扫描电镜血管内皮细胞硝酸银染色方法的改良

介绍一种简单适用的血管内皮细胞硝酸银染色方法,可使扫描电镜下内皮细胞的表面结构和反应血管通透性的形态改变得到良好展现。

线粒体疾病及其对心血管系统的影响

1963年Nass和Nass首次发现线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）。1981年Anderson等完成人类mtDNA测序，提出线粒体母系遗传的概念。1988年Holt等发现mtDNA缺失可导致线粒体肌病；同年Wallace等在Leber遗传性视神经病（LHON）患者中发现有mtDNA突变。至此，mtDNA突变及线粒体疾病受到广泛关注。

参松养心胶囊对心室肌细胞钾通道的影响

目的观察参松养心胶囊干粉提取溶液对大鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)、瞬时外向钾电流(Ito)以及豚鼠心肌细胞延迟整流钾电流(Ik)的影响。方法用酶解法分离单个心室肌细胞,并用全细胞膜片钳记录技术。结果当药物浓度0.5%时,可以使大鼠心肌细胞IK1内向成分降低,使-100mV时IK1电流密度从(-10.8±1.8)pA/pF降至(-7.2±2.1)pA/pF,平均抑制率为(33.1±16.9)%(n=11,P<0.05),但不改变电流的翻转电位及整流特性。药物同时对Ito电流的瞬时成分有抑制作用,60mV时Ito电流密度从(-19.8±7.1)pA/pF降至(-10.0±3.9)pA/pF,平均抑制率为(50.6±10.8)%(n=6,P<0.05),稳态失活曲线左移,失活后恢复时间常数增大。药物浓度0.5%时,对Ik有电压依赖性抑制作用,50mV时对尾电流峰值的抑制率为(30.8±1.1)%(n=5,P<0.05)。结论参松养心胶囊干粉提取溶液对IK1,Ito和Ik均具有不同程度的阻滞作用。这种多离子通道阻滞作用不仅使参松养心胶囊具有广谱的抗心律失常疗效,减少致心律失常的副作用,对Ito的阻滞效应还将显示其独特的抑制2相折返的作用,值得对其作更深入和广泛的研究。

参松养心胶囊对窦性心动过缓疗效及心脏自主神经功能的影响

目的:探讨参松养心胶囊(人参、麦冬、五味子、桑寄生等)对窦性心动过缓疗效及心脏自主神经功能的影响。方法:入选40例动态心电图长期、反复检查均为窦性心动过缓的患者,采用随机、双盲、自身前后交叉对照原则,分为治疗组和对照组。在原发疾病治疗的基础上,治疗组口服参松养心胶囊,对照组口服安慰剂,4周后均停止口服药物2周,再交叉口服安慰剂和参松养心胶囊4周。观察参松养心胶囊治疗前后的症状、心率及心律变异性。结果:治疗4周后治疗组窦性心动过缓症状改善、心率升高,而且SDNN、SDANN、SDANNindex、RMSSD、PNN50及HF值降低,LF及LF/HF值升高,较治疗前或对照组比较有显著性差异。结论:严重窦性心动过缓患者可能存在交感、迷走神经平衡破坏,参松养心胶囊可以通过抑制迷走神经张力和相对提高交感神经张力来恢复植物神经系统的平衡,提高窦性心动过缓患者的心率并改善症状。

参松养心胶囊治疗缓慢型心律失常的疗效观察

目的:观察参松养心胶囊(人参、甘松等)治疗不同病因缓慢型心律失常(病态窦房结综合征、慢快综合征、房室传导阻滞)的疗效与安全性。方法:选择缓慢型心律失常患者134例,随机分为参松养心胶囊治疗组(69例)和心宝丸对照组(65例)。治疗组口服参松养心胶囊1.2g/次,每日3次;对照组口服心宝丸180～360mg,每日3次,疗程4周。2组其它用药基本相同。观察2组患者的临床疗效及安全性。结果:症状改善率治疗组(76.81%)显著高于对照组(41.54%),P<0.05。病态窦房结综合征患者共73例(治疗组36例,对照组37例),治疗后治疗组心率提高7.21次/min,对照组提高2.1次/min,两组比较有显著性差异,P<0.01。24h动态心电图疗效方面,治疗组总有效率(69.45%)显著优于对照组(27.03%),P<0.01。慢快综合征患者共48例(治疗组26例,对照组22例),治疗组窦性心率提高的总有效率(73.08%)显著高于对照组(22.73%),P<0.01。24h动态心电图评价参松养心胶囊对慢快综合征患者快速型心律失常的显效率治疗组(11.54%)高于对照组(4.55%),P<0.05。房室传导阻滞总例数(13例)较少,与治疗前比较,治疗组6例中3例,对照组7例中1例由高度AVB转化为低度。不良反应发生率治疗组与对照组(2.5%对3.6%)比较无显著差异,P>0.05。结论:参松养心胶囊是治疗缓慢型心律失常有效、安全的药物。

丹酚酸B对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流和L型钙电流的阻滞作用

目的研究从丹参中分离提取的药物单体——丹酚酸B对大鼠心肌细胞上的瞬时外向钾电流(Ito)、内向整流钾电流(IK1)和L型钙电流(ICa,L)的电生理学作用。方法用酶解法分离大鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录Ito、IK1和ICa,L。每个细胞采用加药前后自身对照,用含100μmol/L丹酚酸B的细胞外液灌流心室肌细胞,记录加药前、后的电流,所有数据均在细胞破膜后20min内完成。结果 100μmol/L的丹酚酸B对Ito和ICa,L具有抑制作用,使Ito和ICa,L最大激活峰值电流密度下降,电流密度-电压曲线下移;且丹酚酸B主要抑制Ito的快速电流成分Itof,而对Ito的缓慢电流成分Itos无明显作用。在60mV测试电压下,Itof的最大激活峰值电流密度从23.51±3.29pA/pF降为16.85±2.36pA/pF,抑制率为28.31%±10.6%(n=8,P<0.05)。在-10mV测试电压下,100μmol/L丹酚酸B作用后ICa,L的最大激活峰值电流密度从-8.66±-2.40pA/pF降为-5.91±-2.14pA/pF,抑制率为31.84%±10.23%(n=11,P<0.05)。丹酚酸B使Ito通道失活后的恢复减慢,但不改变ICa,L的通道动力学。丹酚酸B对IK1无显著作用。结论丹酚酸B对Ito和ICa,L具有阻滞作用,而对IK1无显著作用。

J波综合征

J波不仅存在于心电异常的正常人中而且在特发性心室颤动、B rugada综合征以及早期复极综合征中并非是一种罕见的现象,近一个世纪的基础和临床试验证实,J波发生的离子流机制是瞬时外向钾电流相对增加且最终确定了J波产生和恶性事件触发机制。由于J波的诸多特殊性,因此笔者就J波及J波综合征的主要心电现象做一综述。

浦肯野氏纤维的研究历程及现代意义

1825年,捷克Purkinje首先描述了心内膜特殊的传导纤维,即后来被命名的浦肯野氏纤维(PFs)。60年后,日本Tawara研究指出房室交界区的传导束和PFs是一个完整的电脉冲传播网络。1959年,Hoffman等记录到了His束电位。此后学者们根据自己的研究推测PFs在室性心律失常的启动和维护中起关键作用。近20年,Boy-den等证实PFs通过Ca2+电流诱导钙释放机制参与缺血性心室颤动的发生。上世纪60年代PFs不同于心肌细胞的组织学和心电学特征被揭示,随后的研究表明PFs是通过细胞内钙动力学异常,早期后除极、延迟后除极的形成参与器质性、非器质性和遗传性心脏病室性心律失常的启动和维持。射频消融异常的PFs电位,可获得某些室性心律失常的根治。PFs在室性心律失常发生中的作用,可能会给临床治疗提供新的理论基础。

心律失常的基因诊断

遗传性心律失常综合征往往南基因突变引起,而这些异常基因主要为编码心脏离子通道蛋白的基因，因而这类疾病也被称为离子通道病;其他还包括编码细胞骨架蛋白、细胞间连接蛋白等的基因。基因诊断即利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法，

参松养心胶囊对hHCN4起搏电流通道的影响

目的观察通络药物参松养心胶囊提取干粉溶液对人超极化激活的阳离子通道(hHCN4)的影响。方法用细胞外液将参松养心胶囊干粉稀释到0.5%浓度,瞬时转染人类超极化激活的阳离子通道(If)基因hHCN4cDNA到HEK293细胞,利用全细胞膜片钳技术,记录转染了hHCN4的HEK293细胞上的超极化激活的阳离子流。结果If峰值电流密度受到抑制(61.97±16.44vs41.65±13.32,P<0.05);但此抑制可逆(53.83±14.26);药物不改变通道激活动力学参数。结论参松养心胶囊提取干粉溶液可逆性抑制hHCN4起搏电流。

29例云南不明原因聚集性猝死的尸检病理学研究

目的分析云南不明原因聚集性猝死的病理特点,为其病因探索和实施干预提供依据。方法收集云南省进行这类猝死监测以来临床与病理资料较完整的尸检材料29例,占同期死亡病例的10.2%。年龄8至69岁(平均32岁),男16例、女13例。核查心脏标本,观察了主要脏器的组织病理改变,对其中5例还做了心脏传导系统检查。心肌炎的病理诊断参照 Dallas 标准和世界心脏联合会的共识,标准克山病的病理诊断依据国家相关卫生行业标准。结果心脏主要病理改变有:淋巴细胞性心肌炎11例、中性粒细胞性心肌炎3例、致心律失常性右室心肌病4例、左室肥厚合并流出道异常肌束2例、缺血性心脏病2例、过敏性支气管炎和慢性支气管炎合并肺气肿2例、主要脏器未找到明显致死性病理形态改变5例。29例中均未见克山病和扩张型心肌病的病理形态改变。心肌炎均为局灶性,5例心脏传导组织检查见2例有希氏束或左束支起始段急性出血,1例炎症波及房室结。4对家庭聚集性病例的病理改变不同,4例首发猝死中3例为心肌炎、1例慢性感染,续发猝死中3例与急性心肌缺血有关,1例为致心律失常性右室心肌病。多数病例伴肺水肿,少数伴呼吸道和肺部感染。部分出现淤血性或缺血性肝细胞坏死。结论云南不明原因聚集性猝死的基本病理改变不同,多数为心肌炎症、心脏发育异常和其他致死性心肺疾患,未见克山病的病理学证据,致心律失常性右室心肌病等基础性心脏病应引起重视,猝死的聚集性可能是多种因素的综合表现。

心悸宁浸膏粉溶液对豚鼠心室肌细胞动作电位的影响

目的:观察心悸宁(XJN)浸膏粉溶液对豚鼠单个心室肌细胞动作电位的影响。方法:使用Langendorff灌流系统离体灌流心脏,急性酶解法分离获得心肌细胞。全细胞膜片钳技术电流钳模式记录动作电位。结果:0.25%XJN使静息电位(RP)从用药前的(-70.62±7.02)mV上升至(-66.99±8.29)mV(P<0.05),动作电位0相除极幅度(APA)从用药前(114.24±12.30)mV减小至(107.40±13.56)mV(P<0.05);动作电位0相最大除极速率(Vmax)从用药前(117.49±32.89)V/s减慢至(84.99±25.61)V/s(P<0.01);复极至50%时动作电位时程(APD50)从用药前(282.94±41.76)ms缩短至(232.10±26.93)ms(P<0.05);动作电位3相复极速率(V3)从用药前(-3.08±0.69)V/s减慢至(-2.06±1.07)V/s(P<0.05)。0.5%XJN使RP,APA,Vmax和V3的变化与0.25%XJN的变化趋势一致,但APD50和复极至90%时动作电位时程(APD90)延长更显著。结论:体外应用XJN引起心室肌细胞RP上升,APA减小,Vmax和V3减慢。0.25%浓度组引起APD50缩短,0.5%浓度组引起APD50和APD90延长。以上影响可能是XJN在临床上具有广谱抗心律失常作用的电生理学机制。