曲霉IgG抗体检测在血液病/恶性肿瘤患者侵袭性肺曲霉病中的诊断价值

目的评价曲霉IgG抗体检测在血液病/恶性肿瘤患者侵袭性肺曲霉病(IPA)的诊断价值,为血液病/恶性肿瘤患者IPA的诊断提供新的检测方案。方法回顾性研究。收集中国医学科学院血液病医院检验科2018年1月至2021年9月临床诊断IPA患者24例作为疾病组,临床排除IPA患者35例作为对照组。用ELISA法检测血清曲霉半乳甘露聚糖(GM)、曲霉IgG抗体。结果疾病组患者血清曲霉IgG抗体水平98.12(47.29,407.92)AU/mL显著高于对照组45.59(31.25,72.34)AU/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。疾病组患者血清GM与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。曲霉IgG抗体检测的敏感性、特异性分别为62.5%(15/24)、88.6%(31/35),ROC曲线分析的曲线下面积为0.762。曲霉GM检测的敏感性、特异性分别为12.5%(3/24)、100%(35/35),ROC曲线分析的曲线下面积为0.637。结论曲霉IgG抗体检测可作为血液病/恶性肿瘤患者IPA诊断指标。

1例极重型再生障碍性贫血合并多重感染患者的护理体会

极重型再生障碍性贫血(VSAA)是一种非常罕见的、严重的造血系统疾病,表现为骨髓造血功能持续受损,导致全血细胞中的三大类细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量不足。本文总结1例极重型再生障碍性贫血合并多重感染的患者的护理体会。根据患者临床症状,明确护理重点,积极控制感染,加强病情观察,做好跌倒及出血风险评估和防控,针对性开展心理护理,疏导患者情绪,提高患者治疗依从性,促进早期康复。

1例双上腔静脉患者Sherlock 3CG尖端定位下经外周静脉穿刺中心静脉置管及护理对策

本文总结了应用Sherlock 3CG尖端定位技术为1例急性髓系白血病伴有双侧上腔静脉患者双侧置入经外周静脉穿刺中心静脉导管(PICC)的护理对策。本例患者为满足治疗需求分别于两次经两侧置入PICC导管,导管尖端分别位于右、左两侧上腔静脉。患者首次选择右侧上臂置管过程顺利,再次置管选择左侧置入过程顺利,应用Sherlock 3CG技术定位,导管送至预留长度范围P波持续呈负波,查看计算机断层扫描(CT)结果提示患者存在永存左上腔静脉,行X光定位确认导管尖端位于左侧上腔静脉。经多学科团队综合评估,调整导管留置长度,密切观察患者情况,加强多方面健康宣教,导管留置成功,无并发症发生。

骨髓增生异常综合征核心基因及关键通路的生物信息学分析

目的:基于基因表达数据库(GEO)筛选骨髓增生异常综合征(MDS)相关差异基因(DEG),通过分析DEG的生物学功能及相关信号通路,探讨MDS的核心基因及其发病机制。方法:从GEO数据库筛选包含有MDS患者和正常对照组的基因芯片数据集(GSE4619,GSE19429,GSE58831),借助GEO数据库的基因表达分析工具(GEO2R),以|log FC(fold change)|≥1以及P<0.01为标准筛选数据库中的DEG。利用David在线数据库对DEG进行基因本体功能注释(GO);利用Metascape在线数据库对DEG进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。利用STRING数据库构建蛋白质互作用网络(PPI)并利用Cytoscape的CytoHubba和Mcode插件分析其关键基因簇及核心基因。利用R语言对筛选出的核心基因进行诊断试验分析并绘制ROC曲线。根据LEF1的表达量对GSE19429进行GSEA富集分析。结果:本研究共筛选出74个共同差异基因,其中上调14个,下调60个。GO分析结果显示,下调基因的BP主要富集在RNA聚合酶Ⅱ启动子转录及调控、细胞增殖的负调控以及免疫应答;CC主要富集在细胞核、转录因子复合物和黏着斑;MF主要富集在蛋白质结合、DNA结合以及β-连环蛋白结合;KEGG通路则主要富集在原发性免疫缺陷、Hippo信号通路、cAMP信号通路、癌症中的转录失调以及造血细胞系。上调基因的BP主要富集在Ⅰ型干扰素信号通路、病毒反应等,CC主要富集在细胞质,MF主要富集在RNA结合。通过STRING数据库及Cytoscape软件共筛选出10个核心基因以及3个重要的基因簇,进一步通过基因功能富集发现3个关键基因簇的功能均与免疫调控关系密切。ROC分析发现筛选出的核心基因对MDS具有较好的诊断意义。通过对核心基因进行GSEA分析发现LEF1可能通过调控炎症反应等影响造血干细胞的正常功能,进一步揭示了MDS的发病机制。结论:利用生物信息学方法能有效筛选出MDS的核心基因和关键信号通路,为MDS的诊治提供新的策略。

基因DCAF8在多发性骨髓瘤中的临床意义

目的:寻找多发性骨髓瘤(MM)基因芯片数据集中的潜在致病基因、疾病诊断和预后相关因子并阐明其作用机制。方法:获取基因芯片数据集GSE13591和Zhan Myeloma,使用R语言进行基因差异表达分析。对共同高表达基因进行Meta分析,得到P值中位秩次TOP10基因。CCLE数据库分析TOP10基因在各肿瘤细胞系中的mRNA表达情况,筛选出蛋白酶体通路相关基因8(DCAF8)。cBioPortal数据库中分析DCAF8基因在各肿瘤细胞系的突变率。WB检测DCAF8蛋白在骨髓瘤细胞系中的表达情况。SPSS和Graph Pad软件分析DCAF8表达量和MM患者临床特征之间的相关性,进行受试者工作特征曲线(ROC曲线)绘制和生存分析。R语言Custer Profiler Package和Metascape数据库对DCAF8互作蛋白基因和共表达基因进行GO和KEGG功能富集分析。结果:数据集GSE13591和Zhan Myeloma的上调基因取交集得到477个共同高表达基因。在合并数据集中对上述基因进行Meta分析,得到P值中位秩次TOP10基因,DCAF8在MM细胞系中的平均表达水平最高。DCAF8基因在浆细胞骨髓瘤中的突变率位于各肿瘤细胞系的第一位。DCAF8蛋白在多种MM细胞系中的表达量显著升高(P<0.01)。DCAF8表达量与MM患者的肿瘤负荷显著正相关,1q21扩增阳性组的DCAF8的表达量显著高于1q21阴性组。ROC曲线显示DCAF8的表达水平可以很好地区分MM患者和正常人(P<0.01)。DCAF8高表达组比DCAF8低表达组中位生存时间显著缩短。蛋白互作网络显示DCAF8可与XPO1蛋白直接相互作用。GO和KEGG功能富集分析结果表明,DCAF8与蛋白酶体功能、剪切体活性、组蛋白乙酰化酶活性、RNA转运等功能相关。结论:DCAF8在MM中显著高表达,其表达水平可以很好地区分MM患者和正常人;其高表达与MM患者的生存预后显著负相关,且与1q21扩增和XPO1蛋白相关。

遗传性联合凝血因子Ⅴ和Ⅷ缺乏1例并文献复习

罕见遗传性出血性疾病(rare inherited bleeding disorders,RBD)是一组异质性疾病,约占所有遗传性凝血因子缺陷的3%~5%[1],包括遗传性纤维蛋白原缺乏症、凝血酶原缺乏症、凝血因子(F)Ⅴ缺乏症、FⅤ和FⅧ联合缺乏症、FⅦ缺乏症、FⅩ缺乏症、FⅪ缺乏症、FⅩⅢ缺乏症以及维生素K依赖性凝血因子缺乏[1-2]。2021年9月我院收治了1例遗传性FⅤ和FⅧ联合缺乏的病例,现报道如下。

基于单细胞测序分析急性髓系白血病患者骨髓免疫微环境的特点

目的通过单细胞测序技术分析急性髓系白血病(AML)患者骨髓免疫微环境的组成情况,探讨不同类型免疫细胞的不同亚群在AML发生发展中的作用。方法检索基因表达数据库(GEO)中符合条件的scRNA-seq数据集(GSE116256),利用R语言的Seurat包对数据进行处理,利用SingleR包并参考既往研究对细胞亚群进行注释,计算不同类型免疫细胞的比例,寻找AML患者与正常对照组存在差异的细胞亚群并计算它们的差异基因(DEGs),对DEGs进行基因本体功能注释(GO)和京都基因与基因组百科全书富集分析(KEGG),明确存在差异的细胞亚群在AML疾病进程中的作用。结果与正常对照组相比,AML患者的造血祖细胞、单核细胞、NK/T细胞、树突状细胞和B细胞的亚群比例均发生不同程度改变。通过对差异基因进行功能富集发现,AML的单核细胞、树突状细胞、B细胞以及T细胞的增殖、分化、免疫调控及对肿瘤细胞的杀伤功能出现不同程度损伤。结论AML患者与健康人的免疫微环境存在较大差异,这些差异可能与AML的发生发展关系密切。

抗人BCMA抗体的人源化设计及其体外活性鉴定

BCMA高特异地表达于多发性骨髓瘤细胞表面,是多发性骨髓瘤的理想治疗靶点。为了降低鼠源抗体的人抗鼠抗体反应,使其在临床得到更好的应用,本文基于鼠源抗人BCMA抗体序列,获得了靶向人BCMA的人源化抗体,并在体外验证人源化是否影响该抗体的亲和性和特异性。本文将抗人BCMA抗体69G8的可变区序列与人源抗体序列库进行比对,确定人源化抗体模板。利用Discovery Studio软件对抗人BCMA抗体69G8进行人源化设计,获得人源化抗体h69G8,随后利用293T真核表达系统对人源化前后的69G8进行scFv形式的表达并进行亲和力测定。人源化的69G8全抗被合成出来后,对其进行亲和常数、内化特性以及结合特异性等方面的比较,发现其亲和力等特性并无改变。在此基础上,对人源化全抗进行合成,结果亦证明其保留了鼠源抗体的高亲和力、高特异性以及内化特性。本实验对鼠源抗人BCMA抗体69G8进行了人源化,人源化不影响其体外结合活性和亲和力,为69G8未来在临床更好地应用打下了基础。