键阶段(1 d~14 d),培养基中依次添加多索啡(dorsomorphine)、A83-01、GSK-3β抑制剂CHIR99021和SMAD抑制剂SB-431542,可使神经祖细胞阶段的相关标志性基因的表达量显著提高,促进特异性神经管样结构形成,脑类器官中心区域的细胞凋亡减少。结论通过使用上述4种小分子化合物组合,可明显提高早期脑类器官的形成效率,减少脑类器官中的细胞凋亡、促进神经元形成,减少培养过程中的组织结构异质性。

文拉法辛提升抑郁模型小鼠的神经元轴突结构稳定性

目的探究文拉法辛能否升高锚蛋白G(AnkG)表达从而改善小鼠的抑郁症状。方法将Synapsin-Cre1小鼠与Ankyrin3-floxed小鼠互交产生Ank3条件性敲低鼠,将条件性Ank3敲低鼠与同窝野生型小鼠分别分成文拉法辛组和0.9%氯化钠溶液(NS)组,文拉法辛组小鼠每日灌胃1 g/L的文拉法辛溶液,200μL/d,其他组给予等体积的NS,持续4周。利用糖水偏好、Y迷宫等实验对小鼠进行抑郁相关行为学检测。通过Western blot对比了4组小鼠皮质区AnkG及突触后致密区蛋白95(PSD95)表达水平,又进行了多重免疫组化对比了4组小鼠海马区AnkG及微管关联蛋白2(MAP2)水平。结果与野生-NS组比较,敲低-NS小鼠对糖水的偏好显著下降(P<0.001),同时存在自发轮替率的下降(P<0.05),证明成功模拟了抑郁症患者的快感缺失及认知障碍症状。与敲低-NS组相比,文拉法辛可显著升高Ank3敲低小鼠对糖水的偏爱(P<0.001),提高其自发轮替率(P<0.05),改善认知能力。敲低-文拉法辛组小鼠皮质的AnkG及PSD95含量显著高于敲低-NS组小鼠对应脑区的表达水平(P<0.01)。敲低-文拉法辛组小鼠海马的AnkG及MAP2含量显著高于敲低-NS组小鼠对应脑区的表达水平(P<0.05)。结论文拉法辛能够改善Ank3敲低引起的抑郁相关症状,文拉法辛治疗抑郁症的机制可能与升高前额叶皮质及海马AnkG水平有关。