RNA干扰survivin基因对卵巢癌细胞生长凋亡及药物敏感性的影响

目的探讨下调survivin基因对卵巢癌顺铂（DDP）耐药细胞株SKOV3／DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的影响。方法构建survivin基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体pSilencer-survivin，用脂质体方法转染SKOV3／DDP细胞株，另设未转染组和转染pSilencer-control组作为对照。显微镜下观察转染前后细胞的变化，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot分别检测survivin mRNA及蛋白的表达，二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测细胞生长情况，流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化。各组细胞加入DDP，检测其对DDP药物敏感性的影响。结果survivin siRNA可明显下调SKOV3／DDP细胞中survivin mRNA及蛋白表达水平。SKOV3／DDP细胞生长受到明显抑制，生长曲线低平。转染48h后，转染pSilencer-survivin组细胞凋亡率为19．1％，明显高于未转染组（2．6％）和转染pSilencer-control组（3．5％），G1／G0期细胞所占的比例增高，而G2／M期细胞所占的比例降低。转染pSilencer-survivin组细胞的IC50明显降低，为1．16μg/ml。结论survivin siRNA可下调SKOV3／DDP细胞中survivin的表达，使细胞生长减慢，凋亡增加，对DDP的药物敏感性增强。