辽宁地区7型人腺病毒基因组型研究

应用限制性内切酶BamHⅠ、HindⅢ和EcoRⅠ对最近由小儿肺炎和急性上呼吸道感染患者分离到的7型人腺病毒分离株(71株)的基因DNA进行了切断点分析,结果发现辽宁地区流行的两个新基因组型。

农村新生儿冷伤发病率及影响因素研究

对铁岭县农村1840例新生儿体温监测发现：新生儿冷伤381例，发病率20．7％。冷伤患儿死亡15例，病死率3．7％。本病主要发生在出生24小时内（91．2％）。发病率影响因素调查结果显示：春冬寒冷季节（27．8％～34．5％）显著高于夏秋温暖季节（5．8％～9．1％），P＜0．05；产室温度愈低，发病率愈高（F＝47．79，P＜0．01），室温＞21℃，发病率低（7％）；胎龄＜37周的早产儿（37．9％）高于足月儿（20．4％），差异显著（x2＝5．32，P＜0．05）；体重≤2500克者（29．4％）高于体重＞2500克者（20．3％），P＜0．05。且发现未按时喂哺或患病新生儿冷伤发病率增加。

低密度脂蛋白受体基因NcoⅠ、apoC-Ⅲ基因SacⅠ多态性与动脉粥样硬化脑梗死的关系

目的:探讨低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因和载脂蛋白(apo)CⅢ基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死(AC I)的关系。方法:用聚合酶链反应(PCR)技术检测中国辽宁籍汉族健康人104例和AC I患者77的LDL-R基因NcoⅠ、apoC-Ⅲ基因SacⅠ多态性及血脂、脂蛋白含量。结果:对照组N+及S+等位基因频率为0.667、0.274;AC I组为0.662、0.329,差异不显著(P>0.05),但AC I组S-S+与N-N+、N+N+联合存在时的频率为0.45,显著高于对照组(P<0.05),致AC I的发病相对风险率(RR)为4.2(P<0.05),致血清TG、TC、LDL-C升高的RR依次为14.30、9.40、17.40。结论:LDL-R基因N-N+、N+N+、apoC-Ⅲ基因S-S+联合存在与AC I患者血清高TG、高TC、高LDL-C相关,可能是致AC I的遗传易患因子。

婴儿巨细胞病毒感染与母乳喂养

采集儿童保健门诊1个月～1岁健康婴儿尿及其母乳共105对进行病毒分离。分离结果:正常母乳巨细胞病毒阳性率为16.2%,婴儿尿巨细胞病毒阳性率为21.9%,感染母乳喂养的婴儿感染率为41.1%,明显高于非感染母乳喂养的婴儿感染率18.2%,可见感染母乳是婴儿巨细胞病毒感染的主要来源。

巨细胞病毒感染的快速诊断——低速离心和单克隆抗体间接免疫荧光方法检测早期抗原

应用低速离心和巨细胞病毒早期核抗原单克隆抗体间接免疫荧光方法(简称DEACF),检测临床标本中巨细胞病毒(CMV),并与传统病毒分离方法进行比较。结果:139份临床标本病毒分离方法阳性16份(11.5%),细胞病变(CPE)出现时间平均9.2日,其中2份DEACF检测阳性;DEACF检测阳性18份(13.0%),培养16h61.1%出现阳性,培养88h可检出全部阳性标本,其中4份病毒分离阴性标本中,3份有证据不是DEACF的假阳性反应。DEACF的敏感性为89.5%,特异性为99.2%。DEACF检测的139份标本中,用低速离心可使培养88h的阳性检出率从未离心的44.4%提高到100%。

未治疗苯丙酮尿症尿内有机酸分析

本文测定43例苯丙酮尿症患儿尿内苯丙酮酸(PP)、笨乙酸(PA)、苯乳酸(PL)、扁桃酸(MA)、2-羟-苯乙酸(2EPA)、4-羟-苯乙酸(4HPA)、4-羟-苯丙酮酸(4HPP)、并计算PP/PA、PP/PL、PP/MA、PP/2HPA。结果:0～6个月组PA明显高于～12个月组、～4岁组、～15岁组;PL、MA、4HPA明显高于～15岁组,～6个月组,PP/PA明显低于～12个月组、～4岁组。血清苯丙氨酸含量10～20mg/dl与>20mg/dl两组之间未见明显差异。

抗病毒免疫核糖核酸治疗婴幼儿病毒性肺炎疗效观察

应用抗腺病毒、呼吸道合胞病毒免疫核糖核酸(ADV-iRNA、RSV-iRNA)治疗病毒性肺炎43例。结果疗程缩短、治愈率提高、总有效率为95.4％。并增强机体对非特异性PHA皮肤反应及提高粒细胞吞菌率、杀菌率。

新生儿肾动脉栓塞

新生儿肾动脉栓塞较少见,但随着新生儿急救医学的迅速发展,渐见增多,绝大多数由脐动脉插管所引起。患儿多数表现为恶性高血压、充血性心衰、呼吸困难、镜下血尿、蛋白尿和血肾素水平升高。放射性核素扫描、超声检查和肾动脉造影可确定诊断。其中超声检查可作为首选方法。治疗上,采用降血压等对症处理,兼治原发症,必要时可用肾透析等保守疗法。无效者,主张积极行患肾切除。栓子摘除及肾动脉成形术尚需探讨。抗凝及溶栓疗法有待评估。

沈阳地区婴幼儿秋季腹泻的病原学研究

1977年Yolken首先应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测轮状病毒抗原取得成功,为轮状病毒快速诊断开辟了新的途径。我院于1982～1984年的秋季采集沈阳地区婴幼儿腹泻粪便标本,用ELISA方法检测轮状病毒抗原,同时做部分粪便的细菌培养和病毒分离。

载脂蛋白B基因多态性与中青年人动脉粥样硬化性脑梗死关系的研究

目的 探讨ApoB基因多态性与中青年人动脉粥样硬化性脑梗死 (ACI)的相关关系。 方法 用PCR技术检测了健康中青年人 10 0名和中青年ACI病人 36例的ApoB基因多态性及血脂、脂蛋白和载脂蛋白的含量。结果 ApoB基因XbaⅠX+ X-基因型频率ACI为 14 .7% ,高于对照组的 4 .7% (P <0 .0 5 ) ;ACI组TG、TC、Lp(a)含量明显高于对照组 ,HDL -C含量显著低于对照组 (P <0 .0 1) ;ACI病人中X+ X-组的ApoAⅠ明显低于X-X-组 (P <0 .0 2 5 )。结论 ApoBXbaⅠ基因X+

一起新生儿柯萨奇病毒B组引起的暴发流行

对1993年9月至10月沈阳某妇婴医院发生的一起新生儿集体感染,用间接免疫荧光法检测了36例患儿血清中的柯萨奇B组病毒的特异性IgM抗体,28例阳性,阳性率为77.8％。病毒分离结果为:12例患儿咽拭子中1例阳性;9例患儿便标本中4例阳性;4例患儿骨髓标本中3例阳性。同时,3例死亡患儿的9份解剖标本(包括心肌、心血、心包积液、脑组织和肠组织)全部病毒分离阳性。其中2例死亡患儿的心肌分离株经中和试验鉴定为柯萨奇病毒B组3型。同时对部分(9例)患儿母亲和全部(20例)有关医护人员进行的柯萨奇B组病毒IgM抗体检测结果为,2例患儿母亲阳性。对1993年10月30日至1994年5月31日期间1616例临产孕妇的柯萨奇B组病毒IgM抗体检测中,65例阳性,阳性率为4.02％。其中1993年10月30日至11月17日期间的146例被检孕妇中,12例阳性,阳性率为8.22％。表明,1993年9～10月期间沈阳市有柯萨奇病毒流行。

基因重组人巨细胞病毒PPUL32蛋白在诊断中的应用

为组建可在诊断中应用的高纯度、高效价基因工程抗原,我们在同一克隆中同时表达了人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus HCMV)PPUL32蛋白的两个抗原决定簇基因,在诊断中取得满意的结果。 材料和方法 1.克隆 A:表达HCMV PPUL32蛋白位于UL32区第1783～1842核苷酸的抗原决定簇基因。 2.克隆 B:表达HCMV PPUL32蛋白位于UL32区第3070～3144核苷酸的抗原决定族基因;克隆C和D分别表达此基因的二个和三个拷贝。

用PCR组建巨细胞病毒抗原决定簇基因的表达克隆

巨细胞病毒感染的血清学诊断方法是目前临床诊断中应用最广泛的方法之一。但由于缺少高效价、高纯度和高特异性的抗原，使各种血清学方法在其敏感性和特异性方面均不能令人满意。文献报道，通过分子生物学得到的或化学合成的单一病毒蛋白或部分成份可作为血清学诊断的良好抗原。本文报道用聚合酶链反应扩增了巨细胞病毒主要磷蛋白ｐＰＵＬ３２的一个强抗原决定簇基因，并同时在扩增产物的两端引入了相应的限制性内切酶识别位点序列，经与表达载体连接后转入相应的细菌中，得到了能够表达此抗原决定簇的克隆，其表达的融合蛋白在免疫转印检测中与人巨细胞病毒阳性血清有强特异性反应。

巨细胞病毒感染的实验室诊断

巨细胞病毒(CMV)感染相当普遍,多数为隐性感染。部分巨细胞包涵体病患儿或免疫抑制者(如骨髓移植,艾滋病患者等)感染后病情严重,甚或致死。临床上确诊CMV 感染比较困难,主要依赖于实验室诊断.CMV 属疱疹病毒科,直径为200nm,是最大的动物病毒,是双链DNA 病毒.人巨细胞病毒(HCMV)暂定为一个血清型,病毒株有David 株、Ad169株、Kerr 株和Towne 株.常用的诊断方法概述于下。

用点突变的方法组建巨细胞病毒抗原决定簇基因的表达克隆

研究资料表明，人巨细胞病毒（ＨＣＭｖ）单一蛋白的单一抗原决定簇只能被部分患者阳性血清识别。组建在血清学诊断中能够替代全病毒抗原的基因工程抗原，需要含有病毒多种主要抗原蛋白的抗原决定簇。为搞清在表达载体中重复插入某一抗原决定簇基因是否能表达出更高抗原效价的融会蛋白，我们用点突变的方法，在表达载体中分别插入了人ＨＣＭｖ的ｐｐＵＬ３２蛋白羧基端一个抗原决定簇基因的１个、２个和３个拷贝。在免疫转印检测中，这些克隆表达的融合蛋白与特异性阳性血清的反应性差别不明显。这表明，插入表达载体中目的基因的多寡对表达蛋白的抗原效价没有显著影响。