羧胺三唑与小剂量地塞米松合用对A549肺癌移植瘤生长抑制作用的研究

目的观察羧胺三唑(CAI)对A549肺癌移植瘤生长及肿瘤环境中肿瘤坏死因子-α含量和血管生成的影响,研究小剂量地塞米松(DEX)是否能通过降低肿瘤环境中肿瘤坏死因子-α含量和抑制血管生成增强CAI对移植瘤生长的抑制作用。方法向裸鼠腋下接种A549肺癌细胞,建立A549肺癌移植瘤模型,接种第2天随机分5组,并开始给药,分别是PEG400溶剂对照组(每天一次灌胃给药,0.1ml/10g体重)、CAI组(每天一次灌胃给药,20mg/kg)、DEX组(每周两次背部皮下注射给药,1mg/kg)、CAI与DEX合用组(CAI,每天一次灌胃给药,20mg/kg;DEX,每周两次背部皮下注射给药,1mg/kg)及英夫利昔单抗组(每周两次腹腔注射给药,10mg/kg)。40d后剥离瘤组织,拍照并称重;将部分新鲜肿瘤组织速冻后制作冰冻切片,进行CD31荧光染色;另一部分新鲜瘤组织制备匀浆后用ELISA方法对其TNF-α含量进行检测。结果 CAI、DEX和TNF-α抗体(英夫利昔单抗)对移植瘤生长均有抑制作用,而CAI与DEX的联合应用抑癌作用最强,PEG、CAI、DEX、COM和TAB组瘤重分别为(0.23±0.04)、(0.21±0.02)、(0.17±0.04)、(0.12±0.03)和(0.17±0.04)g。CD31血管染色显示,CAI和DEX均能减少肿瘤组织内的血管数目,两者合用在极大程度上抑制了血管的生成;CAI能够降低肿瘤组织内TNF-α含量,与DEX合用使TNF-α含量降至更低水平,PEG、CAI、DEX、COM和TAB组肿瘤组织匀浆中TNF-α的含量分别为(933.9±286.8)、(636.1±157.4)、(684.9±170.1)、(364.7±50.1)和(606.8±190.3)pg/mg蛋白。结论 CAI不仅能够直接影响肿瘤细胞的增殖和凋亡,还能通过调控肿瘤环境中的TNF-α抑制血管的生成,从而减缓肿瘤的生长,这可能是CAI发挥抗肿瘤作用一个新的机制。小剂量DEX与CAI联合用药对移植瘤生长的抑制作用明显增强,优化了CAI的抗肿瘤作用,可能成为一种新的联合用药方案。

葡萄糖转运子9及其遗传多态性在尿酸代谢和尿酸相关并发症中作用的研究进展

当前国际和国内临床指南均推荐将尿酸控制在合理的水平。葡萄糖转运子9(GLUT9)是高效的尿酸转运蛋白,通过感知局部器官的尿酸水平,调控其他器官对尿酸代谢的调节,在不同病理生理条件下维持全身血尿酸水平平衡。同时,GLUT9的遗传多态性研究和分子学研究显示,GLUT9可直接或间接参与尿酸相关并发症的发生发展。除遗传多态性对GLUT9的影响外,多种内源性因子和外源性药物亦可影响GLUT9的表达和功能,调控尿酸。对GLUT9结构和功能的深入了解,对开发新型降尿酸药物,维持合理的血尿酸水平,控制尿酸相关并发症具有重要意义。

RGS蛋白对阿片受体-腺苷酸环化酶的调节及阿片受体对钾通道调节的研究进展

本文介绍了RGS蛋白对阿片受体-腺苷酸环化酶活性的调节;阿片受体长期激活对细胞内钙离子、细胞浆酸碱度以及线粒体膜电势的影响;以及阿片受体不通过G蛋白对细胞膜外向整流钾通道的调节机理。

羧胺三唑与SAHA联合用药抑制Lewis肺癌细胞的体内外研究

目的研究羧胺三唑(CAI)与组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)联合用药对Lewis肺癌细胞的抑制作用,对比联合用药与单药使用的药效差异。方法采用SRB法检测体外培养的Lewis肺癌细胞系在单独使用CAI或SAHA以及联合用药时的细胞活力变化;建立C57小鼠Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型,随机分为4组:溶剂对照组、CAI组、SAHA组、CAI+SAHA联合治疗组,连续给药25天,观察各组小鼠体质量变化、肿瘤体积、肿瘤抑制率及动物死亡情况。结果 CAI分别和两种剂量的SAHA联合用药后,对Lewis肺癌细胞活力的抑制作用高于CAI组,细胞活力的抑制率分别达到46.09%±5.50%和54.43%±3.69%,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。动物实验显示,与对照组相比,CAI组、SAHA组以及联合治疗组均抑制小鼠皮下肿瘤生长,且联合治疗组的肿瘤体积小于其他3组;除对照组外,各药物治疗组动物死亡率均低于20%。结论 SAHA与CAI联合使用能显著抑制Lewis肺癌细胞活力,并在Lewis肺癌细胞荷瘤动物中显现抗瘤增效作用。

常见啮齿类动物行为学实验在抑郁症研究中的应用

抑郁症是一种常见的精神疾患,在抑郁症的研究过程中,行为分析作为基本工具必不可少,我们可以在分子和细胞水平上获得的大量信息均需要通过动物行为予以充分验证。文章通过对啮齿类动物常用行为学实验进行梳理,对不同行为学实验使用目的进行了归纳,并对影响因素进行了分析,以促进行为学实验技术更好地在抑郁症研究中发挥作用。

长期精神压力与髓系来源抑制性细胞MDSC的肿瘤免疫抑制功能

临床研究发现,精神心理因素与癌症的发生发展有密切的关系。长期的精神压力会增加癌症的风险,而罹患癌症也往往影响患者的情感和社会功能,从而影响癌症的治疗,一些研究已经证实长期精神压力会促进髓系来源抑制性细胞(MDSC)免疫抑制功能。所以文章主旨就是探讨长期精神压力与MDSC的肿瘤免疫抑制功能的关系。

肿瘤中胞外热休克蛋白90的研究现状

热休克蛋白90为细胞内一种重要的伴侣蛋白,其可调控众多癌相关客户蛋白的成熟和稳定,不仅在肿瘤细胞内大量存在,同时也存在于肿瘤细胞的胞外空间,即定位在细胞的表面或分泌到细胞外。越来越多的研究表明胞外热休克蛋白90可以促进肿瘤细胞的侵袭和转移,并可作为癌症治疗的一个重要的作用靶点。

羧胺三唑对脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞iNOS蛋白的表达和NF-κB活化的影响

目的：本课题组前期的研究结果显示，羧胺三唑（CAI）在多种急性、亚急性和慢性炎症模型中均具有良好的抗炎作用。本研究以正常大鼠的腹腔巨噬细胞为研究对象，探讨可能具有潜在抗炎作用的抗肿瘤药物CAI对与多种炎症相关因子的体外调节作用。方法：收集正常大鼠的腹腔巨噬细胞，待细胞贴壁后，将一系列浓度的CAI与上述细胞共同孵育48小时后，利用MTT法测定CAI对正常大鼠腹腔巨噬细胞活力的影响。分别将5μm、10gm、20gm和40μm的CAI加入已经贴壁的巨噬细胞中，共同培养24小时，同时加入浓度为10μg／mL的脂多糖（LPS）以诱导上述细胞的活化。培养基上清中NO的含量和TNF-α的水平分别用硝酸还原法和TNF—αELISA检测试剂盒进行测定，用Westernblot法测定iNOS蛋白的表达和NF—κB活化情况。

羧胺三唑通过肿瘤相关巨噬细胞间接抑制肿瘤细胞的迁移

目的通过体外诱导探索肿瘤相关巨噬细胞(TAM)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对肿瘤细胞增殖和迁移的影响;在此基础上研究羧胺三唑(CAI)是否可以通过影响TAM及其来源的TNF-α间接抑制肿瘤细胞的增殖和迁移。方法建立腹腔巨噬细胞或RAW264.7细胞与Lewis肺癌细胞(LLC)的共培养体系,研究巨噬细胞对LLC细胞增殖和迁移的影响;观察TNF-α或其中和抗体对LLC增殖或迁移的影响;向共培养体系中加入CAI和(或)地塞米松(DEX),观察药物对巨噬细胞诱导的LLC增殖的影响;用CAI和(或)DEX预先处理RAW264.7细胞,然后检测不同药物处理组RAW264.7细胞诱导LLC细胞迁移和TNF-α表达的差异。结果与腹腔巨噬细胞共培养的LLC细胞比单独培养的LLC细胞的增殖显著增加,在最为明显的一组中,前者比后者的增殖增加(422.5±77.7)%;与RAW264.7细胞共培养的LLC细胞比单独培养的LLC细胞迁移增加(98.8±6.2)%。在这两个过程中,TNF-α均发挥重要作用,0.1 ng/ml TNF-α增加LLC细胞增殖的作用显著,0.1μg/ml TNF-α中和抗体即可显著抑制巨噬细胞对LLC细胞的迁移诱导作用;CAI预处理的RAW264.7细胞促进LLC细胞迁移的能力减弱,其中TNF-α表达相比仅用LLC条件培养基诱导的对照组显著降低(CAI预处理组与对照组TNF-α的相对表达量为0.66±0.03 vs.1.00±0.05,P<0.01)。结论巨噬细胞和TNF-α对LLC细胞的增殖和迁移有显著影响;CAI可以通过下调肿瘤条件诱导的巨噬细胞中的TNF-α水平间接抑制肿瘤细胞的迁移。

羧胺三唑抑制肺癌Lewis细胞生长的机制及抑瘤作用优化探索

目的研究羧胺三唑(CAI)对小鼠肺癌Lewis细胞(LLC)中环腺苷酸(c AMP)相关磷酸二酯酶(PDE)活性的影响;研究腺苷酸环化酶激动剂Forskolin是否能增强CAI的抑瘤作用。方法通过改良的Thompson和Appleman两步同位素法对LLC细胞中c AMP相关PDE的活性进行检测,以PDE4特异性抑制剂洛利普兰(Rol)作为CAI的阳性对照;通过台盼蓝斥染实验对LLC活细胞进行计数,检测Forskolin对CAI抑瘤作用的影响,以双丁酰环腺苷酸(db-c AMP)验证LLC细胞对c AMP含量增加的敏感性。结果 CAI可剂量依赖性地抑制LLC细胞中c AMP相关PDE的活性,CAI与Rol的IC50分别为5.62×10-6 mol/L和1.88×10-8 mol/L。Forskolin和db-c AMP均可剂量依赖性地抑制LLC细胞的活性。CAI与Forskolin合用的抑瘤作用显著优于CAI单用,CAI5μmol/L单用时的抑制率为(32.9±10.3)%,与Forskolin 10μmol/L合用后抑制率可达(67.4±3.76)%(P<0.05)。结论抑制c AMP相关PDE的活性可能是CAI抑制LLC细胞活力的机制之一。通过与升高c AMP的药物如Forskolin合用,可进一步优化CAI的抗肿瘤作用。

RGS蛋白在G蛋白信号转导中的作用与调节

RGS蛋白是近年来不断发现的新的蛋白家族 ,它们的结构中都包含一个高度保守的 RGS结构域。目前从 RGS结构域的结构及其同源性出发 ,对 RGS蛋白与 Gα亚单位及 Gβγ二聚体的相互作用、RGS蛋白的调节活性及其动力学过程、RGS蛋白调节作用的分子机制及其生物学效应等进行了广泛探讨。研究发现 ,由于高度保守的RGS结构域的存在 ,几乎所有的 RGS蛋白都具有 GAP活性 ,并对 G蛋白信号转导发挥负性调节作用。G蛋白信号转导是很多胞外信号引发细胞生理功能改变的共同途径 。