碘缺乏对大鼠仔鼠小脑c-fos和c-jun蛋白表达的影响

目的研究碘缺乏对大鼠仔鼠小脑c-fos和c-jun蛋白表达的影响。方法选择健康Wistar大鼠30只(雌性20只,雄性10只),将雌鼠随机分成碘缺乏组及对照组,每组10只。碘缺乏组大鼠于合笼前1周开始喂饲低碘饲料(含碘20～40ng/g),饮去离子水,直至仔鼠生后30d;对照组大鼠喂饲标准饲料(含碘145～186ng/g),饮自来水。取生后第20、30、60天仔鼠,测定体重、血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)水平,并取小脑组织进行免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)染色,用图像分析方法分析大鼠仔鼠小脑皮质c-fos和c-jun蛋白表达情况。结果碘缺乏组仔鼠生后第20、30、60天时,体重均低于对照组(均P<0.01),血清T3、T4水平均低于对照组(均P<0.01),小脑组织c-fos和c-jun染色强度均低于对照组(均P<0.05),总积分光密度值均低于对照组(均P<0.05)。结论碘缺乏可降低大鼠仔鼠小脑组织c-fos和c-jun蛋白表达,影响神经系统的发育。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠内嗅皮质钙调蛋白表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退损伤内嗅皮质对钙调蛋白(CaM)表达的影响。方法健康2月龄雌性Wistar大鼠,交配妊娠后,取孕鼠28只,按体质量随机分成对照组、甲状腺功能减退组和碘缺乏组,甲状腺功能减退组根据饮水中含丙基硫尿嘧啶(PTU)剂量分为5ppm组和15ppm组,每组7只孕鼠。分别于仔鼠出生后7,14,21,28,42d(PN7、PN14、PN21、PN28和PN42),每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,进行组织病理切片和免疫组化染色,观察分析内嗅皮质钙调蛋白表达。结果PN14、PN21、PN28和PN42时,15ppm组和碘缺乏组仔鼠内嗅皮质钙调蛋白表达显著低于对照组(P<0.05)。PN7时,各组间钙调蛋白表达无显著差异。结论碘缺乏和甲状腺功能减退可下调大鼠仔鼠内嗅皮质钙调蛋白表达。

妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退对仔鼠海马脑源性神经营养因子表达的影响

目的观察妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退对仔鼠海马脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法将妊娠清洁级Wistar大鼠28只按体重随机分成对照组、碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组,每组7只。自GD6起,碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料[碘含量为(14.11±1.96)ng/g],饮用自来水;甲状腺功能减退1、2组分别给予5和15mg/L丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)溶液作为饮用水,饲喂普通饲料[碘含量为(470.50±46.52)ng/g],直至仔鼠出生后第28天(PN28);对照组饮用自来水,饲喂普通饲料。分别于PN14、PN21、PN28和PN42时,每组随机取5只仔鼠,观察海马CA1、CA3和DG区BDNF表达。结果在PN14时,各组仔鼠海马CA1、CA3和DG区BDNF蛋白表达水平间比较,差异均无统计学意义。在PN21时,甲状腺功能减退2组和碘缺乏组仔鼠海马CA1、CA3和DG区BDNF蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);碘缺乏组仔鼠海马CA1区以及甲状腺功能减退2组和碘缺乏组仔鼠海马DG区BDNF蛋白水平低于甲状腺功能减退1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在PN28时,甲状腺功能减退2组和碘缺乏组仔鼠海马CA1、CA3和DG区以及甲状腺功能减退1组仔鼠海马CA3区BDNF蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);甲状腺功能减退2组和碘缺乏组仔鼠海马CA1区BDNF蛋白表达水平低于甲状腺功能减退1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在PN42时,甲状腺功能减退1、2组和碘缺乏组仔鼠海马CA1、CA3和DG区BDNF蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);甲状腺功能减退2组和碘缺乏组仔鼠海马CA1和DG区BDNF蛋白表达水平低于甲状腺功能减退1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退可降低仔鼠海马BDNF的表达。

妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退对仔鼠内嗅皮质cAMP反应元件结合蛋白表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退损伤内嗅皮质对cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein,CREB)蛋白表达的影响。方法将28只妊娠清洁级Wistar大鼠按体重随机分成对照组、碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组,每组7只。自妊娠第6天(GD6)起,碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料[碘含量为(14.11±1.96)ng/g],饮用自来水;甲状腺功能减退1、2组分别给予5和15mg/L丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)溶液作为饮用水,饲喂普通饲料[碘含量为(470.50±46.52)ng/g],直至仔鼠出生后第28天(PN28);对照组饮用自来水,饲喂普通饲料。分别于PN7、PN14、PN21、PN28和PN42时,每组随机取5只仔鼠,观察内嗅皮质CREB的表达。结果 PN7时,各组仔鼠内嗅皮质CREB表达水平间比较,差异无统计学意义。PN14和PN21时,甲状腺功能减退1组、2组和碘缺乏组仔鼠内嗅皮质CREB表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PN14时,甲状腺功能减退2组和碘缺乏组CREB表达水平低于甲状腺功能减退1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PN28和PN42时,甲状腺功能减退2组和碘缺乏组仔鼠内嗅皮质CREB表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);PN28时,碘缺乏组仔鼠内嗅皮质CREB表达水平低于甲状腺功能减退1组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,甲状腺功能减退1、2组和碘缺乏组内嗅皮质CREB染色强度明显降低。结论妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退可降低仔鼠内嗅皮质CREB表达。

妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退对仔鼠海马神经颗粒素表达的影响

目的观察妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退对仔鼠海马神经颗粒素(neurogranin,Ng/RC3)表达的影响。方法将妊娠清洁级Wistar大鼠28只按体重随机分成对照组、碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组,每组7只。自妊娠第6天(GD6)起,碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料[碘含量为(14.11±1.96)ng/g],饮用自来水;甲状腺功能减退1、2组分别给予5和15mg/L丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)溶液作为饮用水,饲喂普通饲料[碘含量为(470.50±46.52)ng/g],直至仔鼠出生后第28天(PN28);对照组饮用自来水,饲喂普通饲料。分别于PN14、PN21、PN28和PN42时,每组随机取5只仔鼠,观察海马CA1、CA3和DG区Ng表达。结果在PN14时,碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组仔鼠海马CA1区Ng蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);在PN21时,碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组仔鼠海马CA1区以及碘缺乏组、甲状腺功能减退2组仔鼠海马CA3区Ng蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);在PN28时,碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组仔鼠海马CA3区以及碘缺乏组、甲状腺功能减退2组仔鼠海马CA1区Ng蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);在PN42时,碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组仔鼠海马CA3区和CA1区Ng蛋白表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退可降低仔鼠海马CA1和CA3区Ng的表达。

妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退对仔鼠内嗅皮质神经颗粒素表达的影响

目的研究碘缺乏和甲状腺功能减退损伤内嗅皮质对神经颗粒素(neurogranin,Ng/RC3)表达的影响。方法将28只妊娠清洁级Wistar大鼠按体重随机分成对照组、碘缺乏组、甲状腺功能减退1、2组,每组7只。自妊娠第6天(GD6)起,碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料[碘含量为(14.11±1.96)ng/g],饮用自来水;甲状腺功能减退1、2组分别给予5和15mg/L丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)溶液作为饮用水,饲喂普通饲料[碘含量为(470.50±46.52)ng/g],直至仔鼠出生后第28天(PN28);对照组饮用自来水,饲喂普通饲料。分别于PN7、PN14、PN21、PN28和PN42时,每组随机取5只仔鼠,观察内嗅皮质Ng的表达。结果 PN7时,各组仔鼠内嗅皮质Ng表达水平间比较,差异无统计学意义。PN14时,甲状腺功能减退2组和碘缺乏组仔鼠内嗅皮质Ng表达水平低于对照组和甲状腺功能减退1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PN21,PN28和PN42时,甲状腺功能减退2组和碘缺乏组仔鼠内嗅皮质Ng表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);PN42时,甲状腺功能减退1组仔鼠内嗅皮质Ng表达水平亦低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,甲状腺功能减退1、2组和碘缺乏组内嗅皮质Ng染色强度明显降低。结论妊娠大鼠碘缺乏和甲状腺功能减退可降低仔鼠内嗅皮质Ng的表达。

碘缺乏和甲状腺功能减退仔鼠海马CaMKⅡ表达的改变

目的观察多功能钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在碘缺乏和甲状腺功能减退的大鼠仔鼠海马中蛋白表达的影响。方法健康2月龄雌性Wistar大鼠,交配妊娠后,取孕鼠28只,按体重随机分成对照组、甲状腺功能减退组和碘缺乏组,甲状腺功能减退组根据饮水中含丙基硫尿嘧啶(PTU)剂量分为5和15mg/L组,每组7只孕鼠。分别于出生后(PN)7、14、和21天时,每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,进行组织病理切片和免疫组化染色,观察分析海马CaMKⅡ表达。结果对照组仔鼠海马CA1、CA3和DG区均呈强阳性染色,在神经元细胞胞浆内充满CaMKⅡ。5、15mg/L和碘缺乏组仔鼠海马免疫反应产物的分布与对照组一致,但与对照组相比染色强度逐渐降低。PN21和PN14时,仔鼠海马CA1、CA3和DG区平均积分光密度在碘缺乏组[PN21:(26.05±4.98)、(30.79±3.22)、(26.40±2.63);PN14:(25.48±4.87)、(44.17±5.91)、(26.41±3.01)]和15mg/L组[PN21:(17.02±2.68)、(24.57±6.62)、(20.18±4.05);PN14:(20.66±3.51)、(34.94±5.09)、(27.32±4.97)]明显低于对照组[PN21:(57.75±13.22)、(65.03±6.20)、(49.39±8.41),P<0.05;PN14:(54.08±12.00)、(71.04±5.07)、(78.52±12.42),P<0.05]。PN7时,碘缺乏组和15mg/L组仔鼠海马CA1区平均积分光密度在碘缺乏组(25.74±3.33)和15mg/L组(26.89±5.25)明显低于对照组(40.53±3.65),P<0.05。结论碘缺乏和甲状腺功能减退可下调海马组织CaMKⅡ蛋白表达。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠小脑细胞外信号调节激酶1／2蛋白表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退（甲减）对大鼠仔鼠小脑细胞外信号调节激酶1／2（extracellular signal—regulate kinase，ERK1／2）蛋白表达的影响。方法健康Wistar大鼠28只，雌性，60日龄。将大鼠按体质量随机分为对照组、碘缺乏病组、甲减组，甲减组根据饮水中含丙基硫尿嘧啶（PrrU）剂量分为5mg／L组和15mg／L组。每组各7只。母鼠妊娠后，分别选用低碘饲料及PrrU饮水诱导建立低碘及甲减大鼠动物模型。仔鼠出生7、14、21、28、42d时分别处死，测定仔鼠小脑质量；取小脑组织进行镀银染色和免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（S—P）染色，光镜下观察小脑形态学变化，图像分析仪下观察ERK1／2蛋白表达。结果仔鼠出生14、21、28、42d时，小脑质量各组间比较差异有统计学意义（F=6．325、8．870、16．191、21．574，P均〈0．05）；碘缺乏病组仔鼠小脑质量[（0．0945±0．0233）、（0．1347±0．0046）、（0．1542±0．0094）、（0．1949±0．0048）g]明显低于对照组[（0．1856±0．0123）、（0．2049±0．0098）、（0．2268±0．0065）、（0．2606±0．0086）g，P均〈0．05]和甲减组[5mg／L组：（0．1741±0．0172）、（0．1927±0．0103）、（0．2181±0．0064）、（0．2583±0．0054）g，P均〈0．05；15mg／L组：（0．1604±0．0083）、（0．1682±0．0103）、（0．1996±0．0073）、（0．2579±0．0067）g，P均〈0．05]。出生7d时，对照组、甲减组仔鼠小脑皮质具有典型的层状结构，各层之间界限清晰，但碘缺乏病组各层之间界限模糊；出生21d时，与对照组比较，15mg／L组和碘缺乏病组仔鼠小脑外颗粒细胞消失延迟，仍有2～3层外颗粒细胞；出生28、42d时。甲减组和碘缺乏病组仔鼠小脑分子层厚度低于对照组。小脑组织ERK1／2平均积分光密度，在出生7d时，组间比较差异无统计学意义（F=1．102，P〉0．05）；在出生14、21、28、42d时，各组间比较差异有统计学意义（F=16．131、13．543、26．953、41．583，P均〈0．01）；碘缺乏病组（7．3245±0．5070）、（8．3606±1．0683）、（9．1217±1．0402）、（12．1587±0．7581）和甲减组[5mg／L组：（11．4307±15200）、（14．919±0．8497）、（16．0082±1．1130）、（15．7721±0．8293）；15mg／L组：（7．8538±0．9775）、（11．2461±0．8138）、（12．7800±1．3783）、（13．0871±1．1450）]明显低于对照组[（16．2831±0．5143）、（20．2653±0．9551）、（22．7485±1．0267）、（22．1725±0．9939），P均〈0．01]。结论碘缺乏和甲减可使仔鼠小脑产生明显的形态学改变，降低大鼠仔鼠小脑组织ERK1／2蛋白表达，影响神经系统的发育。