SNARE和synaptotagmin对学习记忆作用的研究进展

可溶性NSF附着蛋白受体(SNARE)复合物是神经元囊泡胞吐过程重要的一部分,一般认为它参与调节突触前膜融合过程。SNARE复合体核心蛋白主要有3个,突触小体相关蛋白(SNAP-25),syntaxin和囊泡相关蛋白(VAMP)。突触结合蛋白(synaptotagmin,syt)是一个钙感受器蛋白,通过和SNARE结合起到调控膜融合过程的作用。SNARE复合物中的syntaxin,SNAP-25以及syt基因的缺失可造成小鼠认知以及学习记忆损伤。本文主要综述两者在突触前膜的作用过程,并分析其对学习记忆的影响与其调节突触前膜融合过程密切相关,以期了解syntaxin,SNAP-25及syt影响学习记忆的分子机制。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马钙调蛋白表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马钙调蛋白(calmodulin)表达的影响。方法健康2月龄雌性Wistar大鼠,交配妊娠后,取孕鼠28只,按体重随机分成对照组、碘缺乏组、甲状腺功能减退1和2组。自怀孕第6天(gestational day6,GD6)起,碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料,饮用自来水;甲状腺功能减退1和2组分别给予5和15ppm丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)饮水,饲以普通饲料,至生后第28天(postnatal day28,PN28)。分别于PN7、PN14和PN21时,每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,进行组织病理切片和免疫组化染色,观察分析海马钙调蛋白表达。结果PN14和PN21时,在CA1和CA3区,15ppm组和碘缺乏组仔鼠海马钙调蛋白表达显著低于对照组(P<0.05)。在DG区,钙调蛋白与对照组相比,差异无统计学意义。PN7时,各区均几乎观察不到阳性反应产物,各组间蛋白表达差异无统计学意义。结论在本试验条件下,碘缺乏和甲状腺功能减退可下调海马CA1和CA3区钙调蛋白蛋白表达。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马ERK1/2表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马细胞外信号调节蛋白激酶1及2(ERK1/2)表达的影响。方法健康2月龄孕Wistar大鼠28只,按体重随机分成对照组、甲状腺功能减退组[按饮水中含丙基硫尿嘧啶(PTU)剂量分为5mg/L组和15mg/L组]和碘缺乏组,每组7只。分别于出生后第7、14、21、28和42天每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,用组织病理切片和免疫组化染色观察分析海马的ERK1/2表达。结果在出生后14、21、28和42天时,海马CA1和CA3区的ERK1/2表达在PTU5mg/L组、PTU15mg/L组和碘缺乏组显著低于对照组(P<0.05)。DG区的ERK1/2表达与对照组相比差异无显著性。出生后7天时,各组间ERK1/2表达差异无显著性。结论碘缺乏和甲状腺功能减退可降低海马CA1和CA3区的ERK1/2表达。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠内嗅皮质ERK1/2表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退损伤内嗅皮质对细胞外反应激酶1/2(extracellular response kinase1/2,ERK1/2)表达的影响。方法健康2月龄雌性Wistar大鼠,交配妊娠后,取孕鼠28只,按体重随机分成对照组、甲状腺功能减退组和碘缺乏组,甲状腺功能减退组根据饮水中含丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)剂量分为5ppm组和15ppm组,每组7只孕鼠。分别于出生后(postnatal day,PN)7d、PN14d、PN21d、PN28d和PN42d时,每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,进行组织病理切片和免疫组化染色,观察分析内嗅皮质ERK1/2表达。结果 PN14d、PN21d、PN28d和PN42d时,5ppm组、15ppm组和碘缺乏组仔鼠内嗅皮质钙调蛋白表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。PN7d时,各组间蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论在本试验条件下,碘缺乏和甲状腺功能减退可降低内嗅皮质ERK1/2表达。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠小脑CaM和CaN表达的影响

目的观察碘缺乏及甲状腺功能减退对大鼠仔鼠小脑发育的影响,以及对CaM、CaN表达的影响。方法W istar大鼠交配妊娠后,取孕鼠28只按体重随机分成对照组、甲状腺功能减退-1组、甲状腺功能减退-2组和碘缺乏组。自妊娠第6日起,对照组继续饲以普通饲料;甲减-1组、甲减-2组分别给予5 ppm、15 ppm丙基硫尿嘧啶饮水,饲以普通饲料;碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料,至仔鼠生后第28 d(PN28)。PN7、PN14、PN21、PN28、PN42取仔鼠小脑皮质进行CaM、CaN蛋白免疫组化染色。结果PN14、PN21、PN28及PN42时,甲减-2组和碘缺乏组仔鼠小脑皮质CaM的平均积分光密度值显著低于对照组和甲减-1组,具有统计学意义(P<0.05);碘缺乏组仔鼠小脑皮质CaN表达均显著高于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论碘缺乏和甲状腺功能减退可影响大鼠仔鼠小脑CaM、CaN蛋白的表达,从而损害仔鼠小脑,导致脑神经发育障碍。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠小脑发育的损伤及CaMKⅡ表达的影响

目的观察碘缺乏及甲状腺功能减退大鼠仔鼠小脑发育的影响,以及对CaMKⅡ表达的影响。方法雌性Wistar大鼠,交配妊娠后,取孕鼠28只按体重随机分成对照组、甲状腺功能减退-1组、甲状腺功能减退-2组和碘缺乏组。自妊娠第6日起,对照组继续饲以普通饲料;甲减-1组、甲减-2组分别给予5ppm、15ppm丙基硫尿嘧啶饮水,饲以普通饲料;碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料,至仔鼠生后第28天(PN28)。PN7、PN14、PN21、PN28、PN42取仔鼠小脑皮质进行尼氏染色及CaMKⅡ蛋白免疫组化染色。结果 PN14、PN21、PN28及PN42各组大鼠仔鼠小脑神经元的尼氏小体的平均积分光密度值显著低于对照组,具有统计学意义(P<0.05);仔鼠小脑皮质CaMKⅡ表达均显著低于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论碘缺乏和甲状腺功能减退可影响大鼠仔鼠小脑CaMKⅡ蛋白的表达,从而损害仔鼠小脑,导致脑神经发育障碍。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠小脑cAMP反应元件结合蛋白表达的影响

目的研究碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠小脑cAMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响。方法分别选用低碘饲料及丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)饮水诱导建立低碘及甲状腺功能减退Wistar大鼠动物模型,按体重随机分成对照组、甲状腺功能减退组(5mg/LPTU组、15mg/LPTU组)和碘缺乏组,出生后第14天(PN14)、PN21、PN28、PN42时,测定仔鼠小脑重量,PN7、PN14、PN21、PN28、PN42时取小脑组织进行免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)染色,用图像分析方法分析大鼠仔鼠小脑皮质CREB表达情况。结果PN14、PN21、PN28、PN42时,碘缺乏组小脑重量显著低于对照组和甲状腺功能减退组(P<0.05)。PN7时,各组之间小脑组织CREB平均积分光密度值差别不明显,而PN14,PN21,PN28和PN42时,5、15mg/LPTU组和碘缺乏组平均积分光密度值均低于对照组(P<0.05)。结论碘缺乏和甲状腺功能减退可降低大鼠仔鼠小脑组织CREB表达,影响神经系统的发育。

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠内嗅皮质CaMKⅡ表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退损伤内嗅皮质对钙调蛋白依赖性蛋白激酶(calcium/calmodulin pro-tein kinase II,CaMKⅡ)表达的影响。方法健康2月龄雌性Wistar大鼠,交配妊娠后,取孕鼠28只,按体重随机分成对照组、甲状腺功能减退组和碘缺乏组,甲状腺功能减退组根据饮水中含丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)剂量分为5ppm组和15 ppm组,每组7只孕鼠。分别于PN7、PN14、PN21、PN28和PN42时,每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,进行组织病理切片和免疫组化染色,观察分析内嗅皮质CaMKⅡ表达。结果PN7,PN14和PN21时,15 ppm组和碘缺乏组仔鼠内嗅皮质CaMKⅡ的表达显著低于对照组(P<0.05),PN28和PN42时,5 ppm组、15 ppm组和碘缺乏组仔鼠内嗅皮质CaMKⅡ的表达亦显著低于对照组(P<0.05)。结论碘缺乏和甲状腺功能减退可降低内嗅皮质CaMKⅡ表达。