聚氨酯/多壁碳纳米管复合材料电纺丝支架对成纤维细胞生长的促进

应用电纺丝方法制备纤维直径为300～500nm的多壁碳纳米管/聚氨酯复合材料,以无纺膜材料作为细胞支架,选择在促进组织修复和再生中起重要作用的成纤维细胞株作为实验细胞。通过扫描电镜对多壁碳纳米管/聚氨酯无纺膜及聚氨酯无纺膜的微观形貌进行表征;通过细胞黏附实验、增殖实验以及细胞骨架发育观察,探讨无纺膜的微观纳米拓扑结构及多壁碳纳米管的复合对细胞的作用;并进一步采用双层细胞培养装置,分析多壁碳纳米管/聚氨酯无纺膜通过细胞通讯途径对在其他材料上生长的细胞生长行为的影响。实验结果表明,无纺膜中的纳米纤维网络结构和多壁碳纳米管成分不仅能够显著促进细胞的黏附和增殖,而且有利于细胞的迁移和聚集;另外,生长在多壁碳纳米管/聚氨酯无纺膜支架上的细胞可能通过旁分泌方式将某些生物大分子分泌到细胞外液中,经局部扩散作用于在其他材料上生长的细胞,促进其增殖。因此,多壁碳纳米管/聚氨酯纳米纤维无纺膜为细胞提供了接近天然细胞外基质的人造微环境,显示了该支架在引导组织修复和再生中的应用潜力。

α-玉米赤霉醇对肿瘤坏死因子α诱导的人内皮细胞血红素氧化酶1基因表达及胞质游离钙水平的影响

目的探讨α-玉米赤霉醇对肿瘤坏死因子仅（TNF-α）刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）血红素氧化酶1（HO-1）表达及胞质游离钙水平的影响及其作用机制。方法用小分子RNA干扰（siRNh）技术消除HUVEC的NADPH氧化酶p47p^hox亚基；用分子探针2，7-DCF测定细胞内活性氧（ROS）的产生量；用RT-PCR测定HO-1 mRNA的表达以及用细胞免疫组化方法测定HO-1蛋白的表达；以Fluo-3／AM为探针，用激光共聚焦显微镜测定胞质游离钙整体水平的变化。结果TNF-α刺激使细胞内ROS的产生量较对照组增加了155％（228.3±50.6比89.4±23.7，P〈0.05）；α-玉米赤霉醇预处理呈剂量依赖地抑制TNF-α对ROS的诱导效应；p47p^hox的siRNA完全阻断TNF-α诱导ROS的产生。TNF-α刺激使细胞内HO-1的mRNA表达水平较对照组增加了145％（0.88±0.10比0.36±0.11，P〈0.01），蛋白的表达也明显增加；α-玉米赤霉醇预处理呈剂量依赖地抑制TNF-α对HO-1 mRNA表达的诱导效应；α-玉米赤霉醇预处理及转染p47p^hox的siRNA均明显降低TNF-α诱导的HO-1蛋白的表达。TNF-α刺激使内皮细胞胞质游离钙整体水平比对照组增加179％（107.3±4.9比38.5±0.6，P〈0.01）；α-玉米赤霉醇预处理及转染p47p^hox的siRNA分别使TNF-α诱导的胞质游离钙水平降低46％（58.5±0.3比107.3±4.9，P〈0.01）及57％（46.3±2.1比107.3±4.9，P〈0.01）。结论ROS仅部分介导TNF-α对HUVEC中HO-1表达的诱导作用，α-玉米赤霉醇主要通过抑制NADPH氧化酶途径产生的ROS而降低TNF-α诱导的HO-1表达及胞质游离钙水平增加。