真菌诱导子处理的铁皮石斛原球茎HPLC-MS指纹图谱分析

目的比较真菌诱导子处理的铁皮石斛原球茎与对照原球茎、铁皮石斛在化学成分上的差别。方法用高效液相色谱-质谱联用技术,比较诱导子处理的铁皮石斛原球茎、对照原球茎和人工栽培的铁皮石斛的氨性氯仿提取物中各成分的色谱峰面积积分值和相对积分面积。结果诱导子处理的铁皮石斛原球茎和对照原球茎中共有26个相同的化学成分,相对积分面积和分别为98.47%和97.54%,其中有19个成分在诱导子处理原球茎中的色谱峰面积积分值高于对照原球茎,它们中分别有5个和6个特有的成分,其中生物碱类成分分别为3个和1个。诱导子处理的原球茎和铁皮石斛中共有25个相同的化学成分,相对积分面积和分别为95.72%和96.44%,其中有17个成分在人工栽培的铁皮石斛中的色谱峰面积积分值高于诱导子处理的原球茎,有8个成分在诱导子处理的原球茎中的色谱峰面积积分值高于铁皮石斛,这其中有7个是生物碱类的成分。结论真菌诱导子处理后,没有改变原球茎的化学背景,但能提高原球茎中化学成分的含量。人工栽培的铁皮石斛的质量明显优于诱导子处理的原球茎。原球茎中的生物碱类成分对诱导作用较敏感。诱导子处理能促进原球茎中生物碱类成分的产生或特异性积累。

真菌诱导子与铁皮石斛原球茎作用条件的优化

目的优化MF24真菌诱导子与铁皮石斛原球茎相互作用过程中诱导子的处理方法、加入剂量、加入时间和作用时间等作用条件。方法用不同方法制备的MF24真菌诱导子,以不同的剂量,在原球茎生长的不同时间加入,并继续培养不同时间,观察它们对原球茎生物量和总生物碱含量的影响。结果用MF24的发酵液作为诱导子(方法3)时,收获原球茎的平均干重最高,为0.931 g(每瓶50 mL培养基),与对照相比提高了7.8%。以250 mL·L-1(诱导子.培养基-1)的剂量(高剂量)加入真菌诱导子时,收获的平均鲜重和干重最高,分别为19.381 g和0.926 g,与低剂量组相比分别提高35.1%和11.8%。将方法3制备的诱导子以高剂量加入原球茎时,获得的总生物碱含量最高(0.048 6%),与对照(0.034 9%)相比提高了39.2%。在原球茎培养的第16周,以高剂量加入方法3制备的诱导子,继续培养6周,收获的平均鲜重和干重最高,分别为26.501 g和1.165 g。这一培养条件下原球茎的总生物碱含量最高(0.068%),与平均值(0.048 8%)相比提高了39.3%。结论MF24真菌诱导子与铁皮石斛原球茎的作用条件为:MF24液体发酵的发酵液作为诱导子,以250 mL·L-1(诱导子.培养基-1)的剂量,在原球茎培养的第16周加入,继续培养6周后收获。