肿瘤分子生物学是基础医学研究的前沿

0 引言 医学是探索人类疾病发病机制及治疗方法的科学.现代医学的快速发展揭示了多种人类疾病的发病机制,并使对多数疾病的预防和治疗成为可能.但仍有许多疾病,尤其是肿瘤性疾病,其发病机制不甚明确,更缺乏有效的预防和治疗手段,严重危害人类生命和健康.因此,迫切需要对肿瘤性疾病的发病机制和治疗措施进行广泛、深入、细致的研究.

CD3AK细胞的生物学特性及其抗肿瘤作用

CD3AK细胞是用抗T细胞表而CD3分子的单克隆抗体激活的新型杀伤细胞，在肿瘤的免疫疗法中愈来愈受到重视。本文用抗CD3单克隆抗体(北医太免疫室提供)和rIL-2(日本盐野义制药株式会社产品)共同刺激人外周血单个核细胞(PBMC)，诱导CD3AK细胞，系统地研究了其生物特性及其体外抗肿瘤活性并与LAK细胞作比较。

Ets转录因子家族在发育和肿瘤发生中作用的研究进展

Ets转录因子家族包括30多个成员,具有复杂的结构和功能,通过调节细胞的增生、分化、凋亡及细胞与细胞间的相互作用,在许多生理和病理过程中发挥重要的调控作用。Ets家族成员在发育过程中特异性时空表达与其对发育的调控作用密切相关,他从细胞、组织、器官不同的水平调控发育过程,特别是在血管发生和免疫系统的发生中发挥重要作用。此外,Ets在肿瘤的侵袭、转移和血管生成过程中发挥重要作用,主要与调节细胞外基质(ECM)酶的转录活性有关。Ets转录因子受多种信号通路的调控,MAP激酶(Erk,p38和JNK)、Ca^(2+)依赖的信号通路以及TGF-β。

对“中国优生科学的建立”的补充资料

回忆了 2 0世纪 70年代末至 80年代初中国优生科学建立过程中的一些史实。

HER-2/neu基因在肿瘤免疫治疗中的研究进展

原癌基因HER2 /neu是表皮生长因子受体家族中的一员 ,在多种人类恶性肿瘤中存在其扩增及过度表达 ,HER2 /neu的过表达与肿瘤病人不良总体预后及较短存活期相关。近年来以HER2 /neu为靶点的抗肿瘤免疫治疗发展较快 ,在抗HER2 /neu抗体 (Herceptin) ,多肽疫苗 ,DNA疫苗等方面取得了很大进展。

单核苷酸多态性分析技术及其在肿瘤研究中的应用

单核苷酸多态性 (SNP)是第 3代遗传标记 ,由于其在基因组中分布的高密度性 ,被认为在多基因疾病的诊断及治疗方面有着广阔的应用前景。

中国汉人HLADQAl基因对系统性红斑狼疮的遗传易感性研究

利用ＨＬＡ基因的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ核苷酸分型技术，以等位基因特异性的限制性内切酶（ＡｐａｌⅠ、ＢｓａｊⅠ、ＨｐｈⅠ、ＦｏｋⅠ、ＭｂｏⅡ、ＭｎｌⅡ）消化ＤＱＡｌ座位特异的ＰＣＲ扩增产物，研究了上海及其附近地区中国汉人ＨＬＡ－ＤＱＡｌ基因与系统红斑狼疮的遗传关联。发现系统红斑狼疮ＤＱＡｌ＊０１０２（３６．５％，ＲＲ＝２．２５，Ｐ＜０．０５，ＥＦ＝０．２０）及＊０４０１（１５．４％，ＲＲ＝１２．４２，Ｐ＜０．００５，ＥＦ＝０．１４）显著增加，而ＤＱＡｌ＊０５０１（１１．５％，ＲＲ＝０．２１，Ｐ＜０．００５，ＰＦ＝０．３１）和＊０．０６０１（３．９％，ＲＲ＝０．２７，Ｐ＜０．０５，ＰＦ＝０．０９）显著下降。排除ＤＱＡｌ＊０４０１的影响后，＊０１０２频率的升高表现得更加明显（ＲＲ＝２．８４，Ｐ＜０．０１）。上述发现显示：ＤＱＡｌ＊０１０２及＊０４０１对ＳＬＥ有遗传易感作用，而ＤＱＡｌ＊０５０１和＊０６０１有遗传抵抗作用，并提出了有关可能的单体型。

细胞周期蛋白cyclin B1与肿瘤

细胞周期蛋白cyclin B1与细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent protein kinases,CDKs)结合,受磷酸化、去磷酸化调节,所形成的活性复合物为MPF即细胞促分裂因子或M期促进因子,能转位入核,磷酸化其核内底物,促进细胞的G2/M期转变;并能通过磷酸化调节多种蛋白的活性与分布而参与纺锤体的形成和染色体的分离。cyclin B1在许多肿瘤中异常表达,呈现出癌基因的特性,cyclin B1过表达与定位的改变受p53、c-myc、H-Ras、Aurora A、Gadd45等多个基因的调节,而且与肿瘤发生发展、预后、诊断和治疗密切相关。

不同单核细胞亚群来源树突状细胞的特性及其在肿瘤免疫治疗中的作用

树突状细胞由多种表型特征及生物学功能特性不同的亚群组成,单核细胞源性树突状细胞是其中的重要组成群体。近年来研究表明,人体内外周血单核细胞由CD14++CD16-和CD14+CD16+两个群体组成,小鼠体内则由CD115+Ly6Chigh和CD115+Ly6Clow组成;不同亚群单核细胞可发育分化成为具有不同表型特征的树突状细胞,在体内外诱导产生不同类型的免疫应答反应。小鼠体内CD115+Ly6Clow群体是机体稳定状态下外周组织器官树突状细胞的重要前体细胞,CD115+Ly6Chigh单核细胞是炎症状态下外周淋巴器官中树突状细胞的重要来源。CD115+Ly6Chigh来源的树突状细胞,一方面可以直接提呈外周摄取的抗原,另一方面还可将MHC-Ⅰ/抗原肽复合物传递给淋巴组织中原住性树突状细胞。不同来源树突状细胞间的协同和交互作用确保机体诱发针对不同外源抗原刺激的有效免疫应答。

pcDNA3.1-Egr.1p-p16基因联合放射治疗对裸鼠肿瘤的作用

目的:探讨pcDNA3.1 Egr.1p p16基因联合放射治疗移植人胰腺癌细胞JF 305裸鼠的抗肿瘤作用的 适宜照射剂量和质粒注入量。方法:不同剂量X射线照射(2,10,20Gy)及瘤内不同量脂质体包裹的pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒(10,20,30μg)注入接种JF305胰腺癌细胞的裸鼠体内,测定各组裸鼠体积以观察各种处理抑瘤效 应的差异,并用RT PCR检测放射治疗后48h各组肿瘤局部p16mRNA水平。结果:质粒注入后接受20GyX射线 照射组照射后4～28d,肿瘤生长速率明显低于2Gy和10Gy照射组(P<0.05)。质粒注入量为20μg或30μg的 联合治疗组照射后4～28d,肿瘤生长速率明显低于注入量为10μg的联合治疗组(P<0.05)。单纯接种 pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒组和接种pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒照射组小鼠的肿瘤组织内有p16mRNA表达,且 pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒照射组的p16mRNA水平明显高于单纯pcDNA3.1 Egr.1p p16质粒组(P<0.05)。结 论:pcDNA3.1 Egr.1p p16基因联合放射治疗小鼠体内抗肿瘤作用的适宜射线照射剂量为20Gy,质粒注入量为20 μg;pcDNA3.1 Egr.1p p16基因联合放射治疗的抗肿瘤作用明显优于单纯放射治疗或单纯基因治疗,这可能与辐射 激活Egr.1p基因后增强抑瘤基因p16的表达有关。

8号和20号染色体拷贝数改变辅助食管癌外周血循环肿瘤细胞鉴定

[目的]建立基于细胞学鉴定食管鳞癌(ESCC)外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的技术。[方法]通过偶联CD45抗体的免疫磁珠去除白细胞,富集食管癌外周血稀有细胞的"负性富集"策略,结合抗CK8/18/19免疫荧光染色(IF)和8/20号染色体荧光原位杂交(FISH)鉴定CTCs。[结果]食管癌外周血CK8/18/19+/CD45-的CTCs检出率为43.8%(7/16),其中80%伴有8/20号染色体非整倍体的改变(AC)。食管癌细胞WHCO1、EC0156和KYSE150的8号AC分别为77.3%、78.6%和75%;KYSE150的20号AC为77.9%。外周血一些胞浆胞膜不完整、具有异型性的细胞核伴有8/20号AC改变。[结论]食管癌8/20号AC可以作为判断食管癌外周血CTCs恶性表型的标准,结合CK8/18/19+/CD45标准,不但可以鉴定具有完整细胞结构的CTCs,还可以鉴定胞浆、胞膜不完整或裸核样的CTCs的恶性表型。

CpG ODN的免疫活性及其在肿瘤治疗中的作用

含有未甲基化CpG基序的寡核苷酸序列(CpG ODN)能激活宿主的免疫系统,引起先天免疫应答和获得性免疫应答。CpG ODN诱导产生的细胞因子、活化的各种免疫细胞有明显的抗肿瘤作用。CpG ODN可通过多种途径发挥抗肿瘤作用,包括作为单独治疗剂、免疫佐剂或和其他免疫疗法共同治疗,也可以与放疗、化疗以及外科手术联合应用治疗肿瘤。CpG ODN的抗肿瘤活性已经在动物模型中得到证明,目前正以CpG ODN的这一特性为基础开发新型的抗肿瘤药物。有几种CpG ODN新药已经进入临床试验阶段,为肿瘤患者的治疗提供新的途径。

PCNA反义寡核苷酸对人不同恶性肿瘤细胞体外增殖活性的影响

目的 :探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)反义寡核苷酸 (ASO)对人不同恶性肿瘤细胞体外生长的影响。方法 :PCNA ASO在脂质体 (lipofectin)介导下转染膀胱癌EJ细胞、结肠癌HCT 8细胞、肺癌GLC 82细胞及恶性胶质瘤BT 32 5细胞 ,运用细胞计数、MTT、流式细胞术、克隆形成及免疫组织化学方法分析其抗瘤活性及机制。结果 :PCNA ASO对上述 4种肿瘤细胞的体外生长均有明显抑制作用 ;不同细胞敏感性差异较大 ,其中以GLC 82细胞最敏感 ,HCT 8细胞最不敏感 ;4种细胞生长均受阻于G1期。结论 :PCNA在恶性肿瘤细胞的增殖中是必需的。PCNA

体外构建靶向脂质体靶向杀伤肿瘤血管内皮模型

目的 :于体外构建靶向脂质体标杀肿瘤血管内皮的小鼠模型并进行验证。方法 :利用肿瘤细胞分泌的IFN γ刺激内皮细胞表达MHCⅡ ,以连有抗MHCⅡ抗体的免疫载药脂质体靶向杀伤内皮细胞。内皮细胞的MHCⅡ阳性率由细胞流式仪监测。免疫脂质体识别靶细胞的能力由结合实验验证。细胞毒实验采用的是MTT检测法。结果 :肿瘤细胞分泌的IFN γ可刺激内皮细胞表达MHCⅡ。内皮细胞SVEC与转染IFN γ基因的神经母细胞瘤C130 0 (Muγ)的上清培养 2d后 ,约有 2 3%的上皮细胞表达MHCⅡ。连有抗MHCⅡ抗体的脂质体可与表达MHCⅡ抗原的内皮细胞特异结合。结合率可达非特异性脂质体的 3倍。载药的抗MHCⅡ脂质体可特异杀伤MHCⅡ阳性内皮细胞。结论 :免疫靶向脂质体可于体外特异杀伤因肿瘤分泌的细胞因子的作用而呈递抗原的内皮细胞。

MHC基因分子进化研究进展

本文阐述了主要组织相容性复合体(MHC)等位基因的年龄和进化速度,等位基因多态性的产生与保持机制,包括基因突变、基因转换、多态性超显性选择、依赖频率的选择、会聚进化与平衡选择、多样性选择、杂化交配等。

人肿瘤坏死因子-α基因真核表达载体的构建

目的 :构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF α)基因的真核表达载体。方法 :应用RT PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中 ,扩增出hTNF αcDNA ,连接至载体pMD 18 Tvec tor中 ,经酶切鉴定与序列测定证实后 ,以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3.1 myc his(- )A ,B ,C的相应酶切位点 ,通过RT PCR方法检测其在体外转导绒癌耐药细胞后hTNF α基因的表达。结果 :自胎盘中克隆的hTNF αcDNA经序列测定证实 ,与Genbank的序列完全一致 ;用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定证实 ,克隆基因正确插入载体pcDNA3 1 myc his(- )A ,B ,C。经脂质体介导转导绒癌耐药细胞后 ,检测到其在转导的细胞中稳定表达。结论 :通过DNA重组技术成功地构建了可在体外稳定表达hTNF

Aurora-A在细胞中的功能以及与肿瘤的关系

Aurora蛋白激酶家族,在细胞的有丝分裂期发挥着重要作用。目前分为3种即Aurora-A、Au-rora-B、Aurora-C。其中Aurora-A定位于中心体和纺锤体,主要参与中心体的成熟、分离和纺锤体形成。此外Aurora-A可以参与p53通路的调节,细胞凋亡和分裂之间平衡的调节等。Aurora-A高表达可引起中心体异常扩增,异倍体产生。在肿瘤组织中的研究显示它在多种肿瘤乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、胃癌等组织中存在着高表达,并且与某些肿瘤的预后相关。Aurora-A可能通过多种机制参与了肿瘤的发生和发展。

磁性药物靶向治疗肿瘤

近年来 ,随着生物技术、纳米技术和物理化学等多学科的飞速发展 ,磁性药物靶向治疗有了长足进步。本文对其历史。