osa-miR168a-5p靶向调节人源ADD1及E2F2基因表达的研究

目的探究植物osa-miR168a-5p靶向调节人源相关基因表达的影响。方法采用TargetScan预测osa-miR168a-5p的靶基因,并筛选相关靶基因进行后续验证。构建靶基因mRNA 3'-UTR荧光素报告基因及相应的突变体,采用双荧光素酶报告基因活性分析系统验证osa-miR168a-5p与靶基因的关系。结果利用Targetscan预测的osa-miR168a-5p靶基因结果显示,ADD1与E2F2mRNA3'-UTR区域均存在osa-miR168a-5p结合位点。双荧光素酶报告基因实验结果显示,使用osa-miR168a-5p mimics内源性增加osa-miR168a-5p能够抑制ADD1及E2F2报告基因的表达,将ADD1及E2F2 mRNA 3'UTR区与osa-miR-168a-5p的结合位点突变后,内源性osa-miR-168a-5p增加所引起的报告基因表达下调的作用消失。结论osa-miR168a-5p能够直接调节人源ADD1及E2F2基因表达,因此食物中的osa-miR168a进入人体很可能直接靶向人源ADD1及E2F2基因发挥相应的生物学效应。