高通量药物筛选生物活性分析技术研究进展

A variety of technologies continue to develop for high throughput screening This review summarized recent advances of bioassay techniques used in high throughput screening The principles, applications, characteristics and other parameters of these methods were described such as homogeneous time resolved fluorescence, fluorescence polarization, fluorescence resonance energy transfer, fluorescence correlation spectroscopy and scintillation proximity

药物筛选新技术与中药现代化研究

近年来，随着科学技术的进步，药物筛选技术发生了巨大变化，出现了以快速、微量、大规模为特点，应用多种先进技术手段的高通量药物筛选方法。应用现代科学技术进行中药现代化研究，是促进中药现代化研究的重要途径之一。本文通过介绍最新技术，讨论了药物筛选新技术在中药现代化研究中的应用，主要探讨了在中药活性成分、中药理论、中药复方、中药作用机制等方面的研究中，药物筛选新技术的应用可能性和已有的尝试，从方法学的角度为中药现代化研究提供新的思路，供研究人员参考。

新的药物靶点肝X受体

核受体是一类能与DNA应答元件结合的配体依赖性激活的转录调控因子。肝X受体(liver X receptors,LXRs)是核受体超家族的成员,一种体内胆固醇感受器,控制着胆固醇的吸收、代谢、转运和分解等过程。LXRs可作为新的胆固醇代谢异常相关疾病的治疗靶点,LXRs激动剂可用于治疗动脉粥样硬化、Ⅱ型糖尿病、阿尔茨海默病(AD)、高血压、肿瘤、胆结石、肺炎性疾病及皮肤病等。以LXRs为靶点,寻找LXRs特异性激动剂/拮抗剂,或能影响LXRs发挥转录因子作用的物质,对研究代谢性疾病、AD等的发病机制及发现新的药物将是很好的途径。

I型糖尿病治疗药物的合理用药

近十年我国糖尿病发病率翻两倍，糖尿病患者人数仅次于印度位居世界第二位，已经上升为影响人们生命健康的第二杀手。其中约10％为I型糖尿病，90％为Ⅱ型糖尿病。I型糖尿病主要表现为自身胰岛细胞功能绝大部分甚至全部丧失，到目前为止，I型糖尿病治疗主要依赖胰岛素。据加拿大安全用药实践研究所报道，在加拿大用药问题较多的前五位药物中，

慢性脑缺血大鼠脑组织线粒体蛋白质组与能量代谢相关性研究

目的探讨慢性脑缺血大鼠脑组织线粒体蛋白质组与能量代谢相关性,以期揭示慢性脑缺血疾病的线粒体机制。方法通过差速离心分离大鼠脑线粒体,检测脑线粒体能量代谢相关的氧化磷酸化指标,应用凝胶电泳技术构建大鼠脑线粒体蛋白质组表达图谱;通过结扎大鼠双侧颈总动脉建立大鼠慢性脑缺血模型,分析比较慢性脑缺血时脑线粒体蛋白质表达谱的改变,从脑线粒体蛋白质组角度阐述慢性脑缺血与能量代谢的关系。结果实验发现,与正常对照组相比,慢性脑缺血大鼠脑线粒体ADP/O及氧化磷酸化效率明显降低,蛋白质组结果显示慢性脑缺血大鼠NADH脱氢酶复合体亚基、细胞色素C氧化酶亚基、丙酮酸脱氢酶(硫辛酰胺)β、乙酰辅酶A乙酰转移酶、烯醇化酶、醛缩酶C等表达量降低,而3-含氧酸辅酶A转移酶、4-氨基丁酸转氨酶等表达量增加。结论实验表明,慢性脑缺血大鼠能量代谢功能及能量代谢相关酶发生了很大变化,慢性脑缺血疾病机制与线粒体具有密切关系。

孕马尿提取物中4种化学成分的雌激素活性研究

目的 研究孕马尿提取物中四种化学成分的雌激素活性。方法 研究四种成分3β-羟基-5α-16-孕甾烷-20-酮（3β-hydroxy-5α-pregn-16-en-20-one,HP）、5β-孕甾烷-3β,16α,20α-醇（5β-pregnane-3β,16α,20α-triol,PT）、3β,16α-脱氢-5α-孕甾烷-20-酮（3β,16α-dihydroxy-5α-pregnan-20-one,DHP）、3β-羟基-5α-雄甾烷-17-酮（3β-hydroxy-5α-androstan-17-one,HA）对人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖效应（E-screen实验）;利用Luciferase报告基因与雌激素反应元件重组,与转染对照质粒pRL-cmv、雌激素受体ERα或ERβ质粒共同瞬时转染中国仓鼠卵巢细胞CHO,构建雌激素活性筛选模型,检测四种成分的雌激素活性。结果 E-screen实验结果显示,HP、PT、DHP、HA在1~50μmol·L-1内均能诱导MCF-7细胞增殖,显示出雌激素活性。与雌二醇（17α-estro-diol,E2）的增殖效应（proliferativeeffect,PE）、相对增殖效应（relativeproliferativeeffect,RPE）和EC50相比,HP、PT、DHP、HA的雌激素活性均小于E2的雌激素活性。Luciferase报告基因实验结果显示,HP、PT、DHP、HA在1~50μmol·L-1内均能诱导Luciferase表达,显示雌激素活性。与E2的EC50值相比,HP、PT、DHP、HA的雌激素活性均弱于E2的雌激素活性。结论 HP、PT、DHP、HA均具有雌激素活性,与E2的雌激素活性相比,四种化合物均发挥弱雌激素效应。

依达拉奉的多晶型研究

目的研究依达拉奉多晶型现象,寻找对临床有效的优势药用晶型。方法通过多种物理或化学方法制备获得依达拉奉的4种晶型样品,采用单晶X射线衍射技术(SXRD)、粉末X射线衍射技术(PXRD)、差示扫描量热技术(DSC)、红外光谱分析技术(IR)与熔点技术(MP)对上述4种晶型样品进行表征;通过多种影响因素实验对晶型样品的稳定性进行评价;SD大鼠灌胃给予不同晶型依达拉奉,采用高效液相色谱法检测不同时间大鼠血药浓度变化,比较不同晶型的药动学特点。结果通过晶型筛查发现依达拉奉存在4种晶型(晶A型、晶B型、晶C型、晶D型),并获得了4种晶型纯品最佳制备方法;证明PXRD法、DSC法、IR法均可实现对4种晶型物质状态的表征和鉴别;发现不同晶型会对依达拉奉的稳定性及药动学产生影响。结论通过对依达拉奉多晶型现象进行系统研究,阐明了其多种晶型样品的物质组成、制备方法、晶型稳定性及药动学特点,确定了依达拉奉晶A型为优势药用晶型;该研究结果为优势药用晶型的选择和药品质量标准的提高提拱了数据支持和技术支撑。

抑郁症动物模型的转换研究

据世界卫生组织预测,抑郁症将成为"2020年全球疾病负担"排名第二的重大疾病,防治抑郁症的创新药物研发已成为医药科学发展的重要内容。本文在总结近年来关于抑郁症临床治疗和抑郁症动物模型进展的基础上,围绕"如何提高抑郁症动物模型临床预测效度"这一亟待解决的问题,采用"转化医学"的研究模式,提出关于抑郁症动物模型转换研究的一些策略,以期能为建立临床预测效度高的抑郁症动物模型和创新抗抑郁药物研发的革命性突破奠定基础和提供思路。

生长发育过程中血细胞流变学特性的研究进展(综述)

血液中红细胞、白细胞和血小板等在体内行使其生理功能的过程中经历了各自的分化发育过程,这些过程伴随有细胞流变学特性的变化。在此主要综述近年来国内外关于血液细胞在分化发育中的流变学研究,拓展了生物流变学和生物物理学的研究领域。

奥美拉唑三种晶型在大鼠体内的药代动力学比较研究

奥美拉唑（omeprazole）系第一代苯并咪唑类质子泵抑制剂，具有强烈抑制胃酸分泌及胃粘膜修复的作用，为治疗消化性溃疡的首选药。但在临床应用时发现国内外不同厂家的制剂药效不一，价格也悬殊较大。为了探索奥美拉唑药效与晶型之间的关系，本实验对药物所分析室制备获得的三种奥美拉唑晶型（晶C、晶D、晶E）在大鼠体内的药代动力学过程进行了比较研究。

计算机药物筛选方法探讨

本文论述了计算机药物筛选方法及其应用程序的开发,并通过建立乙酰胆碱酯酶(AchE)抑制剂的筛选模型,检测化合物样品的生物活性,比较生物活性结果与计算机筛选结果,检验了计算机药物筛选方法的可靠性.结果表明,计算机药物筛选方法在创新药物研究中具有重要意义,但需要进一步改进,并结合其他方法来提高它的可靠性.

内质网应激与脑缺血/再灌注损伤

内质网是蛋白质合成、加工和转运的主要场所。内质网应激是指缺血缺氧、葡萄糖或营养物质缺乏、药物、毒素等因素破坏内质网的稳态,出现错误折叠与未折叠蛋白在腔内聚集以及Ca2+平衡紊乱的状态。内质网早期或未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)能提高细胞在有害因素下的生存能力。但剧烈或者持久的ERS,能诱发凋亡机制。研究表明,脑缺血/再灌注后发生ERS,导致神经细胞凋亡和坏死,是引起再灌注损伤的重要原因。本文对近年来ERS在细胞凋亡调控中的重要作用及脑缺血/再灌注损伤与ERS的关系进行综述,这对脑卒中的理论及临床研究具有重要意义,也给治疗脑卒中的药物发现提供新思路。

汉黄芩苷通过调节抗氧化基因表达和机体代谢延长果蝇寿命

为探究汉黄芩苷是否具有抗衰老作用,本研究以果蝇为模型,考察汉黄芩苷对果蝇自然寿命的影响。采用RT-PCR和UPLC-MS/MS代谢组学技术,探索汉黄芩苷发挥抗衰老作用的潜在机制。结果显示,0.02和0.5 mg/mL汉黄芩苷均可整体延长果蝇寿命,并能够分别延长果蝇平均寿命5.64%和5.39%,延长最高寿命2.74%和5.12%;与30 d组相比,汉黄芩苷能够显著上调果蝇体内抗氧化酶基因SOD1、SOD2和CAT的表达水平,下调MTH的表达水平。果蝇代谢组学分析共找到17个潜在生物标志物,主要参与氨基酸代谢(D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸代谢)和能量代谢(氮代谢)。该结果表明,汉黄芩苷延缓衰老与上调抗氧化基因表达和调控不同代谢途径有关。

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体的保护作用

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体功能的影响。方法:将8月龄快速老化小鼠SAMP8随机分为模型组、盐酸多奈哌齐1mg/kg组、吡啦西坦200mg/kg组、ICA75mg/kg组和150mg/kg组,每组6只;8只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1作为正常对照组。给药30d后,提取小鼠脑线粒体,测定线粒体呼吸功能、肿胀度、膜电位、活性氧(ROS)和ATP含量。结果:与SAMR1正常对照组相比,SAMP8小鼠脑线粒体呼吸功能显著降低,表现为线粒体Ⅲ态呼吸明显降低,Ⅳ态呼吸改变不明显,呼吸控制指数和磷氧比值降低(P<0.05);线粒体膜肿胀度增高,膜电位降低,线粒体内ROS含量增高,而ATP含量明显降低(P<0.05)。与SAMP8模型组相比,ICA75mg/kg和150mg/kg均可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和呼吸功能(P<0.05,P<0.01)。结论:ICA可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和功能。

化学药物晶型关键技术体系的建立与应用

项目简介 在杜冠华教授和吕扬教授的带领下,项目组通过晶型药物理论和系列关键技术创新,建立了国际领先的晶型药物研发技术体系,通过对仿制药和创新药的晶型研究,发现了多种我国急需药物品种的新药物优势晶型,

匹诺塞林对体外共培养海兔SN/L7神经元电生理活动的作用

目的研究匹诺塞林(PNCB)对海兔神经元共培养体系(SN/L7)的电生理效应,探讨可能的作用机制。方法体外共培养海兔(aplysia)的感觉神经元(SN)和运动神经元(L7),使其互相接触形成突触连接。细胞培养至d 5,给予不同浓度的PNCB刺激,考察药物对SN/L7兴奋性突触后电位(EPSP)的影响,随后撤去药物,观察EPSP的恢复情况。另取细胞,在PNCB孵育后加入0.005 mmol.L-15-羟色胺(5-HT),观察SN/L7对5-HT的反应性的变化。结果 PNCB作用5 min,使SN/L7的EPSP幅值降低。药物浓度低于0.1 mmol.L-1时,作用强度与药物剂量呈负线性关系(r>0.995),在0.1～0.4 mmol.L-1的浓度范围内,作用强度与药物剂量呈正线性关系(r>0.998);撤去药物后,SN/L7的EPSP幅值可恢复至初始值。PNCB使SN/L7对5-HT的反应性消失,撤去药物后,该反应性得以恢复。结论 PNCB可逆地抑制体外共培养的海兔SN/L7神经元突触的兴奋性传导,并可逆地抑制SN/L7对5-HT的反应性。这一效应可能与突触后膜的谷氨酸受体有关。